Asociación entre las funciones de HDL y la carga aterosclerótica en individuos sanos

Selección: Los participantes del estudio son seleccionados inicialmente a través de la evaluación de perfiles lipídicos consecutivos de personas que buscan espontáneamente centros de atención primaria gubernamentales de la ciudad de Campinas, São Paulo, Brasil. Se realizan entrevistas de detección por teléfono, seguidas de una evaluación clínica en persona y análisis de sangre.

Análisis bioquímicos: la glucosa, los triglicéridos, el HDL-C y la proteína c reactiva (PCR) se miden en un Modular® Analytics Evo automatizado (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, Reino Unido), utilizando reactivos de Roche Diagnostics® (Mannheim, Alemania) . El colesterol LDL se calcula mediante la fórmula de Friedewald. Los niveles de insulina sérica se miden mediante ELISA (Millipore, Massachusetts, EE. UU.). La calculadora de evaluación del modelo de homeostasis (HOMA) versión 2.2 (Universidad de Oxford, Reino Unido) se utiliza para estimar la sensibilidad a la insulina. Las apolipoproteínas A-I y B-100 y la lipoproteína (a) se determinan por nefelometría en un sistema automatizado y reactivos de Dade-Behring® (Marburg, Alemania).

Ultrasonido de la arteria carótida: la aterosclerosis de la arteria carótida se estima mediante el uso de ultrasonido en modo B de alta resolución, en la pared posterior de la arteria carótida común.

Aislamiento de lipoproteínas: HDL de cada participante del estudio se aísla del plasma mediante ultracentrifugación (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, EE. UU.).

Composición química de HDL: Utilizando kits enzimáticos disponibles comercialmente, se miden el contenido de HDL de proteínas totales, colesterol total, colesterol libre, fosfolípidos, triglicéridos y apolipoproteína A-I. El éster de colesterol (CE) se calcula como la diferencia entre el colesterol total y el colesterol libre multiplicado por 1,67. La concentración molar de HDL se estima en función de la masa total de partículas y el peso molecular.

Caracterización físico-química de HDL: el tamaño de partícula de HDL se determina mediante dispersión de luz dinámica y el potencial zeta mediante microelectroforesis láser Doppler.

Determinación de proteínas involucradas en el metabolismo de HDL: Las actividades de proteína de transferencia de éster de colesterol, proteína de transferencia de fosfolípidos, lipoproteína lipasa, lipasa hepática y lecitina:colesterol acil transferasa se determinan a través de ensayos exógenos radiométricos.

Funciones de HDL: la capacidad de salida de colesterol, la actividad antioxidante, la susceptibilidad a la oxidación, la actividad antiinflamatoria y la inhibición de la agregación plaquetaria se miden utilizando metodologías sencillas y consolidadas.

Análisis estadísticos: Las diferencias entre grupos se evalúan mediante ANOVA o Kruskal-Wallis, con análisis de comparación múltiple post-hoc de Bonferroni, según distribución de variables. Chi-Square se utiliza para comparar datos categóricos. También se utiliza el análisis de covarianza (ANCOVA) ajustado por variables de confusión, después de verificar las variables con histogramas, gráficos de normalidad y gráficos de dispersión residual que probaron la linealidad, la normalidad y la varianza. La prueba de correlación de Pearson se utiliza para evaluar las relaciones entre las variables. Un valor p bilateral de 0,05 se considera significativo.