Gestion des zygotes anormalement fécondés ? Correction in vitro de 3PN
Traitement des zygotes anormalement multinucléés avant le début de la division.
Dans ce protocole et cette idée nouvellement développés, il s'agit de gérer ces zygotes anormalement développés à partir de différentes procédures ART.
Les chercheurs ont élaboré le plan et les exigences nécessaires pour sélectionner le noyau ou les pronucléi supplémentaires cibles à extruder de l'œuf fécondé afin de maintenir le développement d'un embryon normal et sain.
Aperçu de l'étude
Statut
Les conditions
Intervention / Traitement
Description détaillée
Comme approuvé par Dyban et Baranov et al, environ 15 à 18% des avortements sont causés par la fécondation triploïdie. L'une des sources de la triploïdie maternelle est l'échec de la première division méiotique (Jacobs et al., 1978).
L'une des triploïdies digyniques est développée par un ovocyte géant fécondé (Dyban et Baranov, 1987) {division nucléaire mais pas cytoplasmique dans un oogone ou fusion cytoplasmique de deux oogones (Austin, 1960)}.
Ovocyte géant caractérisé par un plus grand diamètre et distinguera les corps polaires à la métaphase II.
B. Rosenbusch et. Al. 2002, une étude cytogénétique a montré qu'une copie maternelle extra-haploïde était associée à des ovocytes géants MII (46,XX/ 2N ) ainsi qu'une triploïdie avec des ovocytes géants fécondés (3N avec 69,XXX ou 69,XXY).
Les études du premier plan de division mitotique avec axes polaires de Scott, 2001 , montrent que le Pn développé plus près du 2e globule polaire est le PN d'origine maternelle.
Des ovocytes géants ont été collectés à partir de différents cycles de FIV, pour être injectés avec du sperme normal par injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI). 18 heures après l'ICSI ont organisé l'évaluation de la fécondation et l'élimination du PN pour l'ovocyte fécondé avant le début de la syngamie.
La vidéo ci-jointe montre le processus de manipulation du zygote en évitant l'axe de division et en concentrant le PN extra-maternel à aspirer.
Le transfert pronucléaire dans des embryons humains pour la correction de l'ADN mitochondrial a lancé la méthodologie de la manipulation pronucléaire, pour que la possibilité d'utiliser les outils de recherche sur les embryons développés par les 3PN puisse être lancée. Nous nous sommes arrangés pour étudier les ovocytes géants reçus disponibles pendant les cycles de FIV. En conséquence, nous avons organisé une élimination pronucléaire suivie d'une évaluation FISH afin de cibler les embryons mâles normaux qui assurent une élimination appropriée du pronucléus extra-maternel.
Essais réussis d'élimination de la PN maternelle pour les ovocytes géants collectés à partir de différents cas résumés dans le tableau 1. Tous les blastocystes se sont développés pour le FISH, de sorte que tous les embryons ont été utilisés pour l'évaluation cytogénétique.
Recommandations :
D'autres évaluations utilisant des STR (Short tandem repeat) doivent être utilisées pour la différenciation du génome maternel-paternel. L'étude NGS est en cours d'évaluation pour les embryons développés pour un rapport CCS complet et une plus grande intégrité génétique. Étude d'évaluation épigénétique recommandée pour les embryons corrigés en triploïdie pour les expressions génétiques et les développements embryonnaires précoces ainsi que la différenciation entre l'activité génomique paternelle et maternelle.
Type d'étude
Inscription (Réel)
Phase
- Première phase 1
Contacts et emplacements
Critères de participation
Critère d'éligibilité
Âges éligibles pour étudier
Accepte les volontaires sains
Sexes éligibles pour l'étude
La description
Critère d'intégration:
- Ovocytes géants
- 3 PN ont développé des embryons au jour 1 après l'ICSI.
Critère d'exclusion:
- La patiente a refusé d'impliquer ses ovocytes anormaux dans notre étude.
Plan d'étude
Comment l'étude est-elle conçue ?
Détails de conception
- Objectif principal: Traitement
- Répartition: Non randomisé
- Modèle interventionnel: Affectation à un seul groupe
- Masquage: Seul
Armes et Interventions
Groupe de participants / Bras |
Intervention / Traitement |
|---|---|
|
Comparateur actif: Ovocytes géants après ICSI
ovocyte produit anormalement après ART ou stimulation ovarienne contrôlée.
Correction des ovocytes anormalement fécondés par élimination du noyau.
|
Retrait du noyau extra-développé de l'ovocyte fécondé.
|
|
Comparateur actif: Zygotes 3PNs développés après ICSI
Les embryons anormalement développés ont produit des 3PN.
Correction des ovocytes anormalement fécondés par élimination du noyau.
|
Retrait du noyau extra-développé de l'ovocyte fécondé.
|
Que mesure l'étude ?
Principaux critères de jugement
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
|
Développement d'embryons normaux
Délai: Jour 1 ou 18 heures après le retrait du noyau ICSI
|
À 18 heures après l'ICSi, le noyau doit être retiré afin d'effectuer une correction génétique pour les embryons anormalement développés. Le résultat final est des embryons normaux produits avec des 2PN évalués par l'étude FSIH pour 5 chromosomes. Cela indiquait que le processus de correction génétique était un processus réussi et applicable pour produire des embryons en croissance normale. |
Jour 1 ou 18 heures après le retrait du noyau ICSI
|
Mesures de résultats secondaires
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
|
Embryon du jour 3 disponible pour la biopsie de blastomère
Délai: 1 an
|
Disponibilité de l'élimination réussie du noyau du zygote à développer en embryon actif en division disponible pour l'étude cytogénétique. Cela indiquait un traitement normal de l'embryogenèse |
1 an
|
|
Étude FISH sur 5 chromosomes
Délai: 1 an
|
chromosomes 13, 18, 21, X et Y à cribler par hybridation in situ en fluorescence (FISH).
Afin de vérifier l'euploïde primaire développé avec des embryons mâles (XY) ou femelles (XX).
|
1 an
|
Autres mesures de résultats
Mesure des résultats |
Description de la mesure |
Délai |
|---|---|---|
|
Développement de blastocystes
Délai: Développement embryonnaire au jour 5 pour le stade blastocyste
|
disponibilité d'embryons à développer pour le jour 5, ce qui donne la possibilité d'une meilleure évaluation des cellules et de plus d'études génétiques et cytogénétiques.
|
Développement embryonnaire au jour 5 pour le stade blastocyste
|
Collaborateurs et enquêteurs
Parrainer
Les enquêteurs
- Chercheur principal: Ahmad M Metwalley, Al Baraka Fertility Hospital
Publications et liens utiles
Publications générales
- Jacobs PA, Angell RR, Buchanan IM, Hassold TJ, Matsuyama AM, Manuel B. The origin of human triploids. Ann Hum Genet. 1978 Jul;42(1):49-57. doi: 10.1111/j.1469-1809.1978.tb00930.x.
- Rosenbusch B. The potential significance of binovular follicles and binucleate giant oocytes for the development of genetic abnormalities. J Genet. 2012;91(3):397-404. doi: 10.1007/s12041-012-0195-x.
- Wolf DP, Mitalipov N, Mitalipov S. Mitochondrial replacement therapy in reproductive medicine. Trends Mol Med. 2015 Feb;21(2):68-76. doi: 10.1016/j.molmed.2014.12.001. Epub 2014 Dec 10.
- Vogel G. Assisted reproduction. FDA considers trials of 'three-parent embryos'. Science. 2014 Feb 21;343(6173):827-8. doi: 10.1126/science.343.6173.827. No abstract available.
- Amato P, Tachibana M, Sparman M, Mitalipov S. Three-parent in vitro fertilization: gene replacement for the prevention of inherited mitochondrial diseases. Fertil Steril. 2014 Jan;101(1):31-5. doi: 10.1016/j.fertnstert.2013.11.030.
Dates d'enregistrement des études
Dates principales de l'étude
Début de l'étude
Achèvement primaire (Réel)
Achèvement de l'étude (Réel)
Dates d'inscription aux études
Première soumission
Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité
Première publication (Estimation)
Mises à jour des dossiers d'étude
Dernière mise à jour publiée (Estimation)
Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité
Dernière vérification
Plus d'information
Termes liés à cette étude
Mots clés
Termes MeSH pertinents supplémentaires
Autres numéros d'identification d'étude
- AlBarakaSD3
Ces informations ont été extraites directement du site Web clinicaltrials.gov sans aucune modification. Si vous avez des demandes de modification, de suppression ou de mise à jour des détails de votre étude, veuillez contacter register@clinicaltrials.gov. Dès qu'un changement est mis en œuvre sur clinicaltrials.gov, il sera également mis à jour automatiquement sur notre site Web .