HDL-toimintojen ja ateroskleroottisen taakan välinen yhteys terveillä yksilöillä

Valinta: Tutkimukseen osallistujat valitaan alun perin arvioimalla peräkkäisiä lipidiprofiileja henkilöiltä, ​​jotka etsivät spontaanisti valtion perusterveydenhuoltokeskuksia Campinasin kaupungista, Sao Paulosta, Brasiliassa. Tehdään puhelinpohjaiset seulontahaastattelut, joita seuraa henkilökohtainen kliininen arviointi ja verikokeet.

Biokemialliset analyysit: Glukoosi, triglyseridit, HDL-C ja c-reaktiivinen proteiini (CRP) mitataan automatisoidussa Modular® Analytics Evo -laitteessa (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, UK) käyttäen Roche Diagnostics® -reagensseja (Mannheim, Saksa) . LDL-kolesteroli lasketaan Friedewaldin kaavalla. Seerumin insuliinitasot mitataan ELISA:lla (Millipore, Massachusetts, USA). Insuliiniherkkyyden arvioimiseen käytetään Homeostasis Model Assessment (HOMA) -laskurin versiota 2.2 (University of Oxford, UK). Apolipoproteiinit A-I ja B-100 ja lipoproteiini (a) määritetään nefelometrialla automaattisessa järjestelmässä ja Dade-Behring®:n (Marburg, Saksa) reagensseilla.

Kaulavaltimon ultraääni: Kaulavaltimon ateroskleroosi arvioidaan käyttämällä korkean resoluution B-moodin ultraääntä yhteisen kaulavaltimon takaseinässä.

Lipoproteiinien eristäminen: HDL jokaisesta tutkimukseen osallistujasta eristetään plasmasta ultrasentrifugoinnilla (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, USA).

HDL:n kemiallinen koostumus: Kaupallisesti saatavien entsymaattisten sarjojen avulla mitataan kokonaisproteiinien HDL-pitoisuus, kokonaiskolesteroli, vapaa kolesteroli, fosfolipidit, triglyseridit ja apolipoproteiini A-I. Kolesteryyliesteri (CE) lasketaan kokonaiskolesterolin ja vapaan kolesterolin erotuksena kertaa 1,67. HDL-moolipitoisuus arvioidaan hiukkasten kokonaismassan ja molekyylipainon perusteella.

HDL:n fysikaalis-kemiallinen karakterisointi: HDL-hiukkaskoko määritetään käyttämällä dynaamista valonsirontaa ja zetapotentiaali laser-Doppler-mikroelektroforeesilla.

HDL-aineenvaihduntaan osallistuvien proteiinien määrittäminen: Kolesteryyliesterin siirtoproteiini, fosfolipidien siirtoproteiini, lipoproteiinilipaasi, maksalipaasi ja lesitiini:kolesteroliasyylitransferaasiaktiivisuudet määritetään radiometrisillä eksogeenisillä määrityksillä.

HDL-toiminnot: Kolesterolin ulosvirtauskapasiteetti, antioksidanttiaktiivisuus, hapettumisalttius, anti-inflammatorinen aktiivisuus ja verihiutaleiden aggregaation esto mitataan yksinkertaisilla ja konsolidoiduilla menetelmillä.

Tilastolliset analyysit: Ryhmien väliset erot arvioidaan käyttämällä ANOVA:ta tai Kruskal-Wallisia Bonferronin post-hoc-monivertailuanalyysillä muuttujajakauman mukaan. Chi-neliötä käytetään kategoristen tietojen vertailuun. Hämmentäviä muuttujia varten säädettyä kovarianssianalyysiä (ANCOVA) käytetään myös sen jälkeen, kun muuttujat on tarkistettu histogrammeilla, normaaliteettikäyrillä ja jäännössirontakäyrillä, jotka testasivat lineaarisuuden, normaaliuden ja varianssin. Pearsonin korrelaatiotestiä käytetään muuttujien välisten suhteiden arvioimiseen. Kaksipuolista p-arvoa 0,05 pidetään merkittävänä.