Association entre les fonctions HDL et la charge athérosclérotique chez les personnes en bonne santé

Sélection : Les participants à l'étude sont initialement sélectionnés par l'évaluation de profils lipidiques consécutifs d'individus qui recherchent spontanément des centres de soins primaires gouvernementaux de la ville de Campinas, Sao Paulo, Brésil. Des entrevues de dépistage par téléphone sont effectuées, suivies d'une évaluation clinique en personne et d'examens sanguins.

Analyses biochimiques : le glucose, les triglycérides, le HDL-C et la protéine C-réactive (CRP) sont mesurés dans un système automatisé Modular® Analytics Evo (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, Royaume-Uni), à l'aide de réactifs Roche Diagnostics® (Mannheim, Allemagne) . Le cholestérol LDL est calculé par la formule de Friedewald. Les niveaux d'insuline sérique sont mesurés par ELISA (Millipore, Massachusetts, USA). Le calculateur d'évaluation du modèle d'homéostasie (HOMA) version 2.2 (Université d'Oxford, Royaume-Uni) est utilisé pour estimer la sensibilité à l'insuline. Les apolipoprotéines A-I et B-100 et la lipoprotéine (a) sont déterminées par néphélométrie dans un système automatisé et des réactifs de Dade-Behring® (Marburg, Allemagne).

Échographie de l'artère carotide : l'athérosclérose de l'artère carotide est estimée à l'aide d'une échographie en mode B à haute résolution, au niveau de la paroi postérieure de l'artère carotide commune.

Isolement des lipoprotéines : les HDL de chaque participant à l'étude sont isolées du plasma, par ultracentrifugation (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, États-Unis).

Composition chimique HDL : À l'aide de kits enzymatiques disponibles dans le commerce, la teneur en HDL des protéines totales, du cholestérol total, du cholestérol libre, des phospholipides, des triglycérides et de l'apolipoprotéine A-I est mesurée. L'ester de cholestérol (CE) est calculé comme la différence entre le cholestérol total et le cholestérol libre multiplié par 1,67. La concentration molaire de HDL est estimée sur la base de la masse totale et du poids moléculaire des particules.

Caractérisation physico-chimique des HDL : La taille des particules de HDL est déterminée par diffusion dynamique de la lumière et le potentiel zêta par micro-électrophorèse laser Doppler.

Détermination des protéines impliquées dans le métabolisme des HDL : La protéine de transfert des esters de cholestérol, la protéine de transfert des phospholipides, la lipoprotéine lipase, la lipase hépatique et les activités lécithine:cholestérol acyl transférase sont déterminées par des dosages radiométriques exogènes.

Fonctions HDL : la capacité d'efflux du cholestérol, l'activité antioxydante, la sensibilité à l'oxydation, l'activité anti-inflammatoire et l'inhibition de l'agrégation plaquettaire sont mesurées à l'aide de méthodologies simples et consolidées.

Analyses statistiques : les différences entre les groupes sont évaluées à l'aide de l'ANOVA ou de Kruskal-Wallis, avec l'analyse de comparaison multiple post-hoc de Bonferroni, selon la distribution des variables. Chi-Square est utilisé pour comparer des données catégorielles. L'analyse de covariance (ANCOVA) ajustée pour les variables confusionnelles est également utilisée, après avoir vérifié les variables avec des histogrammes, des diagrammes de normalité et des diagrammes de dispersion des résidus qui ont testé la linéarité, la normalité et la variance. Le test de corrélation de Pearson est utilisé pour évaluer les relations entre les variables. Une valeur p bilatérale de 0,05 est considérée comme significative.