Nitrooxidativer Stress bei Parodontitis

Einführung:

Zähne und ihre unterstützenden parodontalen Strukturen sind für eine gute Mundgesundheit von großer Bedeutung. Parodontitis ist eine entzündliche Erkrankung des Zahnhalteapparates, die das Stützgewebe der Zähne betrifft. Die Krankheit hat viele Facetten und ihre Ätiopathogenität ist noch nicht vollständig geklärt, weshalb die Behandlung verschiedener Arten von Parodontitis sehr schwierig sein kann. Zahlreiche Risikofaktoren wurden mit dem Krankheitsprozess in Verbindung gebracht, einschließlich Risikodeterminanten und Risikoindikatoren. In jüngster Zeit haben sich starke Beweise dafür angesammelt, dass reaktive Sauerstoff- (ROS) und Stickstoffspezies (RNS) entweder als Auslöser oder häufiger als Verschlimmerungsmittel der primären Läsionen bei Parodontitis eine Rolle spielen.

Sauerstoff- und stickstoffreaktive Spezies sind an einer großen Zahl physiologischer und pathologischer Prozesse beteiligt. ROS, die von Monozyten und Neutrophilen während einer Entzündung erzeugt werden, sind wichtige Aggressionsfaktoren im parodontalen Gewebe. ROS spielen eine wichtige Rolle bei der Aktivierung von Osteoklasten und bei der Knochenresorption.

Oxidativer Stress ist ein Zustand, der entsteht, wenn ein ernsthaftes Ungleichgewicht zwischen dem Gehalt an freien Radikalen in einer Zelle und ihrer antioxidativen Abwehr zugunsten der ersteren besteht. Daher kann es zu Gewebeschäden kommen, wenn Antioxidantiensysteme nicht in der Lage sind, den Wirkungen freier Radikale wirksam entgegenzuwirken. Entzündung Wenn sie durch bakterielle Pathogene stimuliert werden, setzen Wirtszellen proinflammatorische Zytokine (IL-1α, IL-6, IL-8 und Tumornekrosefaktor-α) als Teil der Immunantwort frei. Diese Zytokine rekrutieren polymorphkernige Zellen (PMNs), die eine wichtige Rolle in der Ätiologie von Parodontalerkrankungen spielen, indem sie proteolytische Enzyme wie Elastase und O2 (molekularer Sauerstoff) durch den oxidativen Ausbruch produzieren.

In einer kürzlich durchgeführten Studie stellten Abou Sulaiman & Shehadeh fest, dass die antioxidative Gesamtkapazität (TAS) im Serum bei syrischen Nichtraucherpatienten mit chronischer Parodontitis im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen niedriger war. Sie berichteten auch, dass die parodontale Behandlung die TAS-Spiegel auf normale Werte ähnlich wie bei gesunden Kontrollpersonen zurückbrachte.

Ziel dieser Studie ist es, die ROS- und RNS-Spiegel in Proben von Serum und Gingiva-Crevicular-Flüssigkeit (GCF) von Parodontitispatienten (chronisch und aggressiv) und gesunden Kontrollpersonen zu bestimmen. Anschließend Korrelieren dieser Werte mit der Schwere der Parodontitis bei syrischen Patienten.

Materialen und Methoden:

Von den Patienten, die an die Abteilung für Parodontologie der Fakultät für Zahnmedizin der Universität Damaskus überwiesen wurden, werden insgesamt 80 Probanden zur Teilnahme an dieser Studie eingeladen. Die Studie wurde von unserem lokalen Review Board genehmigt. Die Probanden werden gemäß spezifischen Einschlusskriterien nach dem Ausfüllen von Fragebögen zur medizinischen und zahnmedizinischen Vorgeschichte rekrutiert. Die Patienten unterschreiben eine Einverständniserklärung, nachdem sie über die Art der Studie informiert wurden.

Die Auswahl der Patienten erfolgt gemäß den Kriterien, die 1999 vom internationalen Weltworkshop für ein Klassifikationssystem parodontaler Erkrankungen und Zustände unter Verwendung von fünf klinischen Parametern und Vollmund- oder Panorama-Röntgenaufnahmen zur Diagnose genehmigt wurden.

Die Themen werden in vier Gruppen eingeteilt:

• Chronische Parodontitis-Gruppe (ChP): umfasst 20 Patienten im Alter von > 45 Jahren und mit ≥ 2 nicht benachbarten Stellen pro Quadrant, die keine ersten Molaren oder Schneidezähne waren, mit einer Sondierungstiefe (PD) von ≥ 5 mm, die bei vorsichtiger Sondierung bluten. Der nachgewiesene röntgenologische Knochenverlust ≥30 % der Wurzellänge, Patient mit schlechter Mundhygiene, die Menge der angesammelten Plaque entspricht der Menge des klinischen Attachmentlevels (CAL)
• Resistente Kontrollgruppe (R): umfasst 20 alters- und geschlechtsangepasste Patienten, die > 45 Jahre alt sind und keine Anzeichen einer Parodontalerkrankung aufweisen, wie durch das Fehlen von Hinweisen auf eine interproximale (CAL ≤ 1 mm), PD > 3 mm an irgendeiner Stelle bestimmt, vollständig -Mundblutungen < 10 % und keine klinischen Anzeichen einer Zahnfleischentzündung aufweisen .
• Aggressive Parodontitis-Gruppe (AgP): umfasst 20 Patienten, die < 35 Jahre alt sind und bei denen ein schneller Attachmentverlust mit einer parodontalen Taschentiefe (PD) > 4 mm um mindestens drei Zähne außer den ersten Molaren und Schneidezähnen diagnostiziert wurde. Schnelle Knochenzerstörung (>50 % Knochenverlust an erkrankten Stellen). Schwache Beziehung zwischen Zahnbelag und dem Schweregrad der Zahnfleischentzündung.
• Junge Kontrollgruppe (YC): umfasst 20 alters- und geschlechtsangepasste Patienten, die < 35 Jahre alt sind und keine Anzeichen einer Parodontitis aufweisen.

Klinische Messungen:

Eine standardmäßige Parodontalsonde wird zur Aufzeichnung von Parodontalindizes an sechs Stellen pro Zahn verwendet. Zu den untersuchten klinischen Parametern zählen Blutung bei Sondierung (BOP), Plaqueindex (PI), klinischer Attachmentverlust (CAL) sowie parodontale Taschentiefe (PPD) und Gingivaindex (GI).

Sammlung von Mustern

Die Probanden werden gebeten, das Bürsten innerhalb von 1 Stunde nach der Probenahme zu unterlassen. (GCF)-Proben werden unter Verwendung von Standardpapierstreifen (Periocol-Streifen, Oraflow, NY, USA) erhalten. 6 Proben von jeder einzelnen (mesiofazialen, distopalatalen) Stelle von jedem untersuchten Zahn (Schneidezahn, Prämolar und Molar) im Oberkiefer (Chapple et al. 2002). Die Streifen werden 30 Minuten lang in PBS-Pufferlösung gelegt, dann extrahiert und unter flüssigem Stickstoff gelagert.

Venöse Blutproben werden aus der Fossa antecubitalis entnommen und in Lithium-Heparin-Röhrchen gelagert und 30 Minuten lang stehen gelassen, bevor sie 30 Minuten lang bei 1000 × g zentrifugiert werden. Die Proben werden in kryogene Fläschchen aliquotiert und unter flüssigem Stickstoff gelagert.

Labor studien:

• Der TBARS-Assay (HPLC) wird verwendet, um die Malondialdehydspiegel als Marker für oxidativen Stress zu bestimmen.
• Griess-Reagenz zur Bestimmung des Stickoxidspiegels als Marker für nitrosativen Stress.