Associazione tra funzioni HDL e onere aterosclerotico in individui sani

Selezione: i partecipanti allo studio vengono inizialmente selezionati attraverso la valutazione di profili lipidici consecutivi da individui che cercano spontaneamente centri di assistenza primaria governativi della città di Campinas, San Paolo, Brasile. Vengono eseguiti colloqui di screening telefonici, seguiti da valutazione clinica di persona ed esami del sangue.

Analisi biochimiche: glucosio, trigliceridi, HDL-C e proteina c-reattiva (CRP) vengono misurati in un sistema automatizzato Modular® Analytics Evo (Roche Diagnostics, Burgess Hill, West Sussex, Regno Unito), utilizzando i reagenti Roche Diagnostics® (Mannheim, Germania) . Il colesterolo LDL è calcolato con la formula di Friedewald. I livelli sierici di insulina sono misurati mediante ELISA (Millipore, Massachusetts, USA). Per stimare la sensibilità all'insulina viene utilizzato il calcolatore Homeostasis Model Assessment (HOMA) versione 2.2 (Università di Oxford, Regno Unito). Le apolipoproteine ​​A-I e B-100 e la lipoproteina (a) sono determinate mediante nefelometria in un sistema automatizzato e reagenti da Dade-Behring® (Marburg, Germania).

Ecografia dell'arteria carotidea: l'aterosclerosi dell'arteria carotidea viene stimata utilizzando ultrasuoni B-mode ad alta risoluzione, sulla parete posteriore dell'arteria carotide comune.

Isolamento delle lipoproteine: le HDL di ciascun partecipante allo studio sono isolate dal plasma, mediante ultracentrifugazione (Beckman Coulter Inc., Palo Alto, USA).

Composizione chimica delle HDL: utilizzando kit enzimatici disponibili in commercio, vengono misurati il ​​contenuto di HDL delle proteine ​​totali, il colesterolo totale, il colesterolo libero, i fosfolipidi, i trigliceridi e l'apolipoproteina A-I. L'estere di colesterolo (CE) è calcolato come differenza tra colesterolo totale e colesterolo libero moltiplicato per 1,67. La concentrazione molare di HDL è stimata in base alla massa totale delle particelle e al peso molecolare.

Caratterizzazione fisico-chimica delle HDL: la dimensione delle particelle HDL è determinata mediante diffusione dinamica della luce e il potenziale zeta mediante microelettroforesi laser Doppler.

Determinazione delle proteine ​​coinvolte nel metabolismo delle HDL: le attività della proteina di trasferimento degli esteri del colesterolo, della proteina di trasferimento dei fosfolipidi, della lipoproteina lipasi, della lipasi epatica e della lecitina:colesterolo acil transferasi sono determinate mediante saggi radiometrici esogeni.

Funzioni HDL: la capacità di efflusso del colesterolo, l'attività antiossidante, la suscettibilità all'ossidazione, l'attività antinfiammatoria e l'inibizione dell'aggregazione piastrinica sono misurate utilizzando metodologie semplici e consolidate.

Analisi statistiche: le differenze tra i gruppi vengono valutate utilizzando ANOVA o Kruskal-Wallis, con l'analisi di confronto multiplo post-hoc di Bonferroni, in base alla distribuzione delle variabili. Chi-quadrato viene utilizzato per confrontare i dati categorici. Viene utilizzata anche l'analisi della covarianza (ANCOVA) corretta per le variabili confondenti, dopo aver controllato le variabili con istogrammi, grafici di normalità e grafici a dispersione residua che hanno testato linearità, normalità e varianza. Il test di correlazione di Pearson viene utilizzato per valutare le relazioni tra le variabili. Un valore p bilaterale di 0,05 è considerato significativo.