¿Manejo de cigotos anormalmente fecundados? Corrección In Vitro de 3PN

Según lo aprobado por Dyban y Baranov et al, alrededor del 15-18% de los abortos son causados ​​por fertilización triploidía. Una de las fuentes de la triploidía materna es la falla en la primera división meiótica (Jacobs et al., 1978).

Una de las triploidías de Digynic es desarrollada por un ovocito gigante fertilizado (Dyban y Baranov, 1987) {división nuclear pero no citoplasmática en un oogonio o fusión citoplasmática de dos oogonios (Austin, 1960)}.

Ovocito gigante caracterizado por mayor diámetro y cuerpos polares diferenciados en la metafase II.

B. Rosenbusch et. Alabama. 2002, el estudio citogenético mostró que la copia materna extrahaploide se asociaba con ovocitos gigantes MII (46,XX/ 2N), así como triploidía con ovocitos gigantes fertilizados (3N con 69,XXX o 69,XXY).

Los estudios del primer plano de división mitótica con ejes polares realizados por Scott, 2001, muestran que Pn se desarrolló más cerca del segundo cuerpo polar que es el PN de origen materno.

Se recogieron ovocitos gigantes de diferentes ciclos de FIV, para inyectarlos con espermatozoides normales mediante inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI). 18 horas después de la ICSI se dispuso la evaluación de la fertilización y la extracción de NP para el ovocito fertilizado antes de que comience la singamia.

El video adjunto muestra el proceso de manipulación del cigoto evitando el eje de división y enfocando el PN extramaterno a aspirar.

La transferencia pronuclear en embriones humanos para la corrección del ADN mitocondrial inició la metodología de manipulación pronuclear, por lo que se puede iniciar la posibilidad de utilizar las herramientas de investigación de embriones desarrollados con 3PN. Nos dispusimos a estudiar los ovocitos gigantes recibidos disponibles durante los ciclos de FIV. En consecuencia, organizamos la eliminación pronuclear seguida de una evaluación FISH para apuntar a embriones masculinos normales que aseguren la eliminación adecuada del pronúcleo materno adicional.

Ensayos exitosos de extracción de NP materna para ovocitos gigantes recolectados de diferentes casos resumidos en la tabla 1. Todos los blastocistos desarrollados se organizaron para FISH, por lo que todos los embriones se utilizaron para la evaluación citogenética.

Recomendaciones:

Se deben utilizar evaluaciones adicionales que utilicen STR (repetición corta en tándem) para la diferenciación del genoma materno-paterno. El estudio NGS está bajo evaluación para embriones desarrollados para informes completos de CCS y más integridad genética. Estudio de evaluación epigenética recomendado para embriones corregidos por triploidía para expresiones genéticas y desarrollos embrionarios tempranos, así como diferenciación entre la actividad genómica paterna y materna.