Associação entre funções de HDL e carga aterosclerótica em indivíduos saudáveis

Seleção: Os participantes do estudo são selecionados inicialmente por meio da avaliação de perfis lipídicos consecutivos de indivíduos que procuram espontaneamente unidades básicas de saúde governamentais da cidade de Campinas, São Paulo, Brasil. São realizadas entrevistas de triagem por telefone, seguidas de avaliação clínica pessoal e exames de sangue.

Análises bioquímicas: Glicose, triglicerídeos, HDL-C e proteína c-reativa (CRP) são medidos em um Modular® Analytics Evo automatizado (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, Reino Unido), usando reagentes Roche Diagnostics® (Mannheim, Alemanha) . O colesterol LDL é calculado pela fórmula de Friedewald. Os níveis séricos de insulina são medidos usando ELISA (Millipore, Massachusetts, EUA). A Calculadora de Avaliação do Modelo de Homeostase (HOMA) versão 2.2 (Universidade de Oxford, Reino Unido) é usada para estimar a sensibilidade à insulina. As apolipoproteínas A-I e B-100 e a lipoproteína (a) são determinadas por nefelometria em sistema automatizado e reagentes da Dade-Behring® (Marburg, Alemanha).

Ultrassonografia da artéria carótida: a aterosclerose da artéria carótida é estimada usando ultrassonografia em modo B de alta resolução, na parede posterior da artéria carótida comum.

Isolamento de lipoproteínas: HDL de cada participante do estudo é isolado do plasma, por meio de ultracentrifugação (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, EUA).

Composição química do HDL: Usando kits enzimáticos disponíveis comercialmente, mede-se o teor de HDL de proteínas totais, colesterol total, colesterol livre, fosfolipídios, triglicerídeos e apolipoproteína A-I. O éster de colesterol (CE) é calculado como a diferença entre o colesterol total e o colesterol livre vezes 1,67. A concentração molar de HDL é estimada com base na massa total da partícula e no peso molecular.

Caracterização físico-química do HDL: O tamanho das partículas do HDL é determinado por espalhamento dinâmico de luz e o potencial zeta por microeletroforese laser Doppler.

Determinação de proteínas envolvidas no metabolismo de HDL: Proteína de transferência de éster de colesterol, proteína de transferência de fosfolipídios, lipase de lipoproteína, lipase hepática e atividades de lecitina:colesterol aciltransferase são determinadas através de ensaios exógenos radiométricos.

Funções do HDL: Capacidade de efluxo de colesterol, atividade antioxidante, suscetibilidade à oxidação, atividade anti-inflamatória e inibição da agregação plaquetária são medidos usando metodologias diretas e consolidadas.

Análises estatísticas: As diferenças entre os grupos são avaliadas por ANOVA ou Kruskal-Wallis, com análise post-hoc de comparação múltipla de Bonferroni, de acordo com a distribuição das variáveis. Qui-quadrado é usado para comparar dados categóricos. A análise de covariância (ANCOVA) ajustada para variáveis ​​de confusão também é usada, depois de verificar as variáveis ​​com histogramas, gráficos de normalidade e gráficos de dispersão residual que testaram linearidade, normalidade e variância. O teste de correlação de Pearson é usado para avaliar as relações entre as variáveis. Um valor p bilateral de 0,05 é considerado significativo.