Gestão de Zigotos Anormalmente Fertilizados? Correção InVitro de 3PN

Conforme aprovado por Dyban e Baranov et al, cerca de 15-18% dos abortos são causados ​​por fertilização triploidia. Uma das fontes de triploidia materna é a falha na primeira divisão meiótica (Jacobs et al., 1978).

Uma das triploidia digínica é desenvolvida por oócito gigante fertilizado (Dyban e Baranov, 1987) {nuclear, mas sem divisão citoplasmática em uma oogônia ou fusão citoplasmática de duas oogônias (Austin, 1960)}.

Ovócito gigante caracterizado com maior diâmetro e corpos polares diferenciados na metáfase II.

B. Rosenbusch et. al. 2002, estudo citogenético mostrou que cópia materna extra haploide associada a oócitos gigantes MII (46,XX/ 2N ) bem como triploidia com oócitos gigantes fertilizados (3N com 69,XXX ou 69,XXY).

Primeiro plano de divisão mitótica com estudos de eixos polares por Scott, 2001, mostra que Pn desenvolvido próximo ao 2º corpo polar é o PN de origem materna.

Oócitos gigantes foram coletados de diferentes ciclos de fertilização in vitro, para serem injetados com espermatozoides normais por injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI). 18 horas após ICSI marcada para avaliação de fertilização e remoção de PN para oócitos fertilizados antes do início da singamia.

O vídeo anexo mostra o processo de manipulação do zigoto evitando o eixo da divisão e focando o PN extra materno a ser aspirado.

A transferência pronuclear em embriões humanos para correção do DNA mitocondrial iniciou a metodologia de manipulação pronuclear, para que possa ser iniciada a possibilidade de utilização de ferramentas de pesquisa de embriões desenvolvidos 3PNs. Organizamos o estudo dos oócitos gigantes recebidos disponíveis durante os ciclos de fertilização in vitro. Assim, organizamos a remoção pronuclear seguida de avaliação FISH para direcionar embriões de machos normais que garantam a remoção adequada do pró-núcleo materno extra.

Ensaios bem-sucedidos de remoção de PN materno para oócitos gigantes coletados de diferentes casos resumidos na tabela 1. Todos os blastocistos desenvolvidos foram preparados para FISH, então todos os embriões foram utilizados para avaliação citogenética.

Recomendações:

Outras avaliações usando STRs (Short tandem repeat) devem ser usadas para a diferenciação do genoma materno-paterno. O estudo NGS está sob avaliação para embriões desenvolvidos para relatórios CCS completos e mais integridade genética. Estudo de avaliação epigenética recomendado para embriões corrigidos para triploidia para expressões genéticas e desenvolvimento embrionário inicial, bem como diferenciação entre atividade genômica paterna e materna.