Vitamin B12-tilskudd under graviditet

Studieområde: En fødselsklinikk i Mirpur med et betydelig antall gravide kvinner som melder seg på hver måned (ca. 300-400/måned) vil bli valgt ut for rekruttering av lokale gravide kvinner. Samfunnet i Mirpur har en lav ut-migrasjonsrate. Gravide kvinner som går på klinikken ved 11-14 ukers svangerskap og planlegger å føde på klinikken for å sikre sikker fødsel vil bli valgt. Den strukturerte tjenesten og standard svangerskapsomsorgen til klinikken for sikker fødsel og svangerskapsomsorg vil bli gitt til hver studiedeltaker.

Studiepopulasjon: Gravide kvinner (n=120) vil bli screenet i løpet av 11-14 uker av svangerskapet. Spedbarn (n=120) ved 3 måneders alder.

Inklusjonskriterier:

• Hb-nivå i området 7,0-11 g/dL
• Alder: 22-35 år
• Mødre i begynnelsen av andre trimester (dvs. ved 11-14 ukers svangerskap)
• Villig til å bli i Dhaka under graviditet og villig til å bli innlagt på klinikken for levering
• Selvrapportert siste menstruasjonsperiode (LMP) og uringraviditetstest vil bli brukt for å bestemme svangerskapsalderen.

Ekskluderingskriterier:

• Kvinner med alvorlig anemi; hemoglobinkonsentrasjon <7,0 g/dL
• Historie eller tilstedeværelse av systemisk sykdom
• H/O av tidligere kompliserte svangerskap eller av preterm fødsel, abort
• Mottak av influensavaksine Definisjon: I følge WHO er anemi definert som en hemoglobinkonsentrasjon <12 g/dL hos voksne kvinner. Anemi er videre kategorisert som mild (10-11.9 g/dL), moderat (7,0-9,9 g/dL) og alvorlig (<7,0 g/dL).

Studiedesign: En dobbeltblind kontrollert studie; Etter at informert samtykke er innhentet, vil gravide kvinner tilfeldig tildeles enten placebogruppen (N=60) som vil motta 60 mg Fe og 400 µg folat daglig, eller tilskuddsgruppen (N=60) som vil motta 250 µg vitamin B12 i tillegg til 60 mg Fe og 400 µg folat. En tredjepart (GlaxoSmithKline, Bangladesh) vil tilberede og levere vitamin B12 eller placebokapsel i flasker. De to kapslene vil være like i utseende og smak. De vil merke flaskene som A og B. Ansvarlig personell fra selskapet vil holde det konfidensielt frem til slutten av studien. Kapselen A eller B som skal mottas av den første deltakeren vil bli bestemt ved et lotteri, og deretter vil hver alternative deltaker motta den kapselen. ID-ene til deltakerne vil bli gitt sekvensielt. Det daglige tilskuddet av jern-folat så vel som av B12 vil fortsette opptil 3 måneder etter fødselen. Ved 26-28 svangerskapsuker vil alle mødre få en enkelt inaktivert, trivalent influensavirusvaksine intramuskulært (IM). Standard inaktivert trivalent influensa som anbefalt av WHO for den nordlige halvkule vil bli innhentet fra kommersielle kilder for dette prosjektet (GlaxoSmithKline; Dresden, Tyskland). Feltarbeidere (FW) vil levere to ukers dose av enten placebo eller kosttilskudd til mødre personlig og vil sjekke samsvar med kort og resterende piller. De gravide vil få tydelige instrukser om tidspunkt for påfølgende oppfølgingsbesøk, og ved oppfølging i respektive hjem vil de bli påminnet om datoene.

Rutinetjeneste: Den rutinemessige pleien som tilbys av klinikken inkluderer Hb-måling, fysisk undersøkelse (vekt, blodtrykk, puls, magekontroll, føtal hjertefrekvens, ultralydundersøkelse ved behov), rådgivning om kosthold, beskrivelser av normale prosedyrer under svangerskapet , tilhørende potensielle komplikasjoner, hvordan og når du skal gå til klinikken under slike hendelser etc. Denne tjenesten ytes av klinikklegen med bistand fra sykepleierne.

Prøver: Fastende perifert blod vil bli tatt fra mødre ved 11 til 14 ukers svangerskap, navlestrengsblod ved fødsel, råmelk innen 24 timer og morsmelk og perifert blod fra mødre etter tre måneder etter fødselen. Perifert blod fra spedbarn vil bli samlet inn ved tre måneders alder. Blod vil bli samlet i antikoagulant (EDTA) belagte rør og lagt på Ficoll-paque for tetthetsgradient sentrifugering; plasma vil bli separert fra toppen og lagret ved -70ºC for senere analyse. Perifere mononukleære blodceller (PBMC) vil bli separert for å studere cellulære immunresponser. Urin vil bli samlet inn fra mødre ved 11 - 14 ukers svangerskap og ved tre måneder. For genbaserte studier vil DNA-prøvene fjernes og identiteten gjøres anonym i henhold til standardprosedyrene.

Metoder: Totalt hemoglobin (Hb) i fullblod vil bli målt ved spektrofotometri ved bruk av Drabakins Reagent (Sigma Diagnostics). Standardisert blodprøvefarging vil bli brukt for å evaluere megaloblastisk anemi (tilstedeværelse av makroovalocytter og hypersegmenterte nøytrofiler). Ferritin, serumtransferrinreseptor (sTfR) og α-glykoprotein (AGP) vil bli målt i plasma ved hjelp av enzymimmunanalyser. Vitamin B12 og folat i plasma og vitamin B12 i morsmelk vil bli analysert i Roche autoanalyzer Cobas e411. Urinmetylmalonsyre (MMA) vil bli målt ved hjelp av fluorescensdetektorassistert HPLC-metode (Sigma Diagnostics, St. Louis, MO. Kort fortalt vil MMA ekstraheres fra urinprøve med etylacetat. Ekstraktet tørkes og derivatiseres med monodansylcadaverin og dicykloheksylkarbodiimid før injeksjon på HPLC. Etylmalonsyre vil bli brukt som intern standard. Influensavaksinespesifikke antistoffresponser (IgA, IgG) i plasma og råmelk/morsmelk [sekretorisk IgA (s-IgA)] vil bli målt med ELISA. PBMC vil bli stimulert med influensavaksine for blastogensisrespons. Genomisk DNA-metylering vil bli målt ved metylakseptanalysen basert på evnen til isolert DNA til å "akseptere" radiomerkede metylgrupper fra S-[3H-metyl] adenosylmetionin, ved bruk av den bakterielle CpG-metyltransferase SssI. Totalt homocystein (tHcy) vil bli målt i urinprøver ved å bruke HPLC med fluorimetrisk deteksjon der tioler i kolonneavløpet detekteres av en enkelt gull-kvikksølv-elektrode. NaBH4 brukes som reduksjonsmiddel, og det er ikke nødvendig med derivatisering av prøven. Mutasjoner i ALPL-, MTHFR C677T- og FUT2-genene vil bli bestemt ved PCR-RFLP-analyse og DNA-sekvensering. Alle disse analysene vil bli utført i Nutritional Biochemistry Lab som har fasilitetene til å bestemme biokjemiske markører for anemi, vaksinespesifikke antistoffresponser, DNA-metylering og polymorfismeanalyser.

Vurdering av antropometri og sykelighet: Antropometriske målinger av mor vil bli tatt i begynnelsen av tilskudd og månedlig i perioden etter tilskudd av trente FWs. Fødselsvekt og liggende lengde vil bli tatt innen 72 timer etter fødsel og månedlige målinger vil bli tatt av FW opp til 3 mnd. Ved hvert besøk (hver fjortende dag) vil Field Research Assistant (FRA) samle inn data fra mødre om sykelighet hos mødre og deres spedbarn (f.eks. diaré, luftveisinfeksjoner, hudsykdommer, vurdering av alvorlighetsgraden av sykdomsepisoder) de siste 7 dagene ved bruk av strukturerte spørreskjemaer. FRA-ene vil informere kvinnene om tidspunktet for de første og påfølgende oppfølgingsbesøkene, og sørge for at de har forstått klart. I tillegg vil studiedeltakerne bli kontaktet over mobiltelefoner når de er tilgjengelige for å minne dem om besøksdatoene. Ved oppfølging i respektive hjem vil de bli påminnet om neste besøksdato.

Depresjonsscore: Deltakerne vil bli intervjuet om deres mentale status ved å bruke spørreskjemaet Senter for epidemiologiske studier-depresjon (CES-D). Spørreskjemaet inneholder 20 elementer som omfatter seks hovedaspekter ved depresjon: deprimert humør, håpløshet, verdiløshet, tretthet, appetitt og søvnforstyrrelser. Den ble oversatt til bengali og testet i tidligere studier og involverer hvordan kvinnene hadde det i løpet av de siste 7 dagene. Det har tidligere blitt brukt i landlige og urbane bangladeshiske kvinner (Hamadani, upubliserte data) og funnet å korrelere fornuftig med barns vekst og utvikling. FRA-ene vil bli grundig opplært til å intervjue kvinnene, og inter-observatør-pålitelighet vil bli oppnådd før og under studien. Intervjuet vil bli gjennomført to ganger hjemme hos kvinnene under FRAs besøk, først ved baseline og 3 mnd postpartum. Dataene vil bli analysert og tolket av en av medetterforskerne (JDH) som har kunnskap og erfaring i å håndtere denne typen informasjon.

Matsikkerhet og kostholdsmangfold: Effekten av matusikkerhet på matinntak, helse og ernæringsstatus har blitt observert i mange utviklingsland som viser betydelig lavere totale daglige matutgifter per innbygger i matusikre husholdninger enn matsikre husholdninger. Matusikkerhet var assosiert med mødres angst og depresjon, noe som kan ha sterk negativ innvirkning på spedbarnsomsorgspraksis, inkludert ammingens varighet så vel som barnets ernæringsstatus. Omtrent halvparten av befolkningen i Bangladesh er matusikre. Sult og underernæring hos barn i Bangladesh er blant de høyeste i verden. Omtrent 31 % av landbefolkningen i Bangladesh lider av «kronisk fattigdom» og omtrent 19 % av husholdningene på landsbygda kan ikke ha «hele tre måltider» om dagen. Derfor er matusikkerhet i husholdninger i forhold til dens enorme innvirkning på helse og ernæringsstatus på mennesker en økende bekymring i Bangladesh. Husholdningens matsikkerhetsstatus og kostholdsmangfoldet til studiedeltakerne (inkludert mors diettenergi, protein, vitamin B-12 og folatinntak) vil bli vurdert først, ved baseline når de gravide vil bli registrert i studien og deretter hver fjortende dag gjennom hele studien. studere. USDA matsammensetningsdatabase vil bli brukt for å vurdere vitamin B-12-inntak. Enhver sesongvariasjon i matsikkerhetsstatusen vil bli vurdert som kan ha betydelig innvirkning på utfallsmålene. Strukturert spørreskjema om matsikkerhetsmodul vil bli brukt til å måle matsikkerhetsstatus i husholdninger. FRA-ene vil bli opplært til å intervjue kvinnene; de vil ta intervjuer når de avlegger besøk i svangerskaps- og fødselsperioden i hjemmet. Dataene vil bli analysert og tolket av en av medetterforskerne (KKS) som har kunnskap og erfaring med å håndtere denne typen informasjon.