Siittiöiden pään tyhjien ja siittiöiden DNA-muutosten välinen suhde hedelmättömillä miehillä (VATES)
Liittyvätkö siittiöiden pään vakuolit siittiöiden ydinmuutoksiin?
Miehillä, joilla on siittiömuutoksia, geneettisesti vahingoittumattomien siittiöiden valintaa on parannettava, jotta avusteisten lisääntymishoitojen onnistuminen lisääntyisi.
Tämän tutkimuksen tavoitteena on selvittää, liittyykö siittiöiden pään vakuolien esiintyminen siittiöiden DNA:n muutoksiin.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Intrasytoplasmisen siittiöinjektion (ICSI) käyttö on parantanut huomattavasti miesten vaikean hedelmättömyyden hoitoa, erityisesti miehillä, joilla on oligoastheno-teratozoospermia (OAT). Tämä koeputkihedelmöitysmenetelmä mahdollistaa yhden siittiön suoran ruiskutuksen munasoluun. ICSI:ssä käytettävä siittiö valitaan mikroskoopilla 400-kertaisella suurennuksella. Useat tutkimukset ovat raportoineet, että de novo kromosomaaliset poikkeavuudet lisääntyvät ICSI:stä syntyneillä lapsilla, mikä herättää kysymyksen ICSI:ssä käytettyjen siittiöiden geneettisestä laadusta.
Vuonna 2001 kehitettiin menetelmä nimeltä MSOME (high Magnification Motile Sperm Organelle Morphology Examination), joka mahdollistaa liikkuvien siittiöiden yksityiskohtaisen morfologisen arvioinnin reaaliajassa ja suurella suurennuksella (6600x). Tällä tekniikalla havaittiin hienoja morfologisia poikkeavuuksia - pääasiassa vakuoleja siittiöiden päässä. MSOME:n käyttö morfologisesti normaalien siittiöiden havaitsemiseen ICSI:tä varten johti tekniikaksi nimeltä IMSI (Intracytoplasmic Morphologically Selected sperm Injection). IMSI:llä saavutettiin korkeammat raskausluvut kuin ICSI:llä, ja siittiöiden pään tyhjiöjen havaittiin vaikuttavan negatiivisesti avusteisen lisääntymisen onnistumiseen ja alkion kehitykseen. IMSI:n käyttö vähentää myös sukupuolikromosomien aneuploidian riskiä alkioissa.
Useat kirjoittajat havaitsivat, että suurten vakuolien esiintyminen siittiön päässä korreloi useiden ydinmuutosten kanssa: DNA:n fragmentoituminen, epänormaali kromatiinin kondensaatio ja aneuploidia. Nämä tutkimukset ovat kuitenkin kiistanalaisia, ja ne suoritettiin harvoille siittiöille. Normaalin kromosomipitoisuuden omaavien siittiöiden valinnan parantamiseksi on olennaista paitsi vahvistaa siittiöiden pään tyhjiöjen ja muuttuneen siittiön ydinlaadun välinen suhde, vaan myös karakterisoida nämä muutokset paremmin.
Tämän tutkimuksen päätavoitteena on tutkia korrelaatiota siittiöiden pään vakuolialueiden ja siittiöiden aneuploidiasteiden välillä miehillä, joilla on eristetty teratozoospermia tai OAT. Vakuolialueet mitataan kromosomien 18, X ja Y osalta MSOME:lla ja aneuploidisuusasteet FISH:lla. Lisäksi arvioidaan korrelaatio siittiöiden pään tyhjiöalueiden ja muiden tumamuutosten (DNA-fragmentoituminen, epänormaali kromatiinin kondensaatio, telomeerien poikkeavuudet) välillä. Siemennestenäytteet 200 potilaalta, jotka on värvätty kahden vuoden aikana, kerätään, säilytetään ja analysoidaan.
Tämä tutkimus sisältää asiaankuuluvien lääketieteellisten tietojen keräämisen. Potilastietokannan tietokonesivusto on suojattu ja suojattu salasanalla. Tiedot syötetään ja vain tutkijat näkevät ne. Tarkkailukäyntejä paikan päällä tehdään koko tutkimuksen ajan.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
-
Lille, Ranska
- Laboratoire de spermiologie, Hôpital Calmette, CHRU de Lille
-
Rouen, Ranska, 76031
- Laboratoire de Biologie de la Reproduction - CECOS - EA 4308, CHU - Hôpitaux de Rouen
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- miehet
- 18 vuotta vanha tai vanhempi
- kuulu sosiaaliturvaan
joilla on eristetty teratozoospermia tai oligo-astheno-teratozoospermia WHO:n ohjeiden (2010) mukaan:
- siittiöiden pitoisuus < 15 miljoonaa per ml tai siittiöiden määrä < 39 miljoonaa siemensyöksyä kohti
- progressiivinen liikkuvuus < 35 %
- morfologisesti normaaleja muotoja < 50 % muunnetun Davidin luokituksen mukaan (Auger et al., 2001)
- liikkuvat siittiöt, jotka on valittu tiheysgradienttisentrifugoinnilla > 1 miljoona, aikaisemmissa spermogrammeissa
- normaaleilla perustuslaillisilla karyotyypeillä (46, XY)
- allekirjoittanut tietoisen suostumuksen
Poissulkemiskriteerit:
- joilla on epänormaalit perustuslailliset karyotyypit
- spermaparametrit muuttuvat merkittävästi, liikkuvat siittiöt valitaan tiheysgradienttisentrifugoinnilla < 1 miljoonaa
- hoitajan tai holhouksen alaisena oikeuden määräyksellä
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Ei käytössä
- Inventiomalli: Yksittäinen ryhmätehtävä
- Naamiointi: Ei mitään (avoin tarra)
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Altered spermograms
Men with altered spermograms (isolated teratozoospermia or oligo-astheno-teratozoospermia)
|
The study will focus on sperm samples collected via masturbation for routine pre-IVF screening tests, taken from patients with isolated teratozoospermia or oligoasthenozoospermia.
The various tests and analyses planned will be carried out on sperm not used for IVF or diagnostic purposes.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Korrelaatiokerroin siittiöiden päiden keskimääräisten vakuolipintojen (mitattu MSOME:lla) ja siittiöiden aneuploidiasteiden välillä kromosomissa X, Y ja 18 (arvioituna FISH:lla)
Aikaikkuna: jopa 30 kuukautta
|
jopa 30 kuukautta
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Aikaikkuna |
|---|---|
|
Siittiöiden kokonaismäärä
Aikaikkuna: 1 päivä
|
1 päivä
|
|
Liikkuvien siittiöiden prosenttiosuus
Aikaikkuna: 1 päivä
|
1 päivä
|
|
Morfologisesti epänormaalien siittiöiden prosenttiosuus
Aikaikkuna: 1 päivä
|
1 päivä
|
|
Vakuolialueen keskimääräinen kynnys (mitattu vastaanottimen toimintaominaisuuksien käyrillä)
Aikaikkuna: jopa 30 kuukautta
|
jopa 30 kuukautta
|
|
Vakuolialueiden ja siittiöiden DNA:n fragmentaation välinen korrelaatiokerroin (arvioitu TUNEL-analyysillä)
Aikaikkuna: jopa 30 kuukautta
|
jopa 30 kuukautta
|
|
Vakuolialueiden ja epänormaalin kromatiinin kondensaation välinen korrelaatiokerroin (arvioitu aniliinisinisellä värjäyksellä)
Aikaikkuna: jopa 30 kuukautta
|
jopa 30 kuukautta
|
|
Vakuolialueiden ja telomeerien lukumäärän, jakautumisen ja pituuden välinen korrelaatiokerroin (kvantitatiivisella FISH:lla arvioituna)
Aikaikkuna: jopa 30 kuukautta
|
jopa 30 kuukautta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Nathalie Rives, MD., PhD., Laboratoire de Biologie de la Reproduction - CECOS - EA 4308, CHU - Hôpitaux de Rouen
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Franco JG Jr, Baruffi RL, Mauri AL, Petersen CG, Oliveira JB, Vagnini L. Significance of large nuclear vacuoles in human spermatozoa: implications for ICSI. Reprod Biomed Online. 2008 Jul;17(1):42-5. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60291-x.
- Antinori M, Licata E, Dani G, Cerusico F, Versaci C, d'Angelo D, Antinori S. Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection: a prospective randomized trial. Reprod Biomed Online. 2008 Jun;16(6):835-41. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60150-2.
- Auger J, Eustache F, Andersen AG, Irvine DS, Jorgensen N, Skakkebaek NE, Suominen J, Toppari J, Vierula M, Jouannet P. Sperm morphological defects related to environment, lifestyle and medical history of 1001 male partners of pregnant women from four European cities. Hum Reprod. 2001 Dec;16(12):2710-7. doi: 10.1093/humrep/16.12.2710.
- Bartoov B, Berkovitz A, Eltes F. Selection of spermatozoa with normal nuclei to improve the pregnancy rate with intracytoplasmic sperm injection. N Engl J Med. 2001 Oct 4;345(14):1067-8. doi: 10.1056/NEJM200110043451416. No abstract available.
- Bartoov B, Berkovitz A, Eltes F, Kogosovsky A, Yagoda A, Lederman H, Artzi S, Gross M, Barak Y. Pregnancy rates are higher with intracytoplasmic morphologically selected sperm injection than with conventional intracytoplasmic injection. Fertil Steril. 2003 Dec;80(6):1413-9. doi: 10.1016/j.fertnstert.2003.05.016.
- Boitrelle F, Ferfouri F, Petit JM, Segretain D, Tourain C, Bergere M, Bailly M, Vialard F, Albert M, Selva J. Large human sperm vacuoles observed in motile spermatozoa under high magnification: nuclear thumbprints linked to failure of chromatin condensation. Hum Reprod. 2011 Jul;26(7):1650-8. doi: 10.1093/humrep/der129. Epub 2011 May 2.
- Bonduelle M, Van Assche E, Joris H, Keymolen K, Devroey P, Van Steirteghem A, Liebaers I. Prenatal testing in ICSI pregnancies: incidence of chromosomal anomalies in 1586 karyotypes and relation to sperm parameters. Hum Reprod. 2002 Oct;17(10):2600-14. doi: 10.1093/humrep/17.10.2600.
- Figueira Rde C, Braga DP, Setti AS, Iaconelli A Jr, Borges E Jr. Morphological nuclear integrity of sperm cells is associated with preimplantation genetic aneuploidy screening cycle outcomes. Fertil Steril. 2011 Mar 1;95(3):990-3. doi: 10.1016/j.fertnstert.2010.11.018. Epub 2010 Dec 4.
- Foresta C, Garolla A, Bartoloni L, Bettella A, Ferlin A. Genetic abnormalities among severely oligospermic men who are candidates for intracytoplasmic sperm injection. J Clin Endocrinol Metab. 2005 Jan;90(1):152-6. doi: 10.1210/jc.2004-1469. Epub 2004 Oct 27.
- Franco JG Jr, Mauri AL, Petersen CG, Massaro FC, Silva LF, Felipe V, Cavagna M, Pontes A, Baruffi RL, Oliveira JB, Vagnini LD. Large nuclear vacuoles are indicative of abnormal chromatin packaging in human spermatozoa. Int J Androl. 2012 Feb;35(1):46-51. doi: 10.1111/j.1365-2605.2011.01154.x. Epub 2011 Apr 28.
- Garolla A, Fortini D, Menegazzo M, De Toni L, Nicoletti V, Moretti A, Selice R, Engl B, Foresta C. High-power microscopy for selecting spermatozoa for ICSI by physiological status. Reprod Biomed Online. 2008 Nov;17(5):610-6. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60307-0.
- Hazout A, Dumont-Hassan M, Junca AM, Cohen Bacrie P, Tesarik J. High-magnification ICSI overcomes paternal effect resistant to conventional ICSI. Reprod Biomed Online. 2006 Jan;12(1):19-25. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60975-3.
- Oliveira JB, Massaro FC, Baruffi RL, Mauri AL, Petersen CG, Silva LF, Vagnini LD, Franco JG Jr. Correlation between semen analysis by motile sperm organelle morphology examination and sperm DNA damage. Fertil Steril. 2010 Oct;94(5):1937-40. doi: 10.1016/j.fertnstert.2010.01.042. Epub 2010 Mar 2.
- Perdrix A, Travers A, Chelli MH, Escalier D, Do Rego JL, Milazzo JP, Mousset-Simeon N, Mace B, Rives N. Assessment of acrosome and nuclear abnormalities in human spermatozoa with large vacuoles. Hum Reprod. 2011 Jan;26(1):47-58. doi: 10.1093/humrep/deq297. Epub 2010 Nov 18.
- Van Steirteghem A, Bonduelle M, Devroey P, Liebaers I. Follow-up of children born after ICSI. Hum Reprod Update. 2002 Mar-Apr;8(2):111-6. doi: 10.1093/humupd/8.2.111.
- Vanderzwalmen P, Hiemer A, Rubner P, Bach M, Neyer A, Stecher A, Uher P, Zintz M, Lejeune B, Vanderzwalmen S, Cassuto G, Zech NH. Blastocyst development after sperm selection at high magnification is associated with size and number of nuclear vacuoles. Reprod Biomed Online. 2008 Nov;17(5):617-27. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60308-2.
- Watanabe S, Tanaka A, Fujii S, Mizunuma H, Fukui A, Fukuhara R, Nakamura R, Yamada K, Tanaka I, Awata S, Nagayoshi M. An investigation of the potential effect of vacuoles in human sperm on DNA damage using a chromosome assay and the TUNEL assay. Hum Reprod. 2011 May;26(5):978-86. doi: 10.1093/humrep/der047. Epub 2011 Feb 28.
- Wilding M, Coppola G, di Matteo L, Palagiano A, Fusco E, Dale B. Intracytoplasmic injection of morphologically selected spermatozoa (IMSI) improves outcome after assisted reproduction by deselecting physiologically poor quality spermatozoa. J Assist Reprod Genet. 2011 Mar;28(3):253-62. doi: 10.1007/s10815-010-9505-5. Epub 2010 Nov 12.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Arvioitu)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- 2013/005/HP
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .
Kliiniset tutkimukset Miesten hedelmättömyys
-
Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child...RekrytointiSynnynnäinen lisämunuaisen hyperplasia (CAH) | Familial Male-Limited Precocious Puberty (FMPP)Yhdysvallat
Kliiniset tutkimukset Sperm Samples
-
Instituto Valenciano de Infertilidad, IVI VALENCIAIVI MadridRekrytointiLapsettomuus, mies | Siittiöiden määrä, alhainenEspanja
-
Institut Pasteur de MadagascarJohns Hopkins Bloomberg School of Public Health; National Tuberculosis Program... ja muut yhteistyökumppanitValmisTuberkuloosiMadagaskar