D-vitamiini ja kuolleisuus: yksittäisten osallistujien tietojen meta-analyysi standardoidusta 25-hydroksi-D-vitamiinista

D-vitamiini osallistuu kalsiumin homeostaasin säätelyyn ja vaikuttaa suotuisasti luuston terveyteen. Seerumin 25-hydroksi-D-vitamiinin (25[OH]D) pitoisuudet mitataan D-vitamiinin tilan arvioimiseksi, mikä määräytyy pääasiassa auringonvalon (ultravioletti-B) aiheuttaman D-vitamiinin tuotannon perusteella ihossa ja vähäisemmässä määrin ravinnon tai ravinnon perusteella. täydentävä D-vitamiinin saanti. Huono D-vitamiinistatus on noussut riskitekijäksi useille haitallisille terveysvaikutuksille, mukaan lukien kuolleisuus, mutta D-vitamiinistatuksen luokittelusta ja 25(OH)D-pitoisuuksien ja kuolleisuuden välisen yhteyden muodosta on kiistaa.

Nykyistä tietoa D-vitamiinin tilasta ja kuolleisuudesta rajoittaa laboratoriomenetelmien standardoinnin puuttuminen. Aiemmat tutkimukset ovat osoittaneet, että määritys- ja laboratorioeroilla on merkittävä vaikutus raportoituihin 25(OH)D-pitoisuuksiin ja siten 25(OH)D:n ja terveysvaikutusten väliseen yhteyteen. Siksi D-vitamiinin standardointiohjelma (VDSP), National Institutes of Health-Office of Dietary Supplements (NIH-ODS) johtama yhteistyöhanke, on kehittänyt protokollia nykyisten ja aiempien tutkimusten 25(OH)D-tietojen standardoimiseksi.

Tässä työssä, joka on osa EU-hanketta "Elintarvikepohjaiset ratkaisut D-vitamiinin puutteen poistamiseen ja terveyden edistämiseen koko elinkaaren ajan" (ODIN), pyrimme korjaamaan tietovajetta standardoitujen 25(OH) yhteyksistä. )D-pitoisuudet ja kuolleisuus yhteistoiminnallisessa meta-analyysissä, jossa käytetään yksittäisten osallistujien tietoja (IPD) kahdeksasta tutkimuskohortista eri puolilla Eurooppaa. Tutkimme yksityiskohtaisesti 25(OH)D:n assosiaatioita kaikista syistä, sydän- ja verisuonisairauksista sekä syöpäkuolleisuudesta. Käytämme tässä meta-analyysissä yksivaiheista lähestymistapaa, jonka etuna on, että kaikkien tutkimusten IPD mallinnetaan samanaikaisesti, kun taas perinteiset kaksivaiheiset lähestymistavat perustuvat kunkin yksittäisen tutkimuksen aggregoituihin tietoihin. Ottaen huomioon, että suurin osa tämän meta-analyysin yksittäisistä tutkimuksista on jo raportoinut alkuperäisistä 25(OH)D-tiedoista, pyrimme vertaamaan alkuperäisiä ja standardoituja 25(OH)D-pitoisuuksia raportoitujen pitoisuuksien eroista ja niiden yhteyksistä kuolleisuuteen.

Menetelmät TUTKIMUKSEN TUNNISTAMINEN JA VALINTA Loimme yhteistyön suorittaaksemme tämän IPD:n meta-analyysin. EU:n seitsemännen puiteohjelman ODIN-työpaketin potentiaaliset osallistujat kutsuttiin yhden päivän työpajaan Amsterdamiin marraskuussa 2012 keskustelemaan tehtävän tavoitteista, toteutuksesta ja kehittämisestä. Kutsutut eurooppalaiset osallistujat tunnistettiin äskettäin julkaistujen tietojen perusteella suurista mahdollisista D-vitamiiniryhmistä kuolleisuudesta ja sydän- ja verisuonisairauksista. Yksittäisten kohorttitutkimusten sisällyttämiselle ODINiin oli useita edellytyksiä: Tarvittiin laadukkaita biopankkinäytteitä yhtenäistä näytteenottoa ja valittujen näytteiden analysointia varten, validoituja prospektiivisia tietoja kliinisistä tuloksista, yhteistyöhalua ja alan asiantuntemusta.

TUTKIMUKSET JA OSALLISTUJAT Kaikki yksittäiset kohortit ovat osa ODIN-konsortiota. Käytämme IPD:tä kahdeksasta riippumattomasta tulevasta kohorttitutkimuksesta Norjasta, Saksasta, Tanskasta, Alankomaista ja Islannista. Mukana olevat tutkimukset ovat Tromssan tutkimuksen neljäs tutkimus, Ludwigshafenin riski- ja sydän- ja verisuoniterveystutkimus (LURIC), ikä-, geeni-/ympäristöalttius-Reykjavik-tutkimus (AGES), New Hoorn-tutkimus (NHS), Århusin mammografiakohorttitutkimus, Saksan aikuisten terveyshaastattelu- ja tutkimustutkimus (DEGS) ja Amsterdamin Longitudinal Study on Aging -tutkimuksen (LASA) vanhat ja nuoret kohortti. Kaikki kohorttitutkimukset suoritettiin Helsingin julistuksen mukaisesti ja kirjallinen tietoinen suostumus saatiin kaikilta tutkimukseen osallistuneilta.

25(OH)D:N MITTAUS VDSP-protokollan mukaisesti suoritamme näytteenottomenettelyn valitaksemme jokaisesta yksittäisestä kohorttitutkimuksesta 100-150 biopankkinäytteen osajoukon 25(OH)D:n uudelleenanalyysiä varten standardoidulla ja sertifioitu nestekromatografia-tandem-massaspektrometria (LC-tandem MS) -menetelmä, joka on jäljitettävissä Yhdysvaltain kansallisen standardointi- ja teknologiainstituutin (NIST) korkeamman asteen referenssimittausmenettelyyn. Uudelleen analysoituja 25(OH)D-arvoja käytetään pääregressioyhtälöiden kehittämiseen jokaiselle nykyiselle kohorttitutkimukselle ja olemassa olevien 25(OH)D-mittausten uudelleenkalibrointiin. NHS:llä ei ole aikaisempaa 25(OH)D-mittausta, ja se analysoidaan kokonaisuudessaan.

RYHMÄT IPD-populaatio jaetaan seitsemään ryhmään niiden 25(OH)D-statuksen mukaan. Yksilöt jaetaan johonkin seitsemästä alaryhmästä alkuperäisille ja standardoiduille 25(OH)D-mittauksille.

Lääketieteen instituutin (IOM) vuoden 2011 raportin mukaan 25(OH)D-ryhmän raja-arvot määritellään vakavasti D-vitamiinin puutteellisiksi (≤29•99 nmol/L) kahdeksi potilasryhmäksi, joilla on riittämättömyyden riski (alkaen 30 ≤ 39•99 nmol/L ja 40 - ≤ 49•99 nmol/L), koska D-vitamiini riittää (50 - ≤ 75 nmol/L), kahtena D-vitamiinitasoryhmänä, jotka eivät johdonmukaisesti liity lisääntyneeseen hyötyyn. (75 - ≤ 99•99 nmol/L; 100 - ≤ 124•99 nmol/L) ja yhtä korkeat D-vitamiinipitoisuudet huolestuttavana (≥ 125 nmol/L; muuntaa nmol/l ng/ml-jakoiksi kirjoittaja 2•496).

TILASTOINEN ANALYYSI Erot alkuperäisten ja standardisoitujen 25(OH)D-pitoisuuksien välillä arvioidaan parinäytteen t-testillä. Muiden perusominaisuuksien vertailua varten standardoitujen D-vitamiiniryhmien välillä käytämme ANOVAa jatkuvaan ja χ2-testiä kategorisille tiedoille tarpeen mukaan.

Kaikista syistä johtuva kuolleisuus on ensisijainen tulos, ja se on saatavilla kaikissa osallistuvissa kohorttitutkimuksissa. Toissijaisia ​​tuloksia ovat kardiovaskulaarinen kuolleisuus ja syöpäkuolleisuus, ja ne ovat saatavilla kaikissa kohorttitutkimuksissa paitsi NHS:ssä. Kaikki päätepisteet etsittiin mahdollisimman yksityiskohtaisesti kuolintodistuksista, kunnallisista rekistereistä, potilaskertomuksista ja paikallisista viranomaisista.

Kaikki tulosanalyysit tehdään alkuperäisille ja standardoiduille 25(OH)D-arvoille IPD-meta-analyysin arvioiden ja tutkimuskohtaisten arvioiden avulla. Analyysit perustuvat henkilöihin, joilla on täydelliset tiedot iästä, sukupuolesta, painoindeksistä (BMI), verinäytteenottokaudesta, 25(OH)D-tasoista, vitaalitilasta seurannassa ja seuranta-ajasta. Seurantaajan on oltava > 0 päivää. Osallistujat, joiden tiedot puuttuvat, suljetaan pois analyysistä, emmekä suorita tietojen imputointia.

25(OH)D-tason ja kokonaiskuolleisuuden väliset yhteydet arvioidaan käyttämällä IPD:tä yksivaiheisessa lähestymistavassa. Yleisesti ottaen yksivaiheista menettelyä noudattavien IPD-meta-analyysien osoitettiin olevan tiiviimpi lähestymistapa binäärituloksiin verrattuna usein käytettyyn kaksivaiheiseen lähestymistapaan, jos aggregoituja tietoja analysoidaan. Käytämme hierarkkista, parametrista selviytymismallia, joka on Cox-malliin verrattuna toteuttamiskelpoisempi binääritulosten analysoinnissa. Yksittäinen yhtälö käsitellään parametrisella, kiihdytetyllä vikaaika- (AFT) Weibull-mallilla, joka näytti sopivan parhaiten taustalla oleviin tietoihin eksponentiaalista, log-logistista ja log-normaalijakaumaa vastaan. Malli rakennetaan käyttämällä SAS PROC NLMIXEDiä (SAS Institute Inc., 100 SAS Campus Drive, Cary, USA) ja satunnaista sieppausta, jotta voidaan ottaa huomioon satunnaiset vaikutukset kohorttitutkimuksissa.

Kuolleisuusanalyyseja varten 25(OH)D mallinnetaan käyttämällä 1) perinteistä kategoriallista muuttujamenetelmää, jossa ryhmät ovat aiemmin mainitun IOM-luokituksen mukaisia, ja 2) rajoitettua kuutiospline-lähestymistapaa. Kuutiospline-lähestymistapa valittiin säilyttämään 25(OH)D-arvojen jatkuva luonne ja laskemaan vaarasuhteet (HRs) 95 %:n luottamusvälillä (CI) kunkin ryhmän keskiarvolla. Valitsimme vertailuksi 25(OH)D-ryhmän, jolla on pienin kuolleisuusriski. Tulosanalyysimme korjataan kumulatiivisesti kuolleisuuden riskitekijöiden ja D-vitamiinistatuksen määräävien tekijöiden mukaan. Mallissa 1 säädämme iän (vuosina), sukupuolen (mies/nainen) ja verenkeräyskauden (kevät, kesä, syksy, talvi) mukaan. Mallissa 2, päätilastomallissamme, säädämme lisäksi BMI:tä (kg/m²). Mallissa 3 sopeutamme lisäksi diabetes mellituksen (kyllä/ei) ja verenpainetaudin (kyllä/ei), ja malliin 4 lisäämme syövän historian (kyllä/ei), sydän- ja verisuonitautien historian (kyllä/ei) ja nykyisen. tupakoinnin tila yhteismuuttujina (kyllä/ei).

Lisäsäätöjen mallina on malli kaksi. Muita mukauttavia kovariaatteja ei ole saatavilla jokaisessa kohorttitutkimuksessa, joten lisäsäätöjä tehdään vain tutkimuksissa, jotka voivat tarjota kyseiset kovariaatit.

Ensinnäkin kalsiumin lisäsaanti (kyllä/ei) lisätään malliin kaksi. Ensimmäinen lisäsäätöanalyysi tehdään kaikissa tutkimuksissa, mutta DEGS ja LASA, nuori kohortti, koska lisäkäytöstä ei ole tietoa.

Toiseksi D-vitamiinin lisäsaanti (kyllä/ei) lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi LASA, vanha ja nuori kohortti ja DEGS, koska näissä tutkimuksissa ei ole saatavilla tietoja D-vitamiinin lisäkäytöstä.

Kolmanneksi mallin kaksi lisäsäätöä fyysiselle aktiivisuudelle (kolme valemuuttujaa alhaiselle, keskisuurelle ja korkealle fyysiselle aktiivisuudelle) käsitellään kaikissa tutkimuksissa paitsi Århusin mammografiakohortissa. Herkkyysanalyysissä jätämme myös DEGS:t pois, sillä DEGS:n osallistujissa on suuri osuus nuorista, fyysisesti aktiivisista yksilöistä.

Neljänneksi malliin 2 lisätään arvioitu glomerulussuodatusnopeus (eGFR; ml/min/1•73m²). eGFR lasketaan kreatiniinista lähtötilanteessa munuaissairauden ruokavalion muuttaminen (MDRD) -tutkimusyhtälön mukaisesti, ja se lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi NHS:ssä, koska kreatiniinimittauksia ei ole saatavilla NHS:ssä.

Viidennessä analyysissä lisäkilpirauhashormonin säätö (pmol/l) lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi NHS:ssä, Århusin mammografiakohortissa ja LASA:ssa, nuori kohortti.

Kuudennessa analyysissä C-reaktiivisen proteiinin säätö (mg/l) lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi NHS:ssä, Aarhusin mammografiakohortissa ja LASA:ssa, nuori kohortti.

Seitsemännessä analyysissä systolisen verenpaineen säätö (mm Hg) lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi Aarhusin mammografiakohortissa ja DEGS:ssä.

Kahdeksannessa analyysissä pienitiheyksisen lipoproteiinikolesterolin säätö (mmol/l) lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi Aarhusin mammografiakohortissa ja DEGS:ssä.

Yhdeksännessä analyysissä glukoosin säätö (mmol/l) lisätään malliin kaksi kaikissa tutkimuksissa paitsi Tromssan tutkimuksessa, Aarhusin mammografiakohortissa ja DEGS:ssä.

Kaikki mallit alkuperäisellä 25(OH)D:llä suoritetaan ilman NHS:ää, koska NHS:llä ei ollut alkuperäisiä 25(OH)D-mittauksia. Standardoidulle 25(OH)D:lle laskemme kaikki mallit 1) NHS:n tiedoilla ja 2) ilman NHS:n tietoja, jotta saadaan vertailukelpoisia tuloksia alkuperäisten ja standardoitujen 25(OH)D-mittausten mallien välillä.

Herkkyysanalyysit Tehdään alaryhmäanalyysit D-vitamiinin puutteen ja kuolleisuuden riskitekijöiden osistamiseksi. Kerroimme yksityiskohtaisesti sukupuolen (naiset/miehet), ikäryhmien (<60-vuotiaat; 60-69•9-vuotiaat; 70+ vuotta), BMI-ryhmien (<25 kg/m²; 25<30 kg/m²; ≥30 kg) mukaan. /m²), kalsiumlisä (kyllä/ei), D-vitamiinilisä (kyllä/ei), sydän- ja verisuonitauti (kyllä/ei) ja syöpähistoria (kyllä/ei). Lisäherkkyysanalyysi rajoittuu henkilöihin, jotka kuolivat > 1 vuoden ja > 3 vuoden kuluttua perustutkimuksesta ja rajoittuvat yleisiin väestöryhmiin (ts. kaikki kohortit paitsi LURIC).

Toissijaiset tulokset Sydän- ja verisuoni- ja syöpäkuolleisuuden toissijaisten tulosten arvioimiseksi käytämme perinteisiä Coxin suhteellisia riskejä ja modifioituja riskien regressiota Fine and Gray -menetelmän mukaisesti kilpailevien riskien huomioon ottamiseksi. Lyhyesti sanottuna suhteelliset vaarat eivät välttämättä täyty monikeskusasetuksissa, joten lähtötason vaarat voivat vaihdella yksittäisten kohorttitutkimusten välillä.