Związek między funkcjami HDL a obciążeniem miażdżycowym u zdrowych osób

Selekcja: Uczestnicy badania są wstępnie wybierani poprzez ocenę kolejnych profili lipidowych od osób, które spontanicznie szukają rządowych ośrodków podstawowej opieki zdrowotnej w mieście Campinas, Sao Paulo, Brazylia. Przeprowadzane są telefoniczne wywiady przesiewowe, po których następuje osobista ocena kliniczna i badania krwi.

Analizy biochemiczne: Glukoza, trójglicerydy, HDL-C i białko c-reaktywne (CRP) są mierzone w automatycznym urządzeniu Modular® Analytics Evo (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, Wielka Brytania), przy użyciu odczynników Roche Diagnostics® (Mannheim, Niemcy) . Cholesterol LDL oblicza się według wzoru Friedewalda. Poziomy insuliny w surowicy mierzono za pomocą testu ELISA (Millipore, Massachusetts, USA). Kalkulator Homeostasis Model Assessment (HOMA) w wersji 2.2 (University of Oxford, Wielka Brytania) służy do szacowania wrażliwości na insulinę. Apolipoproteiny A-I i B-100 oraz lipoproteinę (a) oznacza się nefelometrycznie w zautomatyzowanym systemie i odczynnikach firmy Dade-Behring® (Marburg, Niemcy).

USG tętnic szyjnych: Miażdżyca tętnic szyjnych jest oceniana za pomocą ultrasonografii w trybie B o wysokiej rozdzielczości, na tylnej ścianie tętnicy szyjnej wspólnej.

Izolacja lipoprotein: HDL od każdego uczestnika badania jest izolowany z osocza przez ultrawirowanie (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, USA).

Skład chemiczny HDL: Za pomocą dostępnych w handlu zestawów enzymatycznych mierzy się zawartość HDL w białkach całkowitych, cholesterolu całkowitym, wolnym cholesterolu, fosfolipidach, trójglicerydach i apolipoproteinie A-I. Ester cholesterolu (CE) oblicza się jako różnicę między cholesterolem całkowitym a wolnym cholesterolem pomnożoną przez 1,67. Stężenie molowe HDL szacuje się na podstawie całkowitej masy cząstek i masy cząsteczkowej.

Charakterystyka fizyko-chemiczna HDL: wielkość cząstek HDL określa się za pomocą dynamicznego rozpraszania światła, a potencjał zeta za pomocą laserowej mikroelektroforezy Dopplera.

Oznaczanie białek biorących udział w metabolizmie HDL: białka przenoszącego estry cholesterolu, białka przenoszącego fosfolipidy, lipazy lipoproteinowej, lipazy wątrobowej i acylotransferazy lecytynowo-cholesterolowej oznacza się za pomocą radiometrycznych testów egzogennych.

Funkcje HDL: zdolność usuwania cholesterolu, aktywność przeciwutleniająca, podatność na utlenianie, działanie przeciwzapalne i hamowanie agregacji płytek krwi są mierzone przy użyciu prostych i skonsolidowanych metodologii.

Analizy statystyczne: Różnice między grupami ocenia się za pomocą analizy ANOVA lub Kruskala-Wallisa, z analizą wielokrotnych porównań post-hoc Bonferroniego, zgodnie z rozkładem zmiennych. Chi-kwadrat służy do porównywania danych kategorycznych. Stosuje się również analizę kowariancji (ANCOVA) skorygowaną o zmienne zakłócające, po sprawdzeniu zmiennych za pomocą histogramów, wykresów normalności i resztkowych wykresów punktowych, które testowały liniowość, normalność i wariancję. Test korelacji Pearsona służy do oceny zależności między zmiennymi. Dwustronna wartość p wynosząca 0,05 jest uważana za istotną.