Sammenheng mellom HDL-funksjoner og aterosklerotisk belastning hos friske individer

Utvalg: Studiedeltakere velges først ut gjennom evaluering av påfølgende lipidprofiler fra individer som spontant søker statlige primæromsorgssentre i byen Campinas, Sao Paulo, Brasil. Det utføres telefonbaserte screeningsintervjuer, etterfulgt av personlig klinisk evaluering og blodundersøkelser.

Biokjemiske analyser: Glukose, triglyserider, HDL-C og c-reaktivt protein (CRP) måles i en automatisert Modular® Analytics Evo (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, Storbritannia), ved bruk av Roche Diagnostics®-reagenser (Mannheim, Tyskland) . LDL-kolesterol beregnes ved Friedewald-formelen. Seruminsulinnivåer måles ved bruk av ELISA (Millipore, Massachusetts, USA). Homeostase Model Assessment (HOMA) Calculator versjon 2.2 (University of Oxford, UK) brukes til å estimere insulinfølsomhet. Apolipoproteiner A-I og B-100 og lipoprotein (a) bestemmes ved nefelometri i et automatisert system og reagenser fra Dade-Behring® (Marburg, Tyskland).

Halspulsåre-ultralyd: Halspulsåren aterosklerose estimeres ved å bruke høyoppløselig B-modus ultralyd, ved den bakre veggen av den felles halspulsåren.

Lipoproteinisolering: HDL fra hver studiedeltaker isoleres fra plasma gjennom ultrasentrifugering (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, USA).

HDL kjemisk sammensetning: Ved bruk av kommersielt tilgjengelige enzymsett, måles HDL-innhold av totalproteiner, totalkolesterol, fritt kolesterol, fosfolipider, triglyserider og apolipoprotein A-I. Kolesterylester (CE) beregnes som differansen mellom totalt kolesterol og fritt kolesterol ganger 1,67. HDL molar konsentrasjon er estimert basert på partikkel total masse og molekylvekt.

HDL fysisk-kjemisk karakterisering: HDL-partikkelstørrelse bestemmes ved bruk av dynamisk lysspredning og zetapotensiale ved bruk av laser-doppler-mikroelektroforese.

Bestemmelse av proteiner involvert i HDL-metabolisme: Kolesterylesteroverføringsprotein, fosfolipidoverføringsprotein, lipoproteinlipase, hepatisk lipase og lecitin:kolesterolacyltransferaseaktivitet bestemmes gjennom radiometriske eksogene analyser.

HDL-funksjoner: Kolesterolutstrømningskapasitet, antioksidantaktivitet, mottakelighet for oksidasjon, antiinflammatorisk aktivitet og blodplateaggregasjonshemming måles ved å bruke enkle og konsoliderte metoder.

Statistiske analyser: Forskjeller mellom grupper evalueres ved hjelp av ANOVA eller Kruskal-Wallis, med Bonferronis post-hoc multippel sammenligningsanalyse, i henhold til variabel fordeling. Chi-Square brukes til å sammenligne kategoriske data. Analyse av kovarians (ANCOVA) justert for konfunderende variabler brukes også, etter å ha kontrollert variabler med histogrammer, normalitetsplott og gjenværende spredningsplott som testet for linearitet, normalitet og varians. Pearsons korrelasjonstest brukes til å vurdere sammenhengene mellom variabler. En tosidig p-verdi på 0,05 anses som signifikant.