Gestione degli zigoti anormalmente fertilizzati? Correzione InVitro di 3PN
Trattamento di zigoti anormalmente multinucleati prima dell'inizio della divisione.
In questo protocollo e idea di nuova concezione è quello di gestire quegli zigoti sviluppati in modo anomalo da diverse procedure ART.
I ricercatori hanno sviluppato il piano e i requisiti necessari per selezionare il nucleo o pronuclei extra bersaglio da estrudere dall'uovo fecondato al fine di mantenere lo sviluppo di un embrione normale e sano.
Panoramica dello studio
Stato
Condizioni
Intervento / Trattamento
Descrizione dettagliata
Come approvato da Dyban e Baranov et al, circa il 15-18% degli aborti è causato dalla fecondazione triploidica. Una delle fonti di triploidia materna è il fallimento nella prima divisione meiotica (Jacobs et al., 1978).
Una delle triploidie diginiche è sviluppata da un ovocita gigante fecondato (Dyban e Baranov, 1987) {divisione nucleare ma senza citoplasmatica in un oogonio o fusione citoplasmatica di due oogonia (Austin, 1960)}.
Ovocita gigante caratterizzato da diametro maggiore e corpi polari distinti in metafase II.
B.Rosenbusch et. al. 2002, uno studio citogenetico ha mostrato che la copia materna extra aploide è associata a ovociti giganti MII (46,XX/2N) così come triploidia con ovociti giganti fecondati (3N con 69,XXX o 69,XXY).
Il primo piano di divisione mitotica con studi sugli assi polari di Scott, 2001, mostra che Pn sviluppato più vicino al 2° corpo polare è l'origine materna PN.
Gli ovociti giganti sono stati raccolti da diversi cicli di fecondazione in vitro, per essere iniettati con spermatozoo normale utilizzando l'iniezione intracitoplasmatica di spermatozoi (ICSI). 18 ore dopo l'ICSI organizzato per la valutazione della fecondazione e la rimozione della PN per l'ovocita fecondato prima dell'inizio della sinagoga.
Il video allegato mostra il processo di manipolazione dello zigote evitando l'asse di divisione e focalizzando la PN extra materna da aspirare.
Il trasferimento pronucleare in embrioni umani per la correzione del DNA mitocondriale ha avviato la metodologia di manipolazione pronucleare, per poter avviare la possibilità di utilizzare strumenti di ricerca sugli embrioni sviluppati da 3PN. Ci siamo accordati per studiare gli ovociti giganti disponibili ricevuti durante i cicli di fecondazione in vitro. Di conseguenza abbiamo organizzato la rimozione del pronucleo seguita dalla valutazione FISH al fine di prendere di mira gli embrioni di maschi normali che assicurano una corretta rimozione del pronucleo extra materno.
Prove riuscite di rimozione materna di PN per ovociti giganti raccolti da diversi casi riassunti nella tabella 1. Tutte le blastocisti sviluppate erano predisposte per la FISH, quindi tutti gli embrioni sono stati utilizzati per la valutazione citogenetica.
Raccomandazioni:
Ulteriori valutazioni utilizzando STR (Short tandem repeat) dovrebbero essere utilizzate per la differenziazione del genoma materno-paterno. Lo studio NGS è in fase di valutazione per gli embrioni sviluppati per la segnalazione completa di CCS e una maggiore integrità genetica. Studio di valutazione epigenetica raccomandato per embrioni triploidi corretti per espressioni genetiche e primi sviluppi embrionali, nonché differenziazione tra attività genomica paterna e materna.
Tipo di studio
Iscrizione (Effettivo)
Fase
- Prima fase 1
Contatti e Sedi
Criteri di partecipazione
Criteri di ammissibilità
Età idonea allo studio
Accetta volontari sani
Sessi ammissibili allo studio
Descrizione
Criterio di inclusione:
- Ovociti giganti
- 3 PN hanno sviluppato embrioni al giorno 1 dopo l'ICSI.
Criteri di esclusione:
- La paziente si è rifiutata di coinvolgere i propri ovociti anormali nel nostro studio.
Piano di studio
Come è strutturato lo studio?
Dettagli di progettazione
- Scopo principale: Trattamento
- Assegnazione: Non randomizzato
- Modello interventistico: Assegnazione di gruppo singolo
- Mascheramento: Separare
Armi e interventi
Gruppo di partecipanti / Arm |
Intervento / Trattamento |
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Comparatore attivo: Ovociti giganti dopo ICSI
ovocita prodotto in modo anomalo dopo ART o stimolazione ovarica controllata.
Correzione di ovociti fecondati in modo anomalo mediante rimozione del nucleo.
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Rimozione del nucleo extra sviluppato dall'ovocita fecondato.
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Comparatore attivo: Zigoti 3PN sviluppati dopo l'ICSI
Embrioni sviluppati in modo anomalo hanno prodotto 3PN.
Correzione di ovociti fecondati in modo anomalo mediante rimozione del nucleo.
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Rimozione del nucleo extra sviluppato dall'ovocita fecondato.
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Cosa sta misurando lo studio?
Misure di risultato primarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Embrioni normali sviluppati
Lasso di tempo: Giorno 1 o 18 ore dopo la rimozione del nucleo ICSI
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A 18 ore dall'ICSi, il nucleo deve essere rimosso per effettuare la correzione genetica per gli embrioni sviluppati in modo anomalo. Il risultato finale sono embrioni normali prodotti con 2PN valutati dallo studio FSIH per 5 cromosomi. Ciò indicava che il processo di correzione genetica era un processo riuscito e applicabile per produrre embrioni in crescita normale. |
Giorno 1 o 18 ore dopo la rimozione del nucleo ICSI
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Misure di risultato secondarie
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Embrione del giorno 3 disponibile per la biopsia del blastomero
Lasso di tempo: 1 anno
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Disponibilità di una rimozione del nucleo riuscita dallo zigote da sviluppare in embrione in divisione attiva disponibile per lo studio citogenetico. Ciò indicava un normale processo di embriogenesi |
1 anno
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5 cromosomi studio FISH
Lasso di tempo: 1 anno
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cromosomi 13, 18, 21, X e Y da sottoporre a screening mediante ibridazione in situ fluorescente (FISH).
Per controllare l'euploide primario sviluppato con embrioni maschili (XY) o femminili (XX).
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1 anno
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Altre misure di risultato
Misura del risultato |
Misura Descrizione |
Lasso di tempo |
|---|---|---|
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Sviluppo di blastocisti
Lasso di tempo: Giorno 5 sviluppo dell'embrione per lo stadio di blastocisti
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disponibilità di embrioni da sviluppare per il giorno 5 dando la possibilità di una migliore valutazione delle cellule e più studi genetici e citogenetici.
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Giorno 5 sviluppo dell'embrione per lo stadio di blastocisti
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Collaboratori e investigatori
Sponsor
Investigatori
- Investigatore principale: Ahmad M Metwalley, Al Baraka Fertility Hospital
Pubblicazioni e link utili
Pubblicazioni generali
- Jacobs PA, Angell RR, Buchanan IM, Hassold TJ, Matsuyama AM, Manuel B. The origin of human triploids. Ann Hum Genet. 1978 Jul;42(1):49-57. doi: 10.1111/j.1469-1809.1978.tb00930.x.
- Rosenbusch B. The potential significance of binovular follicles and binucleate giant oocytes for the development of genetic abnormalities. J Genet. 2012;91(3):397-404. doi: 10.1007/s12041-012-0195-x.
- Wolf DP, Mitalipov N, Mitalipov S. Mitochondrial replacement therapy in reproductive medicine. Trends Mol Med. 2015 Feb;21(2):68-76. doi: 10.1016/j.molmed.2014.12.001. Epub 2014 Dec 10.
- Vogel G. Assisted reproduction. FDA considers trials of 'three-parent embryos'. Science. 2014 Feb 21;343(6173):827-8. doi: 10.1126/science.343.6173.827. No abstract available.
- Amato P, Tachibana M, Sparman M, Mitalipov S. Three-parent in vitro fertilization: gene replacement for the prevention of inherited mitochondrial diseases. Fertil Steril. 2014 Jan;101(1):31-5. doi: 10.1016/j.fertnstert.2013.11.030.
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Inizio studio
Completamento primario (Effettivo)
Completamento dello studio (Effettivo)
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Primo inviato
Primo inviato che soddisfa i criteri di controllo qualità
Primo Inserito (Stima)
Aggiornamenti dei record di studio
Ultimo aggiornamento pubblicato (Stima)
Ultimo aggiornamento inviato che soddisfa i criteri QC
Ultimo verificato
Maggiori informazioni
Termini relativi a questo studio
Parole chiave
Termini MeSH pertinenti aggiuntivi
Altri numeri di identificazione dello studio
- AlBarakaSD3
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