Nitro-oxidatieve stress bij parodontitis

Invoering:

Tanden en hun ondersteunende parodontale structuren zijn van groot belang voor een goede mondgezondheid. Parodontitis is een ontstekingsziekte van het parodontium die de ondersteunende weefsels van de tanden aantast. De ziekte is veelzijdig en de etio-pathogeniteit ervan is nog steeds niet volledig begrepen en daarom kan de behandeling van verschillende soorten parodontitis erg moeilijk zijn. Talrijke risicofactoren zijn betrokken bij het ziekteproces, waaronder risicodeterminanten en risico-indicatoren. Recentelijk is er veel bewijs verzameld om een ​​rol te ondersteunen voor reactieve zuurstof (ROS) en stikstofsoorten (RNS), hetzij als triggermiddelen of, vaker, als verergerende factoren van de primaire laesies bij parodontitis.

Zuurstof- en stikstofreactieve soorten zijn betrokken bij een groot aantal fysiologische en pathologische processen. ROS gegenereerd door monocyten en neutrofielen tijdens ontsteking zijn belangrijke agressieve factoren in de parodontale weefsels. ROS spelen een belangrijke rol bij de activering van osteoclasten en bij botresorptie.

Oxidatieve stress is een aandoening die ontstaat wanneer er een ernstige onevenwichtigheid is tussen de niveaus van vrije radicalen in een cel en de antioxiderende afweer ten gunste van de eerste. Weefselbeschadiging kan dus het gevolg zijn wanneer antioxidantsystemen de acties van vrije radicalen niet efficiënt kunnen tegengaan. Ontsteking wanneer gestimuleerd door bacteriële pathogenen, geven gastheercellen pro-inflammatoire cytokines (IL-1α, IL-6, IL-8 en tumornecrosefactor-α) af als onderdeel van de immuunrespons. Deze cytokinen rekruteren polymorfonucleaire cellen (PMN's) die een belangrijke rol spelen in de etiologie van parodontitis door proteolytische enzymen te produceren, zoals elastase en O2 (moleculaire zuurstof) door de oxidatieve uitbarsting.

In een recent onderzoek ontdekten Abou Sulaiman & Shehadeh dat de totale antioxidantcapaciteit (TAS) in serum lager was bij niet-rokers Syrische patiënten met chronische parodontitis in vergelijking met gezonde controles. Ze meldden ook dat parodontale behandeling de TAS-waarden herstelde tot normale niveaus, vergelijkbaar met gezonde controles.

Het doel van deze studie is om de niveaus van ROS en RNS te beoordelen in serum- en gingivale creviculaire vloeistof (GCF) monsters genomen van patiënten met parodontitis (chronisch en agressief) en gezonde controles. Vervolgens correleren deze niveaus met de ernst van parodontitis bij Syrische patiënten.

Materialen en methodes:

In totaal zullen 80 proefpersonen worden uitgenodigd om deel te nemen aan dit onderzoek van de patiënten die zijn doorverwezen naar de afdeling Parodontologie, Faculteit der Tandheelkunde, Universiteit van Damascus. De studie is goedgekeurd door onze lokale Review Board. Proefpersonen zullen worden gerekruteerd volgens specifieke inclusiecriteria na het invullen van vragenlijsten over medische en tandheelkundige geschiedenis. Patiënten ondertekenen een toestemmingsformulier nadat ze zijn geïnformeerd over de aard van het onderzoek.

De selectie van patiënten zal worden gemaakt volgens de criteria die zijn goedgekeurd door de internationale wereldworkshop van 1999 voor een classificatiesysteem van parodontale ziekten en aandoeningen met behulp van vijf klinische parameters en volledige mond- of panoramische röntgenfoto's voor diagnose.

Onderwerpen worden verdeeld in vier groepen:

• Chronische Parodontitis-groep (ChP): bestaat uit 20 patiënten van > 45 jaar en heeft aanwezigheid van ≥2 niet-aangrenzende plaatsen per kwadrant die geen eerste molaren of snijtanden waren, met sondediepte (PD) ≥5 mm, die bloeden bij zacht sonderen. Het aangetoonde radiografische botverlies ≥30% van de wortellengte, patiënt met slechte mondhygiëne, de hoeveelheid geaccumuleerde plaque die overeenkomt met de hoeveelheid klinisch hechtingsniveau (CAL)
• Resistente controlegroep (R): bestaat uit 20 qua leeftijd en geslacht gematchte patiënten die > 45 jaar zijn en geen tekenen van parodontitis vertonen, zoals bepaald door de afwezigheid van bewijs van interproximale (CAL ≤ 1 mm), PD > 3 mm op elke plaats, heel -mondbloedingen scoren <10% en hebben geen klinische tekenen van tandvleesontsteking.
• Aggressive Parodontitis-groep (AgP): bestaat uit 20 patiënten van < 35 jaar en gediagnosticeerd met snel aanhechtingsverlies met parodontale pocketdiepte (PD) > 4 mm rond ten minste drie andere tanden dan de eerste kiezen en snijtanden. Snelle botvernietiging (> 50% botverlies op zieke plaatsen). Zwakke relatie tussen tandplak en de ernst van tandvleesontsteking.
• Jonge controlegroep (YC): bestaat uit 20 qua leeftijd en geslacht gematchte patiënten die < 35 jaar zijn en geen tekenen van parodontitis vertonen.

Klinische metingen:

Een standaard parodontale sonde zal worden gebruikt voor het opnemen van parodontale indices op zes locaties per tand. De onderzochte klinische parameters omvatten bloeding bij sonderen (BOP), plaque-index (PI), klinisch aanhechtingsverlies (CAL) en parodontale pocketdiepte (PPD) en gingivale index (GI).

Verzameling van monsters

Proefpersonen wordt gevraagd om binnen 1 uur na monstername niet te poetsen. (GCF)-monsters worden verkregen met behulp van standaard papieren stroken (Periocol-strips, Oraflow, NY, VS). 6 monsters van elke individuele (mesiofaciale, distopalatale) plaats van elke onderzochte tand (snijtand, premolaar en kies) in de bovenkaak (Chapple et al. 2002). De strips worden gedurende 30 minuten in PBS-bufferoplossing geplaatst, vervolgens geëxtraheerd en onder vloeibare stikstof bewaard.

Veneuze bloedmonsters worden verzameld uit de antecubitale fossa en opgeslagen in lithiumheparinebuisjes en 30 minuten bewaard voordat ze 30 minuten bij 1000 ×g worden gecentrifugeerd. De monsters worden verdeeld in cryogene flesjes en worden bewaard onder vloeibare stikstof.

Laboratoriumonderzoeken:

• TBARS-assay (HPLC) zal worden gebruikt om de malondialdihyde-niveaus te bepalen als een marker van oxidatieve stress.
• Griess-reagens om stikstofoxideniveaus te beoordelen als een marker van nitrosatieve stress.