Nitrooksidatiivinen stressi periodontiitissa

Esittely:

Hampaat ja niitä tukevat periodontaaliset rakenteet ovat erittäin tärkeitä hyvän suun terveyden kannalta. Parodontiitti on periodontiumin tulehduksellinen sairaus, joka vaikuttaa hampaiden tukikudoksiin. Sairaus on monitahoinen ja sen etiopatogeenisuutta ei vielä täysin ymmärretä, minkä vuoksi erityyppisten parodontaalisairauksien hoito voi olla erittäin vaikeaa. Sairausprosessiin on liitetty lukuisia riskitekijöitä, mukaan lukien riskitekijöitä ja riskiindikaattoreita. Viime aikoina on kertynyt vahva joukko todisteita, jotka tukevat reaktiivisen hapen (ROS) ja typen lajien (RNS) roolia joko laukaisevina aineina tai useammin primaaristen leesioiden pahentajina parodontiittissa.

Happi- ja typpireaktiiviset lajit ovat osallisina lukuisissa fysiologisissa ja patologisissa prosesseissa. Monosyyttien ja neutrofiilien tulehduksen aikana tuottamat ROS-osat ovat tärkeitä aggressiotekijöitä periodontaalisissa kudoksissa. ROS:illa on tärkeä rooli osteoklastien aktivaatiossa ja luun resorptiossa.

Oksidatiivinen stressi on tila, joka syntyy, kun solun vapaiden radikaalien tason ja sen antioksidanttisen suojan välillä on vakava epätasapaino edellisen hyväksi. Siten kudosvaurioita voi seurata, kun antioksidanttijärjestelmät eivät pysty estämään vapaiden radikaalien toimintaa tehokkaasti. Bakteeripatogeenien stimuloima tulehdus isäntäsolut vapauttavat tulehdusta edistäviä sytokiineja (IL-1a, IL-6, IL-8 ja tuumorinekroositekijä-a) osana immuunivastetta. Nämä sytokiinit värväävät polymorfonukleaarisia soluja (PMN:itä), joilla on tärkeä rooli parodontaalisen taudin etiologiassa tuottamalla proteolyyttisiä entsyymejä, kuten elastaasia ja 02:ta (molekyylihappi) oksidatiivisen purskeen kautta.

Äskettäisessä tutkimuksessa Abou Sulaiman & Shehadeh havaitsi, että seerumin kokonaisantioksidanttikapasiteetti (TAS) oli alhaisempi tupakoimattomilla syyrialaispotilailla, joilla oli krooninen parodontiitti, verrattuna terveisiin kontrolleihin. He raportoivat myös, että parodontaalihoito palautti TAS-tasot normaaleille tasoille, jotka vastaavat terveitä kontrolleja.

Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida ROS- ja RNS-tasoja seerumi- ja ikenen crevicular fluid (GCF) -näytteissä, jotka on otettu parodontiittipotilailta (krooninen ja aggressiivinen) ja terveiltä kontrolleilta. Myöhemmin korreloivat nämä tasot syyrialaisten potilaiden periodontaalisen sairauden vaikeusasteen kanssa.

Materiaalit ja menetelmät:

Yhteensä 80 koehenkilöä kutsutaan osallistumaan tähän tutkimukseen Damaskoksen yliopiston hammaslääketieteellisen tiedekunnan parodontologian osastolle lähetetyistä potilaista. Paikallinen arviointilautakuntamme on hyväksynyt tutkimuksen. Koehenkilöt rekrytoidaan erityisten mukaanottokriteerien mukaan lääketieteellisen ja hammaslääketieteellisen kyselylomakkeen täyttämisen jälkeen. Potilaat allekirjoittavat suostumuslomakkeen saatuaan tietoa tutkimuksen luonteesta.

Potilaiden valinta tehdään vuoden 1999 kansainvälisen parodontaalisen sairauksien ja tilojen luokittelujärjestelmän hyväksymien kriteerien mukaan, jossa käytetään viittä kliinistä parametria ja koko suun tai panoraamaröntgenkuvaa diagnoosiin.

Aiheet jaetaan neljään ryhmään:

• Krooninen parodontiittiryhmä (ChP): koostuu 20 potilaasta, jotka ovat yli 45-vuotiaita ja joilla on ≥2 ei-viereistä kohtaa neljännestä kohden, jotka eivät olleet ensimmäiset poskihampaat tai etuhampaat ja joiden mittaussyvyys (PD) on ≥5 mm ja jotka vuotavat verta kevyellä koetuksella. Todettu röntgenkuvaus ≥30 % juuren pituudesta, potilas, jolla on huono suuhygienia, kerääntyneen plakin määrä suhteessa kliinisen kiinnittymistason (CAL) määrään
• Vastustuskykyinen kontrolliryhmä (R): käsittää 20 ikä-sukupuolista vastaavaa potilasta, jotka ovat yli 45-vuotiaita, joilla ei ole merkkejä parodontaalista sairaudesta, mikä on määritetty interproksimaalisen (CAL ≤ 1 mm), PD > 3 mm:n todisteiden puuttuessa missä tahansa kohdassa. -suusta verenvuoto on alle 10 %, eikä niillä ole kliinisiä merkkejä ientulehduksesta.
• Aggressiivinen parodontiittiryhmä (AgP): koostuu 20 potilaasta, jotka ovat alle 35-vuotiaita ja joilla on diagnosoitu nopea kiinnittymisen menetys ja parodontaalitaskun syvyys (PD) > 4 mm vähintään kolmen muun hampaan ympärillä kuin ensimmäiset poskihampaat ja etuhampaat. Nopea luun tuhoutuminen (> 50 % luukatoa sairaissa paikoissa). Heikko yhteys hammasplakin ja ientulehduksen vakavuuden välillä.
• Nuori kontrolliryhmä (YC): käsittää 20 iän ja sukupuolen mukaan vastaavaa potilasta, jotka ovat alle 35-vuotiaita ja joilla ei ole merkkejä parodontaalista.

Kliiniset mitat:

Normaalia parodontaalianturia käytetään hampaiden havaitsemiseen kuudessa kohdassa hammasta kohden. Tutkittuja kliinisiä parametreja ovat verenvuoto koetuksella (BOP), plakkiindeksi (PI), kliinisen kiinnittymisen menetys (CAL) ja periodontaalisen taskun syvyys (PPD) ja ienindeksi (GI).

Näytteiden kokoelma

Koehenkilöitä pyydetään pidättymään harjaamisesta tunnin sisällä näytteen ottamisesta. (GCF) -näytteet saadaan käyttämällä standardipaperiliuskoja (Periocol strips, Oraflow, NY, USA). 6 näytettä kustakin yksittäisestä (mesiofacial, distopulatal) kohdasta jokaisesta tutkitusta hampaasta (etuhammas, esihammas ja poskihammas) yläleuassa (Chapple et al. 2002). Liuskat laitetaan PBS-puskuriliuokseen 30 minuutiksi, sitten uutetaan ja säilytetään nestetypessä.

Laskimoverinäytteet otetaan kyynärpääkuopasta ja varastoidaan litiumhepariiniputkiin ja annetaan seistä 30 minuuttia, ennen kuin niitä sentrifugoidaan 1000 × g:llä 30 minuuttia. Näytteet jaetaan eriin kryogeenisiin pulloihin ja niitä säilytetään nestemäisessä typessä.

Laboratoriotutkimukset:

• TBARS-määritystä (HPLC) käytetään malondialdihydipitoisuuden arvioimiseen oksidatiivisen stressin merkkiaineena.
• Griess-reagenssi typpioksiditasojen arvioimiseen nitrosatiivisen stressin merkkiaineena.