A spermiumfej vakuólumai és a spermium DNS-változásai közötti kapcsolat meddő férfiakban (VATES)
A spermiumfej vakuólumai összefüggésben állnak a spermiumok sejtmag-elváltozásaival?
Azoknál a férfiaknál, akiknél a spermiumok elváltozásai vannak, javítani kell a genetikailag sértetlen spermiumok szelekcióját az asszisztált reprodukciós kezelések sikerének növelése érdekében.
Ennek a vizsgálatnak a célja annak meghatározása, hogy a spermiumfej vakuólumainak jelenléte összefüggésben áll-e a spermium DNS-változásaival.
A tanulmány áttekintése
Részletes leírás
Az intracitoplazmatikus spermium injekció (ICSI) alkalmazása nagymértékben javította a súlyos férfi meddőség kezelését, különösen az oligo-astheno-teratozoospermiában (OAT) szenvedő férfiak esetében. Ez az in vitro megtermékenyítési eljárás lehetővé teszi egyetlen spermium közvetlen befecskendezését egy petesejtekbe. Az ICSI-hez használt spermát mikroszkóp alatt, 400-szoros nagyítással választják ki. Számos tanulmány beszámolt arról, hogy a de novo kromoszóma-rendellenességek megnövekednek az ICSI-ből született gyermekekben, ami felveti az ICSI-hez használt spermiumok genetikai minőségének kérdését.
2001-ben fejlesztették ki az MSOME (high Magnification Motile Sperm Organelle Morphology Examination) nevű módszert, amely lehetővé teszi a mozgó spermiumok részletes morfológiai értékelését valós időben és nagy (6600x) nagyítás mellett. Ezzel a technikával finom morfológiai eltéréseket - főként a spermiumok fejében lévő vakuolákat - mutattunk ki. Az MSOME használata a morfológiailag normális spermiumok kimutatására az ICSI-hez az IMSI (Intracytoplasmic Morphologically Selected sperm Injection) technikát eredményezett. Az IMSI-vel magasabb terhességi arányt értek el, mint az ICSI-vel, és azt találták, hogy a spermiumfej vakuólumai negatívan befolyásolják az asszisztált reprodukciós siker arányát és az embriófejlődést. Az IMSI alkalmazása csökkenti a nemi kromoszóma aneuploidia kockázatát is az embriókban.
Számos szerző azt találta, hogy a nagy vakuolák jelenléte a spermiumfejben számos nukleáris elváltozással korrelál: DNS fragmentációval, rendellenes kromatinkondenzációval és aneuploidiával. Ezek a vizsgálatok azonban ellentmondásosak, és kevés spermiumon végezték őket. A normál kromoszóma tartalmú hímivarsejtek szelekciójának javítása érdekében nem csak a spermiumfej vakuólumok és a megváltozott spermiummagminőség közötti kapcsolat igazolása, hanem ezen elváltozások jobb jellemzése is elengedhetetlen.
A tanulmány fő célja a spermiumfej vakuólumainak területei és a spermiumok aneuploidia aránya közötti összefüggés vizsgálata izolált teratozoospermiában vagy OAT-ban szenvedő férfiakban. A vakuólumok területét az MSOME, az aneuploiditási arányt pedig a FISH segítségével mérjük a 18., X és Y kromoszómák esetében. Ezen túlmenően a spermiumfej vakuólumainak területei és más nukleáris elváltozások (DNS fragmentáció, rendellenes kromatin kondenzáció, telomer-rendellenességek) közötti összefüggést is értékeljük. 200, 2 év alatt toborzott beteg spermamintáját gyűjtik, tárolják és elemzik.
Ez a tanulmány a vonatkozó orvosi információk összegyűjtését foglalja magában. A betegadatbázis számítógépes webhelye biztonságos és jelszóval védett. Az információkat beviszik és csak a nyomozók tekinthetik meg. A vizsgálat teljes ideje alatt helyszíni ellenőrző látogatásokra kerül sor.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Fázis
- Nem alkalmazható
Kapcsolatok és helyek
Tanulmányi helyek
-
-
-
Lille, Franciaország
- Laboratoire de spermiologie, Hôpital Calmette, CHRU de Lille
-
Rouen, Franciaország, 76031
- Laboratoire de Biologie de la Reproduction - CECOS - EA 4308, CHU - Hôpitaux de Rouen
-
-
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányi populáció
Leírás
Bevételi kritériumok:
- férfiak
- 18 éves vagy idősebb
- társadalombiztosításhoz kötődik
izolált teratozoospermiával vagy oligo-astheno-teratozoospermiával a WHO irányelvei szerint (2010):
- spermiumkoncentráció < 15 millió/ml vagy spermiumszám < 39 millió ejakulátumonként
- progresszív motilitás < 35%
- morfológiailag normális formák < 50% a módosított David-féle besorolás szerint (Auger et al., 2001)
- Sűrűséggradiens centrifugálással kiválasztott mobil spermiumok > 1 millió, korábbi spermogramokon
- normál alkati kariotípusokkal (46, XY)
- tájékozott beleegyező nyilatkozatot írt alá
Kizárási kritériumok:
- abnormális alkati kariotípusokkal
- a spermiumparaméterek jelentős megváltozásával, sűrűséggradiens centrifugálással kiválasztott mobil spermiumokkal <1 millió
- neveltetés vagy gondnokság alatt áll bírósági végzéssel
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Alapvető tudomány
- Kiosztás: N/A
- Beavatkozó modell: Egyetlen csoportos hozzárendelés
- Maszkolás: Nincs (Open Label)
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Kísérleti: Altered spermograms
Men with altered spermograms (isolated teratozoospermia or oligo-astheno-teratozoospermia)
|
The study will focus on sperm samples collected via masturbation for routine pre-IVF screening tests, taken from patients with isolated teratozoospermia or oligoasthenozoospermia.
The various tests and analyses planned will be carried out on sperm not used for IVF or diagnostic purposes.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Időkeret |
|---|---|
|
Korrelációs együttható a spermiumfejekben lévő vakuólumok átlagos területei között (MSOME-val mérve) és az X, Y és 18 kromoszómák sperma aneuploiditási aránya között (FISH alapján)
Időkeret: 30 hónapig
|
30 hónapig
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Időkeret |
|---|---|
|
Teljes spermiumszám
Időkeret: 1 nap
|
1 nap
|
|
A mobil spermiumok százalékos aránya
Időkeret: 1 nap
|
1 nap
|
|
A morfológiailag rendellenes spermiumok százalékos aránya
Időkeret: 1 nap
|
1 nap
|
|
Átlagos vakuola terület küszöbértéke (a vevő működési jellemzői görbéivel mérve)
Időkeret: 30 hónapig
|
30 hónapig
|
|
Korrelációs együttható a vakuólumok területei és a spermium DNS fragmentációja között (TUNEL-analízissel értékelve)
Időkeret: 30 hónapig
|
30 hónapig
|
|
Korrelációs együttható a vakuólumok területei és a kóros kromatinkondenzáció között (anilin kék festéssel értékelve)
Időkeret: 30 hónapig
|
30 hónapig
|
|
Korrelációs együttható a vakuólumok területei és a telomerszám, eloszlás és hosszúság között (kvantitatív FISH segítségével értékelve)
Időkeret: 30 hónapig
|
30 hónapig
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: Nathalie Rives, MD., PhD., Laboratoire de Biologie de la Reproduction - CECOS - EA 4308, CHU - Hôpitaux de Rouen
Publikációk és hasznos linkek
Általános kiadványok
- Franco JG Jr, Baruffi RL, Mauri AL, Petersen CG, Oliveira JB, Vagnini L. Significance of large nuclear vacuoles in human spermatozoa: implications for ICSI. Reprod Biomed Online. 2008 Jul;17(1):42-5. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60291-x.
- Antinori M, Licata E, Dani G, Cerusico F, Versaci C, d'Angelo D, Antinori S. Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection: a prospective randomized trial. Reprod Biomed Online. 2008 Jun;16(6):835-41. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60150-2.
- Auger J, Eustache F, Andersen AG, Irvine DS, Jorgensen N, Skakkebaek NE, Suominen J, Toppari J, Vierula M, Jouannet P. Sperm morphological defects related to environment, lifestyle and medical history of 1001 male partners of pregnant women from four European cities. Hum Reprod. 2001 Dec;16(12):2710-7. doi: 10.1093/humrep/16.12.2710.
- Bartoov B, Berkovitz A, Eltes F. Selection of spermatozoa with normal nuclei to improve the pregnancy rate with intracytoplasmic sperm injection. N Engl J Med. 2001 Oct 4;345(14):1067-8. doi: 10.1056/NEJM200110043451416. No abstract available.
- Bartoov B, Berkovitz A, Eltes F, Kogosovsky A, Yagoda A, Lederman H, Artzi S, Gross M, Barak Y. Pregnancy rates are higher with intracytoplasmic morphologically selected sperm injection than with conventional intracytoplasmic injection. Fertil Steril. 2003 Dec;80(6):1413-9. doi: 10.1016/j.fertnstert.2003.05.016.
- Boitrelle F, Ferfouri F, Petit JM, Segretain D, Tourain C, Bergere M, Bailly M, Vialard F, Albert M, Selva J. Large human sperm vacuoles observed in motile spermatozoa under high magnification: nuclear thumbprints linked to failure of chromatin condensation. Hum Reprod. 2011 Jul;26(7):1650-8. doi: 10.1093/humrep/der129. Epub 2011 May 2.
- Bonduelle M, Van Assche E, Joris H, Keymolen K, Devroey P, Van Steirteghem A, Liebaers I. Prenatal testing in ICSI pregnancies: incidence of chromosomal anomalies in 1586 karyotypes and relation to sperm parameters. Hum Reprod. 2002 Oct;17(10):2600-14. doi: 10.1093/humrep/17.10.2600.
- Figueira Rde C, Braga DP, Setti AS, Iaconelli A Jr, Borges E Jr. Morphological nuclear integrity of sperm cells is associated with preimplantation genetic aneuploidy screening cycle outcomes. Fertil Steril. 2011 Mar 1;95(3):990-3. doi: 10.1016/j.fertnstert.2010.11.018. Epub 2010 Dec 4.
- Foresta C, Garolla A, Bartoloni L, Bettella A, Ferlin A. Genetic abnormalities among severely oligospermic men who are candidates for intracytoplasmic sperm injection. J Clin Endocrinol Metab. 2005 Jan;90(1):152-6. doi: 10.1210/jc.2004-1469. Epub 2004 Oct 27.
- Franco JG Jr, Mauri AL, Petersen CG, Massaro FC, Silva LF, Felipe V, Cavagna M, Pontes A, Baruffi RL, Oliveira JB, Vagnini LD. Large nuclear vacuoles are indicative of abnormal chromatin packaging in human spermatozoa. Int J Androl. 2012 Feb;35(1):46-51. doi: 10.1111/j.1365-2605.2011.01154.x. Epub 2011 Apr 28.
- Garolla A, Fortini D, Menegazzo M, De Toni L, Nicoletti V, Moretti A, Selice R, Engl B, Foresta C. High-power microscopy for selecting spermatozoa for ICSI by physiological status. Reprod Biomed Online. 2008 Nov;17(5):610-6. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60307-0.
- Hazout A, Dumont-Hassan M, Junca AM, Cohen Bacrie P, Tesarik J. High-magnification ICSI overcomes paternal effect resistant to conventional ICSI. Reprod Biomed Online. 2006 Jan;12(1):19-25. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60975-3.
- Oliveira JB, Massaro FC, Baruffi RL, Mauri AL, Petersen CG, Silva LF, Vagnini LD, Franco JG Jr. Correlation between semen analysis by motile sperm organelle morphology examination and sperm DNA damage. Fertil Steril. 2010 Oct;94(5):1937-40. doi: 10.1016/j.fertnstert.2010.01.042. Epub 2010 Mar 2.
- Perdrix A, Travers A, Chelli MH, Escalier D, Do Rego JL, Milazzo JP, Mousset-Simeon N, Mace B, Rives N. Assessment of acrosome and nuclear abnormalities in human spermatozoa with large vacuoles. Hum Reprod. 2011 Jan;26(1):47-58. doi: 10.1093/humrep/deq297. Epub 2010 Nov 18.
- Van Steirteghem A, Bonduelle M, Devroey P, Liebaers I. Follow-up of children born after ICSI. Hum Reprod Update. 2002 Mar-Apr;8(2):111-6. doi: 10.1093/humupd/8.2.111.
- Vanderzwalmen P, Hiemer A, Rubner P, Bach M, Neyer A, Stecher A, Uher P, Zintz M, Lejeune B, Vanderzwalmen S, Cassuto G, Zech NH. Blastocyst development after sperm selection at high magnification is associated with size and number of nuclear vacuoles. Reprod Biomed Online. 2008 Nov;17(5):617-27. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60308-2.
- Watanabe S, Tanaka A, Fujii S, Mizunuma H, Fukui A, Fukuhara R, Nakamura R, Yamada K, Tanaka I, Awata S, Nagayoshi M. An investigation of the potential effect of vacuoles in human sperm on DNA damage using a chromosome assay and the TUNEL assay. Hum Reprod. 2011 May;26(5):978-86. doi: 10.1093/humrep/der047. Epub 2011 Feb 28.
- Wilding M, Coppola G, di Matteo L, Palagiano A, Fusco E, Dale B. Intracytoplasmic injection of morphologically selected spermatozoa (IMSI) improves outcome after assisted reproduction by deselecting physiologically poor quality spermatozoa. J Assist Reprod Genet. 2011 Mar;28(3):253-62. doi: 10.1007/s10815-010-9505-5. Epub 2010 Nov 12.
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Becsült)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- 2013/005/HP
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .