Rendellenesen megtermékenyített zigóták kezelése? A 3PN in vitro korrekciója
Rendellenesen sokmagvú zigóták kezelése osztódás előtt.
Ebben az újonnan kifejlesztett protokollban és ötletben az abnormálisan fejlett zigóták kezelése a különböző ART eljárásokból.
A kutatók kidolgozták a tervet és a szükséges követelményeket a megtermékenyített petesejtből extrudálandó extra sejtmag vagy pronukleusz kiválasztásához az egészséges, normális embrió fenntartása érdekében.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Amint azt Dyban és Baranov és munkatársai jóváhagyták, az abortuszok körülbelül 15-18%-át triploidos megtermékenyítés okozza. Az anyai triploiditás egyik forrása az első meiotikus osztódás kudarca (Jacobs et al., 1978).
A Digynic triploidiák egyikét megtermékenyített óriáspetesejtek (Dyban és Baranov, 1987) {nukleáris, de nincs citoplazmaosztódás az oogoniumban vagy két oogonia citoplazmatikus fúziója (Austin, 1960)}.
Nagyobb átmérőjű óriás petesejt, amely a II. metafázisban megkülönbözteti a poláris testeket.
B. Rosenbusch et. al. 2002-ben a citogenetikai vizsgálat kimutatta, hogy az extra haploid anyai kópia a MII (46,XX/2N) óriáspetesejtekkel, valamint a megtermékenyített óriáspetesejtekkel (3N 69,XXX vagy 69,XXY) triploiddal társul.
Scott, 2001, első poláris tengelyekkel végzett mitotikus osztódási síkja azt mutatja, hogy a 2. poláris testhez közelebb fejlődő Pn az anyai eredetű PN.
Különböző IVF-ciklusokból óriás petesejteket gyűjtöttek össze, hogy normál spermával injektálják őket intracitoplazmatikus spermium injekció (ICSI) segítségével. Az ICSI után 18 órával megtermékenyítették a megtermékenyítés értékelését és a PN eltávolítását a megtermékenyített petesejtekből a szingámia megkezdése előtt.
A mellékelt videó a zigóta manipuláció folyamatát mutatja be, elkerülve az osztódási tengelyt és fókuszálva a leszívandó extra anyai PN-t.
A humán embriókban a mitokondriális DNS korrekciója céljából végzett pronukleáris transzfer elindította a pronukleáris manipuláció módszertanát, a 3PN-ek hasznosításának lehetőségére a kifejlesztett embriók kutatási eszközei megkezdődhetnek. Megbeszéltük, hogy tanulmányozzuk a rendelkezésre álló, beérkezett óriási petesejteket az IVF ciklusok során. Ennek megfelelően megszerveztük a pronukleáris eltávolítást, majd FISH kiértékelést, hogy megcélozzuk a normál hím embriókat, amelyek biztosítják a megfelelő extra anyai pronucleus eltávolítást.
A különböző esetekből gyűjtött óriáspetesejtek anyai PN-eltávolításának sikeres kísérleteit az 1. táblázat foglalja össze. Minden blasztociszta FISH-re rendeződött, így az összes embriót felhasználtuk a citogenetikai értékeléshez.
Javaslatok:
Az anyai-apai genom differenciálásához további értékeléseket kell alkalmazni az STR-k (Short tandem repeat) használatával. Az NGS-tanulmány kiértékelés alatt áll a fejlett embriók esetében a teljes CCS-jelentés és a nagyobb genetikai integritás érdekében. Epigenetikai értékelő vizsgálat javasolt triploidiával korrigált embrióknál a genetikai expresszió és a korai embriófejlődés, valamint az apai és anyai genomiális aktivitás megkülönböztetése érdekében.
Tanulmány típusa
Beiratkozás (Tényleges)
Fázis
- 1. korai fázis
Kapcsolatok és helyek
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Leírás
Bevételi kritériumok:
- Óriás petesejtek
- 3 PN-ből fejlődött ki embrió az ICSI utáni 1. napon.
Kizárási kritériumok:
- A páciens nem volt hajlandó kóros petesejteket bevonni vizsgálatunkba.
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Elsődleges cél: Kezelés
- Kiosztás: Nem véletlenszerű
- Beavatkozó modell: Egyetlen csoportos hozzárendelés
- Maszkolás: Egyetlen
Fegyverek és beavatkozások
Résztvevő csoport / kar |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Aktív összehasonlító: Óriás petesejtek az ICSI után
abnormálisan termelődött petesejt ART vagy kontrollált petefészek stimuláció után.
Rendellenesen megtermékenyített petesejtek korrekciója sejtmag eltávolításával.
|
Az extra fejlett sejtmag eltávolítása a megtermékenyített petesejtekből.
|
|
Aktív összehasonlító: A 3PNs zigóták az ICSI után fejlődtek ki
A rendellenesen fejlett embriók 3PN-t termeltek.
Rendellenesen megtermékenyített petesejtek korrekciója sejtmag eltávolításával.
|
Az extra fejlett sejtmag eltávolítása a megtermékenyített petesejtekből.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Normál embriók fejlődtek
Időkeret: 1. nap vagy 18 órával az ICSI sejtmag eltávolítása után
|
Az ICSi után 18 órával a sejtmagot el kell távolítani a rendellenesen fejlett embriók genetikai korrekciója érdekében. A végeredmény 5 kromoszómára vonatkozó FSIH-vizsgálattal értékelt 2PN-vel előállított normál embriók. Ez azt jelzi, hogy a genetikai korrekciós folyamat sikeres volt, és alkalmazható normál növekedésű embriók előállítására. |
1. nap vagy 18 órával az ICSI sejtmag eltávolítása után
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
A 3. napi embrió elérhető blastomer biopsziához
Időkeret: 1 év
|
Sikeres sejtmag-eltávolítás elérhetősége a fejlesztendő zigótából aktív osztódó embrióvá citogenetikai vizsgálat céljából. Ez normális embriogenezis feldolgozást jelez |
1 év
|
|
5 kromoszóma FISH vizsgálat
Időkeret: 1 év
|
A 13., 18., 21., X és Y kromoszómákat fluoreszcencia insitu hibridizációval (FISH) kell szűrni.
A hím (XY) vagy nőstény (XX) embriókkal kifejlődött elsődleges euploid ellenőrzésére.
|
1 év
|
Egyéb eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Blastocysta fejlődés
Időkeret: 5. nap embriófejlődés blasztociszta stádiumban
|
az 5. napon fejlődő embriók elérhetősége, ami lehetőséget ad a sejtek jobb értékelésére és több genetikai és citogenetikai vizsgálatra.
|
5. nap embriófejlődés blasztociszta stádiumban
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: Ahmad M Metwalley, Al Baraka Fertility Hospital
Publikációk és hasznos linkek
Általános kiadványok
- Jacobs PA, Angell RR, Buchanan IM, Hassold TJ, Matsuyama AM, Manuel B. The origin of human triploids. Ann Hum Genet. 1978 Jul;42(1):49-57. doi: 10.1111/j.1469-1809.1978.tb00930.x.
- Rosenbusch B. The potential significance of binovular follicles and binucleate giant oocytes for the development of genetic abnormalities. J Genet. 2012;91(3):397-404. doi: 10.1007/s12041-012-0195-x.
- Wolf DP, Mitalipov N, Mitalipov S. Mitochondrial replacement therapy in reproductive medicine. Trends Mol Med. 2015 Feb;21(2):68-76. doi: 10.1016/j.molmed.2014.12.001. Epub 2014 Dec 10.
- Vogel G. Assisted reproduction. FDA considers trials of 'three-parent embryos'. Science. 2014 Feb 21;343(6173):827-8. doi: 10.1126/science.343.6173.827. No abstract available.
- Amato P, Tachibana M, Sparman M, Mitalipov S. Three-parent in vitro fertilization: gene replacement for the prevention of inherited mitochondrial diseases. Fertil Steril. 2014 Jan;101(1):31-5. doi: 10.1016/j.fertnstert.2013.11.030.
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Becslés)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Becslés)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- AlBarakaSD3
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .