Związek między wakuolami główki plemnika a zmianami DNA plemników u niepłodnych mężczyzn (VATES)
Czy wakuole główki plemnika są związane ze zmianami jądra plemników?
U mężczyzn ze zmianami w nasieniu konieczna jest poprawa selekcji plemników nieuszkodzonych genetycznie w celu zwiększenia skuteczności zabiegów wspomaganego rozrodu.
Celem tego badania jest ustalenie, czy obecność wakuoli główek plemników jest związana ze zmianami DNA plemników.
Przegląd badań
Szczegółowy opis
Zastosowanie docytoplazmatycznej iniekcji plemnika (ICSI) znacznie poprawiło leczenie ciężkiej niepłodności męskiej, zwłaszcza u mężczyzn z oligo-asteno-teratozoospermią (OAT). Ta procedura zapłodnienia in vitro umożliwia bezpośrednie wstrzyknięcie pojedynczego plemnika do komórki jajowej. Plemniki używane do ICSI są selekcjonowane pod mikroskopem przy 400-krotnym powiększeniu. W kilku badaniach wykazano, że nieprawidłowości chromosomalne de novo są częstsze u dzieci urodzonych po ICSI, co rodzi pytanie o jakość genetyczną plemników wykorzystywanych do ICSI.
W 2001 roku opracowano metodę o nazwie MSOME (high powiększenie Motile Sperm Organelle Morphology Examination), która pozwala na szczegółową ocenę morfologiczną ruchliwych plemników w czasie rzeczywistym i przy dużym powiększeniu (6600x). Dzięki tej technice wykryto drobne nieprawidłowości morfologiczne - głównie wakuole w główkach plemników. Wykorzystanie MSOME do wykrywania morfologicznie prawidłowych plemników do ICSI dało początek technice zwanej IMSI (ang. Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection). Uzyskano wyższe wskaźniki ciąż z IMSI w porównaniu z ICSI i stwierdzono, że wakuole główek plemników negatywnie wpływają na wskaźniki powodzenia rozrodu wspomaganego i rozwój zarodka. Stosowanie IMSI zmniejsza również ryzyko aneuploidii chromosomów płciowych u zarodków.
Kilku autorów stwierdziło, że obecność dużych wakuoli w główce plemnika koreluje z kilkoma zmianami jądrowymi: fragmentacją DNA, nieprawidłową kondensacją chromatyny i aneuploidią. Jednak badania te są kontrowersyjne i przeprowadzono je na niewielkiej liczbie plemników. W celu poprawy selekcji plemników o prawidłowej zawartości chromosomów istotne jest nie tylko potwierdzenie istnienia związku między wakuolami główek plemników a zmienioną jakością jądrową plemników, ale także lepsze scharakteryzowanie tych zmian.
Głównym celem tego badania jest zbadanie korelacji między obszarami wakuoli główek plemników a wskaźnikami aneuploidii plemników u mężczyzn z izolowaną teratozoospermią lub OAT. Obszary wakuoli będą mierzone metodą MSOME, a współczynniki aneuploidii metodą FISH dla chromosomów 18, X i Y. Ponadto oceniona zostanie korelacja między obszarami wakuoli główki plemnika a innymi zmianami jądrowymi (fragmentacja DNA, nieprawidłowa kondensacja chromatyny, nieprawidłowości telomerów). Próbki nasienia od 200 pacjentów rekrutowanych w okresie 2 lat będą pobierane, przechowywane i analizowane.
Badanie to obejmuje gromadzenie odpowiednich informacji medycznych. Komputerowa strona internetowa bazy danych pacjentów jest bezpieczna i chroniona hasłem. Informacje zostaną wprowadzone i będą przeglądane tylko przez śledczych. Przez cały czas trwania badania będą prowadzone wizyty monitorujące na miejscu.
Typ studiów
Zapisy (Rzeczywisty)
Faza
- Nie dotyczy
Kontakty i lokalizacje
Lokalizacje studiów
-
-
-
Lille, Francja
- Laboratoire de spermiologie, Hôpital Calmette, CHRU de Lille
-
Rouen, Francja, 76031
- Laboratoire de Biologie de la Reproduction - CECOS - EA 4308, CHU - Hôpitaux de Rouen
-
-
Kryteria uczestnictwa
Kryteria kwalifikacji
Wiek uprawniający do nauki
Akceptuje zdrowych ochotników
Badana populacja
Opis
Kryteria przyjęcia:
- mężczyźni
- 18 lat lub więcej
- podlega ubezpieczeniu społecznemu
z izolowaną teratozoospermią lub oligo-asteno-teratozoospermią zgodnie z wytycznymi WHO (2010):
- stężenie plemników < 15 milionów w ml lub liczba plemników < 39 milionów w ejakulacie
- ruchliwość progresywna < 35%
- formy morfologicznie normalne < 50% według zmodyfikowanej klasyfikacji Davida (Auger et al., 2001
- ruchome plemniki wyselekcjonowane przez wirowanie w gradiencie gęstości > 1 milion na poprzednich spermogramach
- z normalnymi konstytucyjnymi kariotypami (46, XY)
- podpisał świadomą zgodę
Kryteria wyłączenia:
- z nieprawidłowymi konstytucyjnymi kariotypami
- z istotną zmianą parametrów plemników, z ruchomymi plemnikami wyselekcjonowanymi przez wirowanie w gradiencie gęstości < 1 milion
- pod kuratelą lub kuratelą na mocy postanowienia sądu
Plan studiów
Jak projektuje się badanie?
Szczegóły projektu
- Główny cel: Podstawowa nauka
- Przydział: Nie dotyczy
- Model interwencyjny: Zadanie dla jednej grupy
- Maskowanie: Brak (otwarta etykieta)
Broń i interwencje
Grupa uczestników / Arm |
Interwencja / Leczenie |
|---|---|
|
Eksperymentalny: Altered spermograms
Men with altered spermograms (isolated teratozoospermia or oligo-astheno-teratozoospermia)
|
The study will focus on sperm samples collected via masturbation for routine pre-IVF screening tests, taken from patients with isolated teratozoospermia or oligoasthenozoospermia.
The various tests and analyses planned will be carried out on sperm not used for IVF or diagnostic purposes.
|
Co mierzy badanie?
Podstawowe miary wyniku
Miara wyniku |
Ramy czasowe |
|---|---|
|
Współczynnik korelacji między średnią powierzchnią wakuoli w główkach plemników (mierzony metodą MSOME) a wskaźnikami aneuploidii plemników dla chromosomów X, Y i 18 (oceniany metodą FISH)
Ramy czasowe: do 30 miesięcy
|
do 30 miesięcy
|
Miary wyników drugorzędnych
Miara wyniku |
Ramy czasowe |
|---|---|
|
Całkowita liczba plemników
Ramy czasowe: 1 dzień
|
1 dzień
|
|
Procent ruchliwych plemników
Ramy czasowe: 1 dzień
|
1 dzień
|
|
Procent morfologicznie nieprawidłowych plemników
Ramy czasowe: 1 dzień
|
1 dzień
|
|
Próg średniej powierzchni wakuoli (zmierzony za pomocą krzywych charakterystyki roboczej odbiornika)
Ramy czasowe: do 30 miesięcy
|
do 30 miesięcy
|
|
Współczynnik korelacji między obszarami wakuoli a fragmentacją DNA plemników (oceniany za pomocą analizy TUNEL)
Ramy czasowe: do 30 miesięcy
|
do 30 miesięcy
|
|
Współczynnik korelacji między obszarami wakuoli a nieprawidłową kondensacją chromatyny (oceniany przez barwienie błękitem aniliny)
Ramy czasowe: do 30 miesięcy
|
do 30 miesięcy
|
|
Współczynnik korelacji między obszarami wakuoli a liczbą, rozmieszczeniem i długością telomerów (oceniany metodą ilościową FISH)
Ramy czasowe: do 30 miesięcy
|
do 30 miesięcy
|
Współpracownicy i badacze
Sponsor
Śledczy
- Główny śledczy: Nathalie Rives, MD., PhD., Laboratoire de Biologie de la Reproduction - CECOS - EA 4308, CHU - Hôpitaux de Rouen
Publikacje i pomocne linki
Publikacje ogólne
- Franco JG Jr, Baruffi RL, Mauri AL, Petersen CG, Oliveira JB, Vagnini L. Significance of large nuclear vacuoles in human spermatozoa: implications for ICSI. Reprod Biomed Online. 2008 Jul;17(1):42-5. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60291-x.
- Antinori M, Licata E, Dani G, Cerusico F, Versaci C, d'Angelo D, Antinori S. Intracytoplasmic morphologically selected sperm injection: a prospective randomized trial. Reprod Biomed Online. 2008 Jun;16(6):835-41. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60150-2.
- Auger J, Eustache F, Andersen AG, Irvine DS, Jorgensen N, Skakkebaek NE, Suominen J, Toppari J, Vierula M, Jouannet P. Sperm morphological defects related to environment, lifestyle and medical history of 1001 male partners of pregnant women from four European cities. Hum Reprod. 2001 Dec;16(12):2710-7. doi: 10.1093/humrep/16.12.2710.
- Bartoov B, Berkovitz A, Eltes F. Selection of spermatozoa with normal nuclei to improve the pregnancy rate with intracytoplasmic sperm injection. N Engl J Med. 2001 Oct 4;345(14):1067-8. doi: 10.1056/NEJM200110043451416. No abstract available.
- Bartoov B, Berkovitz A, Eltes F, Kogosovsky A, Yagoda A, Lederman H, Artzi S, Gross M, Barak Y. Pregnancy rates are higher with intracytoplasmic morphologically selected sperm injection than with conventional intracytoplasmic injection. Fertil Steril. 2003 Dec;80(6):1413-9. doi: 10.1016/j.fertnstert.2003.05.016.
- Boitrelle F, Ferfouri F, Petit JM, Segretain D, Tourain C, Bergere M, Bailly M, Vialard F, Albert M, Selva J. Large human sperm vacuoles observed in motile spermatozoa under high magnification: nuclear thumbprints linked to failure of chromatin condensation. Hum Reprod. 2011 Jul;26(7):1650-8. doi: 10.1093/humrep/der129. Epub 2011 May 2.
- Bonduelle M, Van Assche E, Joris H, Keymolen K, Devroey P, Van Steirteghem A, Liebaers I. Prenatal testing in ICSI pregnancies: incidence of chromosomal anomalies in 1586 karyotypes and relation to sperm parameters. Hum Reprod. 2002 Oct;17(10):2600-14. doi: 10.1093/humrep/17.10.2600.
- Figueira Rde C, Braga DP, Setti AS, Iaconelli A Jr, Borges E Jr. Morphological nuclear integrity of sperm cells is associated with preimplantation genetic aneuploidy screening cycle outcomes. Fertil Steril. 2011 Mar 1;95(3):990-3. doi: 10.1016/j.fertnstert.2010.11.018. Epub 2010 Dec 4.
- Foresta C, Garolla A, Bartoloni L, Bettella A, Ferlin A. Genetic abnormalities among severely oligospermic men who are candidates for intracytoplasmic sperm injection. J Clin Endocrinol Metab. 2005 Jan;90(1):152-6. doi: 10.1210/jc.2004-1469. Epub 2004 Oct 27.
- Franco JG Jr, Mauri AL, Petersen CG, Massaro FC, Silva LF, Felipe V, Cavagna M, Pontes A, Baruffi RL, Oliveira JB, Vagnini LD. Large nuclear vacuoles are indicative of abnormal chromatin packaging in human spermatozoa. Int J Androl. 2012 Feb;35(1):46-51. doi: 10.1111/j.1365-2605.2011.01154.x. Epub 2011 Apr 28.
- Garolla A, Fortini D, Menegazzo M, De Toni L, Nicoletti V, Moretti A, Selice R, Engl B, Foresta C. High-power microscopy for selecting spermatozoa for ICSI by physiological status. Reprod Biomed Online. 2008 Nov;17(5):610-6. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60307-0.
- Hazout A, Dumont-Hassan M, Junca AM, Cohen Bacrie P, Tesarik J. High-magnification ICSI overcomes paternal effect resistant to conventional ICSI. Reprod Biomed Online. 2006 Jan;12(1):19-25. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60975-3.
- Oliveira JB, Massaro FC, Baruffi RL, Mauri AL, Petersen CG, Silva LF, Vagnini LD, Franco JG Jr. Correlation between semen analysis by motile sperm organelle morphology examination and sperm DNA damage. Fertil Steril. 2010 Oct;94(5):1937-40. doi: 10.1016/j.fertnstert.2010.01.042. Epub 2010 Mar 2.
- Perdrix A, Travers A, Chelli MH, Escalier D, Do Rego JL, Milazzo JP, Mousset-Simeon N, Mace B, Rives N. Assessment of acrosome and nuclear abnormalities in human spermatozoa with large vacuoles. Hum Reprod. 2011 Jan;26(1):47-58. doi: 10.1093/humrep/deq297. Epub 2010 Nov 18.
- Van Steirteghem A, Bonduelle M, Devroey P, Liebaers I. Follow-up of children born after ICSI. Hum Reprod Update. 2002 Mar-Apr;8(2):111-6. doi: 10.1093/humupd/8.2.111.
- Vanderzwalmen P, Hiemer A, Rubner P, Bach M, Neyer A, Stecher A, Uher P, Zintz M, Lejeune B, Vanderzwalmen S, Cassuto G, Zech NH. Blastocyst development after sperm selection at high magnification is associated with size and number of nuclear vacuoles. Reprod Biomed Online. 2008 Nov;17(5):617-27. doi: 10.1016/s1472-6483(10)60308-2.
- Watanabe S, Tanaka A, Fujii S, Mizunuma H, Fukui A, Fukuhara R, Nakamura R, Yamada K, Tanaka I, Awata S, Nagayoshi M. An investigation of the potential effect of vacuoles in human sperm on DNA damage using a chromosome assay and the TUNEL assay. Hum Reprod. 2011 May;26(5):978-86. doi: 10.1093/humrep/der047. Epub 2011 Feb 28.
- Wilding M, Coppola G, di Matteo L, Palagiano A, Fusco E, Dale B. Intracytoplasmic injection of morphologically selected spermatozoa (IMSI) improves outcome after assisted reproduction by deselecting physiologically poor quality spermatozoa. J Assist Reprod Genet. 2011 Mar;28(3):253-62. doi: 10.1007/s10815-010-9505-5. Epub 2010 Nov 12.
Daty zapisu na studia
Główne daty studiów
Rozpoczęcie studiów (Rzeczywisty)
Zakończenie podstawowe (Rzeczywisty)
Ukończenie studiów (Rzeczywisty)
Daty rejestracji na studia
Pierwszy przesłany
Pierwszy przesłany, który spełnia kryteria kontroli jakości
Pierwszy wysłany (Szacowany)
Aktualizacje rekordów badań
Ostatnia wysłana aktualizacja (Rzeczywisty)
Ostatnia przesłana aktualizacja, która spełniała kryteria kontroli jakości
Ostatnia weryfikacja
Więcej informacji
Terminy związane z tym badaniem
Słowa kluczowe
Dodatkowe istotne warunki MeSH
Inne numery identyfikacyjne badania
- 2013/005/HP
Te informacje zostały pobrane bezpośrednio ze strony internetowej clinicaltrials.gov bez żadnych zmian. Jeśli chcesz zmienić, usunąć lub zaktualizować dane swojego badania, skontaktuj się z register@clinicaltrials.gov. Gdy tylko zmiana zostanie wprowadzona na stronie clinicaltrials.gov, zostanie ona automatycznie zaktualizowana również na naszej stronie internetowej .