Nitrooxidatív stressz a parodontitisben

Bevezetés:

A fogak és az őket tartó parodontális szerkezetek nagy jelentőséggel bírnak a jó szájhigiéniában. A parodontitis a fogágy gyulladásos betegsége, amely a fogak tartószöveteit érinti. A betegség sokrétű, etio-patogenitása még mindig nem teljesen tisztázott, ezért a fogágybetegségek különböző típusainak kezelése igen nehézkes lehet. Számos kockázati tényező szerepet játszik a betegség folyamatában, beleértve a kockázati tényezőket és a kockázati mutatókat. A közelmúltban komoly bizonyítékok halmozódtak fel a reaktív oxigén (ROS) és a nitrogénfajták (RNS) szerepének alátámasztására, akár kiváltó ágensként, akár gyakrabban súlyosbító tényezőként a periodontitis elsődleges elváltozásaiban.

Az oxigén- és nitrogénreaktív fajok számos élettani és kóros folyamatban vesznek részt. A gyulladás során a monociták és a neutrofilek által generált ROS fontos agressziós faktorok a parodontális szövetekben. A ROS fontos szerepet játszik az oszteoklasztok aktiválásában és a csontreszorpcióban.

Az oxidatív stressz olyan állapot, amely akkor jelentkezik, ha a sejtben lévő szabad gyökök szintje és annak antioxidáns védelme között súlyos egyensúlyhiány áll fenn az előbbi javára. Így szövetkárosodás léphet fel, ha az antioxidáns rendszerek nem képesek hatékonyan ellensúlyozni a szabad gyökök hatását. Bakteriális kórokozók által stimulált gyulladás esetén a gazdasejtek az immunválasz részeként proinflammatorikus citokineket (IL-1α, IL-6, IL-8 és tumor nekrózis faktor-α) bocsátanak ki. Ezek a citokinek olyan polimorfonukleáris sejteket (PMN-eket) toboroznak, amelyek jelentős szerepet játszanak a parodontális betegség etiológiájában azáltal, hogy proteolitikus enzimeket, például elasztázt és O2-t (molekuláris oxigént) termelnek az oxidatív robbanás révén.

Egy közelmúltbeli tanulmányban Abou Sulaiman & Shehadeh azt találta, hogy a szérum teljes antioxidáns kapacitása (TAS) alacsonyabb a nemdohányzó szíriai krónikus periodontitisben szenvedő betegeknél, mint az egészséges kontrolloknál. Arról is beszámoltak, hogy a parodontális kezelés az egészséges kontrollokhoz hasonlóan visszaállította a TAS-szintet a normál szintre.

Ennek a vizsgálatnak a célja a ROS és RNS szintjének felmérése a (krónikus és agresszív) periodontitisben szenvedő betegektől és egészséges kontrolloktól vett szérum- és gingivális recvicularis folyadék (GCF) mintákban. Ezt követően ezeket a szinteket korrelálták a szíriai betegek parodontális betegségének súlyosságával.

Anyagok és metódusok:

A Damaszkuszi Egyetem Fogorvostudományi Karának Parodontológiai Osztályára beutalt betegek közül összesen 80 alanyt hívnak meg ebben a vizsgálatban. A tanulmányt a helyi felülvizsgálati bizottság jóváhagyta. Az alanyokat az orvosi és fogorvostörténeti kérdőívek kitöltése után, meghatározott felvételi kritériumok szerint veszik fel. A betegek beleegyező nyilatkozatot írnak alá, miután tájékoztatták őket a vizsgálat természetéről.

A betegek kiválasztása az 1999-es nemzetközi világműhely által jóváhagyott kritériumok szerint történik a periodontális betegségek és állapotok osztályozási rendszerében, öt klinikai paraméter és teljes szájüreg vagy panoráma röntgenfelvételek diagnosztizálására.

A tantárgyakat négy csoportba osztják:

• Krónikus periodontitis csoport (ChP): 20, 45 év feletti betegből áll, és negyedenként ≥2 nem szomszédos helyük van, amelyek nem voltak az első őrlőfogak vagy metszőfogak, és a szondázási mélység (PD) ≥5 mm, és enyhe szondázással vérzik. A kimutatott radiográfiás csontvesztés a gyökérhossz ≥30%-a, rossz szájhigiénés beteg, a felhalmozódott plakk mennyisége arányos a klinikai kötődési szint (CAL) mennyiségével
• Rezisztens Kontroll csoport (R): 20 kor-nemű betegből áll, akik 45 év felettiek, és nem mutatják a parodontális betegség jeleit, amelyet az interproximális (CAL ≤ 1 mm), PD > 3 mm bármely helyen kimutatott jelek hiánya határoz meg. - a szájvérzés pontszáma <10%, és nincsenek ínygyulladás klinikai tünetei.
• Agresszív periodontitis csoport (AgP): 20 olyan betegből áll, akik 35 évnél fiatalabbak, és gyors tapadásvesztést diagnosztizáltak, és a periodontális zsebmélység (PD) > 4 mm körül van legalább három fog körül, kivéve az első őrlőfogakat és a metszőfogakat. Gyors csontpusztulás (>50% csontvesztés a beteg helyeken). Gyenge kapcsolat a plakk és a fogínygyulladás súlyossága között.
• Fiatal Kontroll csoport (YC): 20 kor és nem azonos betegből áll, akik 35 év alattiak, és nem mutatják a parodontális betegség jeleit.

Klinikai mérések:

Szabványos parodontális szondát fogunk használni a parodontális indexek rögzítésére fogonként hat helyen. A vizsgált klinikai paraméterek közé tartozik a vérzés szondázáskor (BOP), a plakk index (PI), a klinikai kötődés elvesztése (CAL), valamint a parodontális zsebmélység (PPD) és a gingival index (GI).

Mintagyűjtés

Az alanyokat megkérjük, hogy a mintavételt követő 1 órán belül tartózkodjanak a fogmosástól. A (GCF) mintákat szabványos papírcsíkokkal (Periocol strips, Oraflow, NY, USA) veszik. 6 minta minden egyes (mesiofacialis, distopalatális) helyről minden vizsgált fogból (metsző, premoláris és moláris) a maxillában (Chapple et al. 2002). A csíkokat 30 percre PBS pufferoldatba helyezzük, majd extraháljuk és folyékony nitrogén alatt tároljuk.

Vénás vérmintákat vesznek az antecubitalis üregből, és lítium-heparin csövekben tárolják, majd 30 percig állni hagyják, majd 1000 × g-vel 30 percig centrifugálják, majd a mintákat kriogén fiolákba osztják, és folyékony nitrogén alatt tárolják.

Laboratóriumi vizsgálatok:

• A TBARS-teszt (HPLC) segítségével értékeljük a malondialdihid-szintet az oxidatív stressz markereként.
• Griess-reagens a nitrogén-monoxid-szint felmérésére, mint a nitrozatív stressz markereire.