Postępowanie w przypadku nieprawidłowo zapłodnionych zygot? Korekta in vitro 3PN

Jak zaaprobowali Dyban i Baranov i wsp., około 15-18% aborcji jest spowodowanych zapłodnieniem triploidalnym. Jednym ze źródeł triploidii matczynej jest niepowodzenie pierwszego podziału mejotycznego (Jacobs i in., 1978).

Jedna z triploidii Digynic jest rozwijana przez zapłodniony olbrzymi oocyt (Dyban i Baranov, 1987) {podział jądrowy, ale bez cytoplazmy w oogonium lub cytoplazmatyczna fuzja dwóch oogonii (Austin, 1960)}.

Olbrzymi oocyt charakteryzujący się większą średnicą i wyróżniającymi się ciałami kierunkowymi w metafazie II.

B. Rosenbusch et. glin. 2002, badanie cytogenetyczne wykazało, że dodatkowa haploidalna kopia matczyna związana jest z oocytami olbrzymimi MII (46,XX/2N ), jak również z triploidią z zapłodnionymi oocytami olbrzymimi (3N z 69,XXX lub 69,XXY).

Badania pierwszej płaszczyzny podziału mitotycznego z osiami biegunowymi przeprowadzone przez Scotta, 2001 pokazują, że Pn rozwinięty bliżej drugiego ciała polarnego jest PN pochodzenia matczynego.

Olbrzymie oocyty pobrano z różnych cykli IVF, aby wstrzyknąć je normalnym plemnikom przy użyciu ICSI (Intracytoplasmic Sperma Injection). 18 godzin po ICSI zorganizowano ocenę zapłodnienia i usunięcie PN dla zapłodnionego oocytu przed rozpoczęciem syngamii.

Załączone wideo pokazuje proces manipulacji zygotą poprzez unikanie osi podziału i skupianie dodatkowej matczynej PN do aspiracji.

Transfer przedjądrowy w embrionach ludzkich w celu korekcji mitochondrialnego DNA zapoczątkował metodologię manipulacji przedjądrowych, aby można było uruchomić możliwość wykorzystania opracowanych przez 3PN narzędzi do badań embrionów. Umówiliśmy się na badanie dostępnych olbrzymich oocytów otrzymanych podczas cykli IVF. W związku z tym zorganizowaliśmy usunięcie przedjądrza, a następnie ocenę FISH w celu ukierunkowania na normalne zarodki męskie, które zapewniają prawidłowe usunięcie przedjądrza pozamatczynego.

Udane próby usunięcia matczynej PN dla olbrzymiego oocytu zebranego z różnych przypadków podsumowano w tabeli 1. Wszystkie rozwinięte blastocysty zostały przygotowane do FISH, więc wszystkie zarodki wykorzystano do oceny cytogenetycznej.

Zalecenia:

Dalsze oceny przy użyciu STR (krótkie powtórzenie tandemowe) powinny być wykorzystane do różnicowania genomu matczynego i ojcowskiego. Badanie NGS jest w trakcie oceny rozwiniętych zarodków pod kątem pełnego raportowania CCS i większej integralności genetycznej. Badanie oceny epigenetycznej zalecane dla zarodków z korekcją triploidii pod kątem ekspresji genetycznej i wczesnego rozwoju zarodka, a także różnicowania między aktywnością genomową ojca i matki.