歯周病におけるニトロ酸化ストレス

序章：

歯とそれを支える歯周組織は、口腔の健康にとって非常に重要です。 歯周炎は、歯の支持組織に影響を与える歯周組織の炎症性疾患です。 この疾患は多面的であり、その病因病原性はまだ完全には理解されていないため、さまざまな種類の歯周病の治療は非常に困難な場合があります。 リスク決定要因やリスク指標など、疾患プロセスには多数のリスク要因が関与しています。 ごく最近では、活性酸素 (ROS) および窒素種 (RNS) が歯周炎の一次病変の引き金として、またはより頻繁には悪化因子としての役割を支持する強力な証拠が蓄積されています。

酸素と窒素の反応種は、多数の生理学的および病理学的プロセスに関与しています。 炎症時に単球と好中球によって生成されるROSは、歯周組織の重要な攻撃因子です。 ROS は、破骨細胞の活性化と骨吸収において重要な役割を果たします。

酸化ストレスは、細胞内のフリーラジカルのレベルとその抗酸化防御との間に重大な不均衡がある場合に発生する状態であり、前者に有利です. したがって、抗酸化システムがフリーラジカルの作用を効率的に打ち消すことができない場合、組織の損傷が生じる可能性があります. 細菌性病原体によって刺激された場合の炎症である宿主細胞は、免疫応答の一部として炎症誘発性サイトカイン (IL-1α、IL-6、IL-8、および腫瘍壊死因子-α) を放出します。 これらのサイトカインは、酸化的バーストによってエラスターゼや O2 (分子酸素) などのタンパク質分解酵素を生成することにより、歯周病の病因において主要な役割を果たす多形核細胞 (PMN) を動員します。

最近の研究で、Abou Sulaiman と Shehadeh は、健康な対照と比較して、非喫煙者の慢性歯周炎のシリア人患者の血清総抗酸化能 (TAS) が低いことを発見しました。 また、彼らは、歯周治療がTASレベルを健康な対照と同様の正常レベルに回復させたことを報告しました.

この研究の目的は、歯周炎患者 (慢性および侵襲性) および健常対照者から採取した血清および歯肉溝液 (GCF) サンプル中の ROS および RNS のレベルを評価することです。 その後、これらのレベルをシリア人患者の歯周病の重症度と相関させました。

材料および方法：

ダマスカス大学歯学部歯周病学科に紹介された患者から、合計80人の被験者がこの研究に参加するよう招待されます。 この研究は、地元の審査委員会によって承認されています。 被験者は、病歴および歯科歴に関するアンケートの完了後、特定の選択基準に従って募集されます。 患者は、研究の性質についてアドバイスを受けた後、同意書に署名します。

患者の選択は、1999 年国際世界ワークショップで承認された、5 つの臨床パラメータと診断用の口全体またはパノラマ X 線写真を使用した歯周疾患および状態の分類システムの基準に従って行われます。

被験者は次の 4 つのグループに分けられます。

• 慢性歯周炎グループ (ChP): 45 歳以上の 20 人の患者で構成され、第 1 大臼歯または切歯ではなく、1 象限あたり 2 つ以上の非隣接部位が存在し、プロービング深度 (PD) が 5 mm 以上で、穏やかなプロービングで出血します。 歯根の長さの 30% 以上の X 線写真による骨損失、口腔衛生状態の悪い患者、臨床付着レベル (CAL) の量に見合ったプラークの蓄積量
• 抵抗性対照群 (R): 45 歳以上の 20 人の年齢と性別が一致する患者で構成され、隣接歯間 (CAL ≤ 1mm) の証拠がないことによって決定される歯周病の徴候を示さず、いずれかの部位で PD > 3 mm、全体- 口内出血スコアが 10% 未満で、歯肉炎症の臨床的徴候がない。
• アグレッシブ歯周炎グループ (AgP): 年齢が 35 歳未満で、歯周ポケットの深さ (PD) が第 1 大臼歯と切歯以外の少なくとも 3 本の歯の周囲で 4 mm を超える急速な付着喪失と診断された 20 人の患者で構成されます。 急速な骨破壊（患部で>50%の骨損失）。 歯垢と歯肉炎の重症度との弱い関係。
• 若年対照群 (YC): 35 歳未満で歯周病の徴候を示さない、年齢と性別が一致した 20 人の患者で構成されます。

臨床測定:

標準的な歯周プローブを使用して、歯あたり 6 箇所の歯周指標を記録します。 検査された臨床パラメーターには、プロービング時の出血 (BOP)、プラーク インデックス (PI)、クリニカル アタッチメント ロス (CAL)、歯周ポケットの深さ (PPD)、および歯肉インデックス (GI) が含まれます。

サンプルの収集

被験者は、サンプリングから 1 時間以内にブラッシングを控えるよう求められます。 （GCF）サンプルは、標準の紙片（Periocol strips、Oraflow、NY、USA）を使用して取得されます。 上顎の検査された各歯 (切歯、小臼歯、大臼歯) の各部位 (近顔面、離口蓋) からの 6 つのサンプル (Chapple et al. 2002)。 ストリップを PBS 緩衝液に 30 分間入れ、抽出して液体窒素下で保存します。

静脈血サンプルを肘前窩から採取し、リチウムヘパリンチューブに保存し、30分間1000×gで遠心分離する前に30分間放置し、サンプルを極低温バイアルに分注し、液体窒素下で保存します。

実験室での研究:

• ＴＢＡＲＳアッセイ（ＨＰＬＣ）を使用して、酸化ストレスのマーカーとしてマロンジアルデヒドレベルを評価する。
• ニトロソ化ストレスのマーカーとして一酸化窒素レベルを評価するグリース試薬。