Лечение аномально оплодотворенных зигот? InVitro коррекция 3PN

По утверждению Дыбана и Баранова с соавт., около 15-18% абортов вызвано триплоидным оплодотворением. Одним из источников материнской триплоидии является сбой в первом делении мейоза (Jacobs et al., 1978).

Одна из дигинических триплоидий развивается из оплодотворенного гигантского ооцита (Дыбан и Баранов, 1987) {ядерное, но не цитоплазматическое деление в оогонии или цитоплазматическое слияние двух оогоний (Остин, 1960)}.

Гигантский ооцит характеризуется большим диаметром и будет выделять полярные тельца в метафазе II.

Б. Розенбуш и др. др. 2002, цитогенетическое исследование показало, что экстрагаплоидная материнская копия ассоциирована с гигантскими ооцитами MII (46,XX/2N), а также триплоидия с оплодотворенными гигантскими ооцитами (3N с 69,XXX или 69,XXY).

Первые исследования митотической плоскости деления с полярными осями, проведенные Scott, 2001, показывают, что Pn развился ближе ко 2-му полярному тельцу, это PN материнского происхождения.

Гигантские ооциты были собраны из разных циклов ЭКО для инъекции нормальной спермы с помощью интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ИКСИ). Через 18 часов после ИКСИ проводится оценка оплодотворения и удаление ПП для оплодотворенных ооцитов до начала сингамии.

Прилагаемое видео показывает процесс манипулирования зиготой, избегая оси деления и фокусируя дополнительный материнский PN для аспирации.

Пронуклеусный перенос в эмбрионах человека для коррекции митохондриальной ДНК положил начало методологии пронуклеарных манипуляций, для чего может быть начата возможность использования разработанных 3PN инструментов исследования эмбрионов. Нами было организовано исследование имеющихся в наличии гигантских ооцитов, полученных в ходе циклов ЭКО. Соответственно, мы организовали удаление пронуклеусов с последующей оценкой FISH для нацеливания на нормальные эмбрионы мужского пола, которые обеспечивают надлежащее удаление дополнительных материнских пронуклеусов.

Успешные испытания по удалению материнского PN для гигантских ооцитов, собранных в разных случаях, обобщены в таблице 1. Все бластоцисты были подготовлены для FISH, поэтому все эмбрионы были использованы для цитогенетической оценки.

Рекомендации:

Дальнейшие оценки с использованием STR (короткий тандемный повтор) следует использовать для дифференциации материнского и отцовского генома. Исследование NGS находится в стадии оценки для развитых эмбрионов для полной отчетности CCS и большей генетической целостности. Эпигенетическое оценочное исследование, рекомендованное для эмбрионов с исправлением триплоидии для генетической экспрессии и раннего развития эмбриона, а также для дифференциации между отцовской и материнской геномной активностью.