Epänormaalisti hedelmöittyneiden tsygoottien hoito? 3PN:n in vitro -korjaus

Kuten Dyban ja Baranov et al ovat hyväksyneet, noin 15-18 % aborteista johtuu triploidisesta hedelmöityksestä. Yksi äidin triploidian lähteistä on epäonnistuminen ensimmäisessä meioottisessa jakautumisessa (Jacobs et al., 1978).

Hedelmöitetty jättimäinen oosyytti (Dyban ja Baranov, 1987) kehittää yhden digynisen triploidian (ydin, mutta ei sytoplasmista jakautumista oogoniumissa tai kahden oogonian sytoplasminen fuusio (Austin, 1960)}.

Jättimäinen munasolu, jolle on ominaista suurempi halkaisija ja joka erottaa polaariset kappaleet metafaasissa II.

B. Rosenbusch et. al. 2002, sytogeneettinen tutkimus osoitti, että ylimääräinen haploidinen äidin kopio liittyi MII (46,XX/2N) jättimäisiin munasoluihin sekä triploidia hedelmöittyneiden jättimäisten munasolujen kanssa (3N 69,XXX tai 69,XXY).

Ensimmäinen mitoottinen jakautumistaso napa-akseleilla, Scott, 2001, osoittaa, että Pn, joka on kehittynyt lähemmäksi toista napakappaletta, on äidin alkuperää oleva PN.

Jättimäisiä munasoluja kerättiin eri IVF-sykleistä injektoitaviksi normaaleja siittiöitä käyttämällä intrasytoplasmista siittiöinjektiota (ICSI). 18 tuntia ICSI:n jälkeen järjestettiin hedelmöitysarviointi ja PN-poisto hedelmöittyneestä munasolusta ennen syngamian alkamista.

Liitteenä oleva video näyttää tsygootin manipulointiprosessin siten, että vältetään jakoakseli ja kohdistetaan ylimääräinen äidin PN aspiroitavaksi.

Pronukleaarinen siirto ihmisen alkioissa mitokondriaalisen DNA:n korjaukseen aloitti pronukleaarisen manipulaation metodologian, jotta 3PN:n hyödyntämismahdollisuus voidaan käynnistää kehitettyjä alkioiden tutkimustyökaluja. Järjestimme tutkia saatavilla olevia jättimäisiä munasoluja IVF-jaksojen aikana. Tämän mukaisesti järjestimme pronukleaarisen poiston, jota seurasi FISH-arviointi, jotta kohdistamme normaalit urosalkiot, jotka varmistavat oikean ylimääräisen äidin pronukleuksen poiston.

Onnistuneet kokeet äidin PN:n poistamiseksi jättimäisille munasoluille, jotka on kerätty eri tapauksista, yhteenveto taulukossa 1. Kaikki kehittyneet blastokystit järjestyivät FISH:lle, joten kaikkia alkioita käytettiin sytogeneettiseen arviointiin.

Suositukset:

Muita arviointeja käyttämällä STR:itä (Short tandem repeat) tulisi käyttää äidin ja isän genomin erilaistumiseen. Kehittyneiden alkioiden NGS-tutkimusta arvioidaan täydellisen CCS-raportoinnin ja geneettisen eheyden lisäämiseksi. Epigeneettistä arviointitutkimusta suositellaan triploidikorjattujen alkioiden geneettisten ilmentymien ja varhaisten alkioiden kehityksen sekä isän ja äidin genomisen toiminnan erottamisen kannalta.