Behandling av unormalt befruktede zygoter? InVitro-korreksjon av 3PN

Som godkjent av Dyban og Baranov et al., er ca. 15-18 % av abortene forårsaket av triploid befruktning. En av kildene til maternal triploidi er svikt i den første meiotiske divisjonen (Jacobs et al., 1978).

En av Digynic triploidy er utviklet av befruktet gigantisk oocytt (Dyban og Baranov, 1987) {nukleær men ingen cytoplasmatisk deling i et oogonium eller cytoplasmatisk fusjon av to oogonier (Austin, 1960)}.

Kjempeoocytt karakterisert med større diameter og vil skille polare kropper ved metafase II.

B. Rosenbusch et. al. 2002, cytogenetisk studie viste at ekstra haploid mors kopi assosiert med MII (46,XX/2N ) gigantiske oocytter samt triploidi med befruktede gigantiske oocytter (3N med 69,XXX eller 69,XXY).

Første mitotiske divisjonsplan med polare aksestudier av Scott, 2001, viser at Pn utviklet nærmere 2. polarlegeme er mors opprinnelse PN.

Kjempeoocytter ble samlet fra forskjellige IVF-sykluser, for å bli injisert med normal sæd ved bruk av Intracytoplasmatisk sæd-injeksjon (ICSI). 18 timer etter ICSI arrangerte befruktningsevaluering og PN-fjerning for befruktet oocytt før syngami starter.

Video vedlagt viser prosessen med zygote-manipulasjon for å unngå delingsaksen og fokusere den ekstra mors PN som skal aspireres.

Pronukleær overføring i menneskelige embryoer for mitokondriell DNA-korreksjon startet metodikken for pronukleær manipulasjon, for at muligheten for å bruke 3PNs utviklet embryoforskningsverktøy kan startes. Vi arrangerte å studere tilgjengelige mottatte gigantiske oocytter under IVF-sykluser. Følgelig arrangerte vi pronukleær fjerning etterfulgt av FISH-evaluering for å målrette normale mannlige embryoer som sikrer riktig fjerning av ekstra mors pronukleus.

Vellykkede forsøk med mors PN-fjerning for gigantiske oocytter samlet fra forskjellige tilfeller oppsummert i tabell 1. Alle blastocyster utviklet tilrettelagt for FISH, så alle embryoer ble brukt for cytogenetisk evaluering.

Anbefalinger:

Ytterligere evalueringer ved bruk av STR-er (Short tandem repeat) bør brukes for mors-fars genomdifferensiering. NGS-studie er under evaluering for utviklede embryoer for full CCS-rapportering og mer genetisk integritet. Epigenetisk evalueringsstudie anbefalt for triploidikorrigerte embryoer for genetiske uttrykk og tidlig embryoutvikling samt differensiering mellom paternal og mors genomisk aktivitet.