Tämä sivu käännettiin automaattisesti, eikä käännösten tarkkuutta voida taata. Katso englanninkielinen versio lähdetekstiä varten.

Sulforafaanihoito lapsille, joilla on autismispektrihäiriö (ASD)

tiistai 15. joulukuuta 2020 päivittänyt: Andrew Zimmerman, University of Massachusetts, Worcester

ASD on monipuolinen häiriö, joka alkaa varhaislapsuudessa ja jolle on ominaista sosiaalisen kommunikoinnin heikkeneminen sekä rajoitetut kiinnostuksen kohteet ja toistuva käyttäytyminen. Se vaikuttaa 1:68 lapsiin ja on valtava lääketieteellinen ja taloudellinen ongelma, jolle ei ole vakiintunutta, mekanismiin perustuvaa hoitoa. Sulforafaani on isotiosyanaatti, joka on johdettu parsakaalista, ja sillä on voimakasta aktiivisuutta transkriptiota lisäävissä geeneissä, jotka säätelevät mekanismeja, joilla aerobiset solut suojaavat itseään oksidatiiviselta stressiltä, ​​mitokondrioiden toimintahäiriöiltä ja tulehdukselta.

Tämä tutkimus on kliininen koe suun kautta annettavasta sulforafaanista (parsakaalinsiemenjauheena) 50 pojalla ja tytöllä (3-12 vuotta), joilla oli ASD kolmessa vaiheessa 36 viikon ajan. Vaiheessa 1 25 lasta saa aktiivista lääkettä ja 25 lumelääkettä 15 viikon ajan; Vaiheessa 2 kaikki lapset saavat sulforafaania 15–30 viikon iässä; Vaiheessa 3 lapset eivät saa hoitoa 6 viikkoon. Opintokäynnit tehdään seulonnalla 7, 15, 22, 30 ja 36 viikolla, jolloin Ohio Autism Clinical Clinical Impressions Scale - vakavuus ja paraneminen (OACIS-S ja OACIS-I), poikkeavan käyttäytymisen tarkistuslista (ABC) ja sosiaalinen reagointikyky. Asteikko (SRS) tallennetaan. Lapsia seurataan fyysisin tutkimuksin ja toksisuuden varalta kliinisillä laboratoriotutkimuksilla ja mahdollisia biomarkkereita: ydintekijä-erytroiditekijä 2 (Nrf2), oksidatiivinen stressi ja mitokondrioiden toiminta, rapamysiinireitin (mTOR) mekaaninen kohde ja sytokiinien ilmentyminen. Lisäksi ennen kliinistä päätutkimusta tehdään pilottitutkimus 10:llä ASD:tä sairastavalla 6-12-vuotiaalla lapsella, jotka saavat sulforafaania 2,2 mikromoolia/kg päivittäin 14 päivän ajan. Veri- ja virtsanäytteitä kerätään ennen hoitoa ja sen lopussa, jotta voidaan mitata useita parametreja, jotka todennäköisesti osoittavat sulforafaanin odotetut vaikutukset, standardisoida määritykset ja menettelyt sekä määrittää tehokkaimmat toimenpiteet.

Tutkimuksen yleiskatsaus

Tila

Valmis

Ehdot

Interventio / Hoito

Yksityiskohtainen kuvaus

Tausta: ASD on monipuolinen häiriö, joka alkaa varhaislapsuudessa ja jolle on ominaista sosiaalisen kommunikoinnin heikkeneminen sekä rajoitetut kiinnostuksen kohteet ja toistuva käyttäytyminen. Se vaikuttaa 1:68 lapsiin ja on valtava lääketieteellinen ja taloudellinen ongelma, jolle ei ole vakiintunutta, mekanismiin perustuvaa hoitoa. Sulforafaani on isotiosyanaatti, joka on johdettu parsakaalista, ja sillä on voimakasta aktiivisuutta transkriptiota lisäävissä geeneissä, jotka säätelevät mekanismeja, joilla aerobiset solut suojaavat itseään oksidatiiviselta stressiltä, ​​mitokondrioiden toimintahäiriöiltä ja tulehdukselta.

Hypoteesi: Perustuen havaintoon, että kuume liittyy usein käytöksen paranemiseen ASD:tä sairastavilla lapsilla, oletetaan, että sulforafaani saattaa johtaa ASD:n toiminnallisiin parannuksiin, koska se voi nostaa soluja suojaavia vasteita, kuten lämpöshokkiproteiineja ja niihin liittyviä mekanismeja. jotka myös säätyvät kuumeen aikana. Nämä mekanismit ovat keskeisiä useille soluprosesseille keskushermostossa, mukaan lukien synaptinen transmissio, ja voivat parantaa pitkän kantaman aivokuoren yhteyksiä, jotka ovat masentuneita ASD:ssä.

Erityiset tavoitteet: Tämän tutkimuksen 3 erityistä tavoitetta ovat: 1) Määrittää, onko mitattavissa olevia vaikutuksia sosiaaliseen reagointikykyyn ja ongelmakäyttäytymiseen sulforafaania hoidettaessa lapsia; 2) Selvittää, onko sulforafaanihoito lapsilla turvallista ja hyvin siedetty; ja 3) Selvittää solujen biomarkkereita, jotka reagoivat sulforafaanihoitoon.

Suunnittelu: Tämä on satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, yhden käden risteytysvaiheen 1/2 kliininen tutkimus suun kautta annetusta sulforafaanista (parsakaalin siemenjauheena) 50 pojalle ja tytölle (3–12-vuotiaille), joilla oli ASD kolmessa vaiheessa 36 viikon ajan.

Vaiheessa 1 25 lasta saa aktiivista lääkettä ja 25 lumelääkettä 15 viikon ajan; Vaiheessa 2 kaikki lapset saavat sulforafaania 15–30 viikon iässä; Vaiheessa 3 lapset eivät saa hoitoa 6 viikkoon. Opintokäynnit tehdään seulonnalla 7, 15, 22, 30 ja 36 viikolla, jolloin Ohio Autism Clinical Clinical Impressions Scale - vakavuus ja paraneminen (OACIS-S ja OACIS-I), poikkeavan käyttäytymisen tarkistuslista (ABC) ja sosiaalinen reagointikyky. Asteikko (SRS) tallennetaan.

Lapsia seurataan fyysisillä tutkimuksilla ja toksisuuden varalta kliinisillä laboratoriotutkimuksilla ja mahdollisia biomarkkereita: Nrf2, oksidatiivista stressiä ja mitokondrioiden toimintaa, mTOR-reittiä ja sytokiinien ilmentymistä.

Lisäksi ennen kliinistä päätutkimusta tehdään pilottitutkimus 10 ASD-lapselle, 6-12-vuotiaille, jotka saavat sulforafaania, 2,2 mikromoolia/kg päivittäin 14 päivän ajan. Veri- ja virtsanäytteitä kerätään ennen hoitoa ja sen lopussa, jotta voidaan mitata useita parametreja, jotka todennäköisesti osoittavat sulforafaanin odotetut vaikutukset, standardisoida määritykset ja menettelyt sekä määrittää tehokkaimmat toimenpiteet.

Opintotyyppi

Interventio

Ilmoittautuminen (Todellinen)

60

Vaihe

  • Vaihe 2
  • Vaihe 1

Yhteystiedot ja paikat

Tässä osiossa on tutkimuksen suorittajien yhteystiedot ja tiedot siitä, missä tämä tutkimus suoritetaan.

Opiskelupaikat

  • Yhdysvallat
    • Massachusetts
      • Worcester, Massachusetts, Yhdysvallat, 01655
        • University of Massachusetts Medical School

Osallistumiskriteerit

Tutkijat etsivät ihmisiä, jotka sopivat tiettyyn kuvaukseen, jota kutsutaan kelpoisuuskriteereiksi. Joitakin esimerkkejä näistä kriteereistä ovat henkilön yleinen terveydentila tai aiemmat hoidot.

Kelpoisuusvaatimukset

Opintokelpoiset iät

3 vuotta - 12 vuotta (Lapsi)

Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia

Ei

Sukupuolet, jotka voivat opiskella

Kaikki

Kuvaus

Sisällyttämiskriteerit:

  • Autismispektrihäiriön (ASD) diagnoosi, joka on kohtalainen tai vakavampi
  • Ikä 3-12 vuotta mukaan lukien

Poissulkemiskriteerit:

  • Vanhemman tai laillisen huoltajan poissaolo ja suostumus
  • Kyvyttömyys puhua/ymmärtää englantia
  • Kohtaukset vuoden sisällä seulonnasta: Tämä poissulkeminen perustuu teoreettiseen huoleen, että sulforafaanin aiheuttama soluaktivaatio saattaa pahentaa kouristuskohtauksia potilailla, joilla on tunnetusti kohtaushäiriöitä. Kuten edellisessä sulforafaania koskeneessa nuorilla aikuisilla miehillä tehdyssä tutkimuksessamme todettiin, kohtaus ilmeni jokaisessa kahdesta osallistujasta: yksi hoidon aikana (osallistujalla, jolla oli aiemmin paljastamaton kohtaus), toinen 3 viikkoa sulforafaanin lopettamisen jälkeen.
  • Heikentynyt munuaisten toiminta (seerumin kreatiniini > 1,2 mg/dl), heikentynyt maksan toiminta (SGOT/SGPT> 2x normaalin yläraja), heikentynyt kilpirauhasen toiminta (Tyroid Stimulating Hormone (TSH) normaalirajojen ulkopuolella): Tämä poissulkeminen perustuu teoreettiseen mahdollista, että sulforafaani aktivoi taustalla olevia solujen aineenvaihduntahäiriöitä. Nykyinen infektio tai antibioottihoito: tämän poissulkemisen tarkoituksena on välttää toistuvien sairauksien komplikaatiot, joita saattaa ilmetä kliinisestä tutkimuksesta tai sulforafaanin mahdollisista vaikutuksista johtuen.
  • Lääkkeet, jotka voivat muuttaa ASD-parametrien kulkua tai testausta (esim. prednisoni): Tämä poissulkeminen on välttämätöntä, jotta sulforafaanin vaikutuksia ei häiritä tai vaikeuteta.
  • Krooninen sairaus (esim. sydän- ja verisuonisairaus, aivohalvaus tai diabetes) tai suuri leikkaus 3 kuukauden sisällä ennen ilmoittautumista: Kliininen tutkimus voi monimutkaistaa lapsen vakavaa lääketieteellistä sairautta ja vaikeuttaa hoitoon liittyvän ASD:n muutoksen havaitsemista.
  • Alle 3-vuotiaat tai yli 13-vuotiaat: tämä ikäryhmä valittiin kattamaan iät tavallisesta ASD-diagnoosista murrosikään asti.
  • Diagnoosi lievän vaikeusasteisen autismikirjon häiriöstä (esimerkiksi aiemmat Asperger-häiriökategoriat, Pervasive Developmental Disorder - Not Other Specified (PDD-NOS)) Autism Diagnostic Observation Schedule (ADOS) -kriteerien mukaisesti.
  • vangit
  • Raskaana olevat naiset

Opintosuunnitelma

Tässä osiossa on tietoja tutkimussuunnitelmasta, mukaan lukien kuinka tutkimus on suunniteltu ja mitä tutkimuksella mitataan.

Miten tutkimus on suunniteltu?

Suunnittelun yksityiskohdat

  • Ensisijainen käyttötarkoitus: Hoito
  • Jako: Satunnaistettu
  • Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
  • Naamiointi: Nelinkertaistaa

Aseet ja interventiot

Osallistujaryhmä / Arm
Interventio / Hoito
Active Comparator: Sulforafaani

Sulforafaania (SF) annetaan kerran päivässä suun kautta suunnilleen annoksella 1 µmol/lb (2,2 kg µmol/kg). Jokainen SF-tabletti sisältää 125 mg parsakaalin siemenjauhetta (vastaa ~ 15 µmol SF). Kokonaisannos päivässä riippuu osallistujien painosta:

30-50 lb: 3 tablettia (45 µmol/vrk) 50-70 lb: 4 tablettia (60 µmol/vrk) 70-90 lb: 6 tablettia (90 µmol/vrk) 90-110 µmol: 7 tablettia (105 µmol/vrk) päivä) 110-130 lb: 8 tablettia (120 µmol/vrk)

Pilottitutkimuksessa kaikki osallistujat (n=10) saavat SF:n 14 päivän ajan. Päätutkimuksessa 25 osallistujaa saa satunnaisesti SF:tä 15 viikon ajan (vaihe 1). Vaiheen 2 aikana yksihaarainen vaihto lumelääkkeestä sulforafaanihaaraan, ja kaikki osallistujat saavat SF:ää 15–30 viikon iässä.
Lääke: Sulforafaani
Katso aktiivisen käsivarren kuvauksesta
Placebo Comparator: Plasebo

Käytetään lumetabletteja, jotka ovat kooltaan ja ulkonäöltään samanlaisia ​​kuin aktiiviset tabletit. Lumetablettien määrä vastaa aktiivisia tabletteja osallistujien ruumiinpainosta riippuen.

Kliinisen päätutkimuksen osalta 25 osallistujaa jaetaan satunnaisesti saamaan lumelääkettä 15 viikon ajan (vaihe 1). Vaiheen 2 aikana yksihaarainen vaihto lumeryhmästä sulforafaanihaaraan tapahtuu, ja kaikki osallistujat saavat sulforafaania viikoittain 15–30.
Lääke: Plasebo
Katso lumelääkekäsivarren kuvaus

Mitä tutkimuksessa mitataan?

Ensisijaiset tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
Muutos Ohion autismin kliinisten näyttökertojen asteikossa – parannus (OACIS-I) keskimääräinen pistemäärä lähtötasosta
Aikaikkuna: 7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Ohio Autism Clinical Impressions Scale-Severity (OACIS-S) arvioi oireiden vakavuuden 10 kategoriassa: autismin yleinen taso, sosiaalinen vuorovaikutus, poikkeava ja toistuva käyttäytyminen, verbaalinen ja ei-verbaalinen kommunikaatio, hyperaktiivisuus, ahdistuneisuus, aistiherkkyys sekä rajoitetut ja kapeat kiinnostuksen kohteet. . Jokainen luokka on arvioitu 1:stä (normaali) 7:ään (vakavin). OACIS-S oli viite seurantakäynneillä, kun OACIS-parannusta verrattiin OACIS-S:ään, 1-7: 4 ei ollut muutosta; 3-1 minimaalisesta huomattavaan parantumiseen ja 5-7 minimaalisesta huomattavaan huononemiseen. OACIS-S:n numeerinen pistemäärä on riippumaton eikä kvantitatiivisesti liity OACIS-I:een. Analyysia varten OACIS-I:n yleispisteet ja alaskaalan arvot koodattiin uudelleen, jolloin 4 (ei muutosta) koodattiin uudelleen 0:ksi; 3:sta 1:een merkittiin uudelleen +1:stä +3:ksi parannusta ja 5:stä 7 merkittiin uudelleen -1:stä -3:ksi huononemisen vuoksi.
7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa

Toissijaiset tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
OACIS-I:n vasteprosentti poikkeavien käytösten alaskaalalla
Aikaikkuna: 7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Katso OACIS-I-asteikon kuvaus yllä ensisijaisesta tulosmittauksesta. Tässä osiossa kuvataan poikkeavien toimintojen OACIS-I-aliverkkotunnuksen muutos lähtötasosta. Tämän aliverkkotunnuksen vaihteluväli on 1–7 – 1 on erittäin parantunut lähtötasosta, 7 on erittäin huonompi lähtötasosta ja 4 ei ole muutosta. Analyysia varten OACIS-I:n yleispisteet ja alaskaalan arvot koodattiin uudelleen, jolloin 4 (ei muutosta) koodattiin uudelleen 0:ksi; 3:sta 1:een merkittiin uudelleen +1:stä +3:ksi parannusta ja 5:stä 7 merkittiin uudelleen -1:stä -3:ksi huononemisen vuoksi.
7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
OACIS-I-vastausprosentti sosiaalisen viestinnän alaasteikolla
Aikaikkuna: 7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Katso OACIS-I-asteikon kuvaus yllä ensisijaisesta tulosmittauksesta. Tässä osiossa kuvataan muutos sosiaalisen viestinnän OACIS-I-aliverkkotunnuksen perustasosta. Tämän aliverkkotunnuksen vaihteluväli on 1–7 – 1 on erittäin parantunut lähtötasosta, 7 on erittäin huonompi lähtötasosta ja 4 ei ole muutosta. Analyysia varten OACIS-I:n yleispisteet ja alaskaalan arvot koodattiin uudelleen, jolloin 4 (ei muutosta) koodattiin uudelleen 0:ksi; 3:sta 1:een merkittiin uudelleen +1:stä +3:ksi parannusta ja 5:stä 7 merkittiin uudelleen -1:stä -3:ksi huononemisen vuoksi.
7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Muutos poikkeavan käyttäytymisen tarkistuslistan pisteissä lähtötasosta
Aikaikkuna: 7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Aberrant Behavior Checklist (ABC) on 58 kohdan asteikko, joka ensisijaisesti arvioi, kuinka poikkeavia tai epänormaalia potilaan päivittäinen käyttäytyminen on. Kohteet arvioivat käyttäytymistä, koska ne liittyvät ärtyneisyyteen, letargiaan/sosiaaliseen vetäytymiseen, stereotyyppiseen käyttäytymiseen, yliaktiivisuuteen/sopimattomuuteen ja sopimattomaan puheeseen. Jokainen kohta pisteytetään asteikolla 0-3, jossa 0 on parempi tulos ja 3 huonompi tulos. Kunkin kohteen pisteet lasketaan yhteen kokonaispistemäärän laskemiseksi. Tämä tulos kuvaa muutosta kokonais-ABC-pisteissä lähtötasosta kullakin seurantakäynnillä. Kaikkien kohteiden pisteet lasketaan yhteen kokonaispistemäärän laskemiseksi (0 - 174). Tämä tulos kuvaa muutosta kokonais-ABC-pisteissä lähtötasosta kullakin seurantakäynnillä.
7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Muutos SRS-2-kokonaispisteissä lähtötasosta
Aikaikkuna: 7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Social Responsiveness Scale-2 (SRS-2) on 65 pisteen asteikko, joka mittaa kokonaispisteitä sekä ala-asteikkoja: neljä sosiaalista käyttäytymistä (tietoisuus, kognitio, kommunikaatio ja motivaatio) ja autistisia tapoja. Jokainen kohde on arvioitu 1–4 (ei tosi - melkein aina tosi) laskentataulukoilla, jotka on sokaistettu arvioijalta arvojen suhteen. Kokonais- ja alapistemäärät lasketaan raakapisteinä ja ne voidaan muuntaa T-pisteiksi. Raakapisteet (vaihteluväli 0-180) raportoidaan tässä (korjaamatta yleiseen väestöön, koska kaikilla lapsilla oli ASD). Korkeammat tai pienemmät arvot seurantakäynneillä lähtötasoon verrattuna osoittivat vastaavasti pahenemista tai paranemista.
7 viikkoa, 15 viikkoa, 22 viikkoa, 30 viikkoa, 36 viikkoa
Ditiokarbamaattiplasman pitoisuus, joka havaitaan syklokondensaatiolla jokaisella käynnillä
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 7, viikko 15, viikko 22, viikko 30, viikko 36
Sulforafaani (ja muut isotiosyanaatit, ITC) konjugoituu glutationilla (GSH), joka sitten käy läpi lisäentsymaattisia modifikaatioita, jolloin syntyy peräkkäin kysteinyyliglysiini-, kysteiini- ja N-asetyylikysteiini-ITC-konjugaatteja, jotka kaikki ovat ditiokarbamaatteja ja ovat (DTC) havaittiin syklokondensaatioreaktio-HPLC-määrityksessä.
Viikko 0, viikko 7, viikko 15, viikko 22, viikko 30, viikko 36
Vapaan pelkistetyn glutationin (GSH), kokonais-GSH:n ja hapetetun glutationin (GSSG) vertailu viikoilla 0 ja 15
Aikaikkuna: Viikko 0 ja viikko 15
F-tilasto, joka on laskettu vertaamalla vapaata vähentynyttä GSH:ta, kokonais-GSH:ta ja hapetettua glutationia (GSSG) viikolta 15 viikolle 0.
Viikko 0 ja viikko 15
Ilmaiset GSH:GSSG- ja kokonais-GSH:GSSG-suhteet viikolla 15
Aikaikkuna: Viikko 15
Vapaan GSH:GSSG:n ja kokonais-GSH:GSSG:n suhteet laskettiin hankkimalla f-tilastopisteiden suhteet lähtötilanteesta viikkoon 15 vapaan vähennetyn GSH:n ja GSSG:n sekä kokonais-GSH:n ja GSSG:n välillä.
Viikko 15

Muut tulostoimenpiteet

Tulosmittaus
Toimenpiteen kuvaus
Aikaikkuna
NQO1: NAD(P)H: kinonioksidoreduktaasi-1
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
Sytoprotektiivinen entsyymi, jota säätelee ydintekijä erytroidi 2:een liittyvä tekijä 2 (Nrf2), joka on solujen redox-homeostaasin pääsäätelijä ja keskeisen tulehdusreitin estäjä, jonka molemmat toiminnot ovat kriittisiä tekijöitä ASD:n neuropatologiassa. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
xCT
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
xCT (SLC7A11): SLC7A11-geenin koodaama kystiini/glutamaattiantiportteri. Solun kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja komplementaariset DNA:t (cDNA) syntetisoitiin. Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
HO-1 (hemioksigenaasi 1)
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
HO-1 (hemi oksigenaasi 1): olennainen ja Nrf2-riippuvainen entsyymi hemin kataboliassa. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
HSP70
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
HSP70 (lämpösokkiproteiini 70) tutkittiin, koska SF lisää sitä in vitro. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
HSP27
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30.
HSP27:ää (lämpösokkiproteiini 27) tutkittiin, koska SF lisää sitä in vitro. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30.
IL-6
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
IL-6 (interleukiini 6) sytokiinigeenin ilmentyminen, ydintekijä-kappa B:n säätelemä tulehduksellinen biomarkkeri. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
IL-1p
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
IL-1β: Interleukiini-1-beetasytokiinigeenin ilmentyminen, ydintekijä-kappa B -säädelty tulehduksellinen biomarkkeri. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
Cox-2
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
Cox-2 (syklo-oksigenaasi-2): ydintekijä-kappa B -säädelty tulehduksellinen biomarkkeri. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30
TNF-a
Aikaikkuna: Viikko 0, viikko 15, viikko 30
TNF-α (tuumorinekroositekijä alfa), sytokiini tulehduksellisena biomarkkerina. Solujen kokonais-RNA eristettiin perifeerisen veren mononukleaarisista soluista (PBMC:t) ja syntetisoitiin komplementaariset DNA:t (cDNA). Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR-analyysi suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems QuantStudio™ 3 Real-Time PCR System -järjestelmää (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Suhteellinen mRNA:n ilmentyminen normalisoitiin GAPDH:ksi. Geeniekspressio laskettiin käyttämällä vertailevaa 2-ΔΔCT-menetelmää.
Viikko 0, viikko 15, viikko 30

Yhteistyökumppanit ja tutkijat

Täältä löydät tähän tutkimukseen osallistuvat ihmiset ja organisaatiot.

Sponsori

University of Massachusetts, Worcester

Yhteistyökumppanit

Johns Hopkins University
Congressionally Directed Medical Research Programs

Tutkijat

  • Päätutkija: Andrew W Zimmerman, MD, University of Massachusetts, Worcester

Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä

Tutkimusta koskevien tietojen syöttämisestä vastaava henkilö toimittaa nämä julkaisut vapaaehtoisesti. Nämä voivat koskea mitä tahansa tutkimukseen liittyvää.

Yleiset julkaisut

Opintojen ennätyspäivät

Nämä päivämäärät seuraavat ClinicalTrials.gov-sivustolle lähetettyjen tutkimustietueiden ja yhteenvetojen edistymistä. National Library of Medicine (NLM) tarkistaa tutkimustiedot ja raportoidut tulokset varmistaakseen, että ne täyttävät tietyt laadunvalvontastandardit, ennen kuin ne julkaistaan ​​julkisella verkkosivustolla.

Opi tärkeimmät päivämäärät

Opiskelun aloitus (Todellinen)

Tiistai 1. joulukuuta 2015

Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)

Lauantai 1. joulukuuta 2018

Opintojen valmistuminen (Todellinen)

Keskiviikko 1. tammikuuta 2020

Opintoihin ilmoittautumispäivät

Ensimmäinen lähetetty

Torstai 24. syyskuuta 2015

Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit

Torstai 24. syyskuuta 2015

Ensimmäinen Lähetetty (Arvio)

Maanantai 28. syyskuuta 2015

Tutkimustietojen päivitykset

Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)

Torstai 17. joulukuuta 2020

Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit

Tiistai 15. joulukuuta 2020

Viimeksi vahvistettu

Tiistai 1. joulukuuta 2020

Lisää tietoa

Tähän tutkimukseen liittyvät termit

Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja

Muut tutkimustunnusnumerot

  • H00007832
  • AR140087 (Muu apuraha/rahoitusnumero: Congressionally Directed Medical Research Programs)

Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)

Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?

Ei

Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .

Tilaa