Sammenhæng mellem HDL-funktioner og aterosklerotisk belastning hos raske individer

Udvælgelse: Studiedeltagere udvælges i første omgang gennem evaluering af på hinanden følgende lipidprofiler fra personer, der spontant søger statslige primære plejecentre i byen Campinas, Sao Paulo, Brasilien. Der udføres telefonbaserede screeningsinterviews, efterfulgt af personlig klinisk evaluering og blodundersøgelser.

Biokemiske analyser: Glukose, triglycerider, HDL-C og c-reaktivt protein (CRP) måles i en automatiseret Modular® Analytics Evo (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, UK), ved hjælp af Roche Diagnostics®-reagenser (Mannheim, Tyskland) . LDL-kolesterol beregnes ved Friedewald-formlen. Seruminsulinniveauer måles ved anvendelse af ELISA (Millipore, Massachusetts, USA). Homeostase Model Assessment (HOMA) Calculator version 2.2 (University of Oxford, UK) bruges til at estimere insulinfølsomhed. Apolipoprotein A-I og B-100 og lipoprotein (a) bestemmes ved nefelometri i et automatiseret system og reagenser fra Dade-Behring® (Marburg, Tyskland).

Halspulsåre-ultralyd: Halspulsåre-åreforkalkning estimeres ved at bruge højopløselig B-mode ultralyd, ved den bageste væg af den fælles halspulsåre.

Lipoproteinisolering: HDL fra hver undersøgelsesdeltager isoleres fra plasma gennem ultracentrifugering (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, USA).

HDL kemisk sammensætning: Ved hjælp af kommercielt tilgængelige enzymatiske kits måles HDL-indholdet af totalproteiner, totalkolesterol, frit kolesterol, fosfolipider, triglycerider og apolipoprotein A-I. Kolesterylester (CE) beregnes som forskellen mellem totalt kolesterol og frit kolesterol gange 1,67. HDL molær koncentration er estimeret baseret på partikel total masse og molekylvægt.

HDL fysisk-kemisk karakterisering: HDL-partikelstørrelse bestemmes ved hjælp af dynamisk lysspredning og zeta-potentiale ved hjælp af laser Doppler-mikroelektroforese.

Bestemmelse af proteiner involveret i HDL-metabolisme: Kolesterylesteroverførselsprotein, phospholipideroverførselsprotein, lipoproteinlipase, hepatisk lipase og lecithin:cholesterolacyltransferaseaktiviteter bestemmes gennem radiometriske eksogene assays.

HDL-funktioner: Kolesteroludstrømningskapacitet, antioxidantaktivitet, modtagelighed for oxidation, antiinflammatorisk aktivitet og hæmning af blodpladeaggregation måles ved hjælp af enkle og konsoliderede metoder.

Statistiske analyser: Forskelle mellem grupper evalueres ved hjælp af ANOVA eller Kruskal-Wallis, med Bonferronis post-hoc multiple sammenligningsanalyse, i henhold til variabel fordeling. Chi-Square bruges til at sammenligne kategoriske data. Analyse af kovarians (ANCOVA) justeret for konfunderende variabler bruges også efter kontrol af variabler med histogrammer, normalitetsplot og resterende spredningsplot, der testede for linearitet, normalitet og varians. Pearsons korrelationstest bruges til at vurdere sammenhænge mellem variable. En tosidet p-værdi på 0,05 anses for signifikant.