Multiple Donor Treg DLI vaikeaa tulenkestävää, kroonista GVHD:tä varten (TREG2015001)

Tutkittava toimenpide on kroonista GVHD:tä sairastavien potilaiden infuusio puhdistetuilla Treg-soluilla, jotka on saatu alkuperäisestä HSC-luovuttajasta (T reg DLI).

Treg-solut PUHDISTETAAN käyttämällä CliniMACS Plus -järjestelmiä CD8- ja CD19-positiivisten solujen poistamiseen ja rikastamiseen CD25-ilmentymistä varten. Treg-puhdistus suoritetaan GMP-menettelyn mukaisesti käyttämällä kliinistä laatua olevaa CLINI-MACS®-laitetta. Protokolla on kuvattu tarkemmin luvussa 3.5

Koko valmistusprosessi, mukaan lukien solujen kerääminen, kuljetus ja Treg-puhdistus, on validoitu.

nTreg:n valinnan toteutettavuus ihmisen ääreisverestä CliniMACS®-järjestelmän avulla on dokumentoitu aiemmin. Näissä tutkimuksissa CD8+- ja CD19+-soluja ei voitu havaita lopullisista verituotteista. CD4+CD25+CD127lo:ta ilmentävien solujen lopullinen pitoisuus oli keskimäärin 79 % (vaihteluväli 52-82 %) parannetulla CD25-rikastusmenettelyllä. Tämän protokollan on validoinut myös kaksi kumppanikeskusta Treg GENERATION CONSORTIUMissa, Liège ja Boston, ja tulokset täyttävät infuusion vapauttamiskriteerit. Näillä puhdistusmenetelmillä saatiin 0,98 - 2,93 x 10e6 Treg/kg. On huomionarvoista, että puhtausaste CD4+CD25+CD127- solujen suhteen vaihteli välillä 72,80 % - 93,90 %.

Euroopan lääkeviraston pitkälle kehitettyjen terapioiden komitean (CAT) 20. kesäkuuta 2014 julkaiseman "Reflection paper on Classification of Advanced therapy medicinetherapy" mukaan [EMA/CAT/600280/2010 Rev.1, rivit 118-131] Treg DLI:tä EI PIDÄ PIDÄTÄ SOLUHOIDON LÄÄKETUOTTEINA. Itse asiassa somaattisen soluterapian lääkkeellä tarkoitetaan biologista lääkettä, joka täyttää molemmat seuraavat kaksi ominaisuutta: a) sisältää soluja tai kudoksia tai koostuu niistä, joita on käsitelty merkittävästi siten, että biologiset ominaisuudet, fysiologiset toiminnot tai rakenteelliset ominaisuudet ovat merkityksellisiä aiotun kliinisen käyttö on muuttunut tai solujen tai kudosten, joita ei ole tarkoitettu käytettäväksi samoihin olennaisiin toimintoihin vastaanottajassa ja luovuttajassa, käyttöä varten; b) esitetään ihmisille ominaisuuksia tai sitä käytetään tai annetaan ihmisille sairauden hoitamiseksi, ehkäisemiseksi tai diagnosoimiseksi sen solujen tai kudosten farmakologisen, immunologisen tai metabolisen vaikutuksen kautta. Sovellettaessa a alakohtaa asetuksen (EY) N:o 1394/2007 liitteessä I lueteltuja käsittelyjä, mukaan lukien leikkaaminen, jauhaminen, muotoilu, sentrifugointi, liotus antibiootti- tai antimikrobisissa liuoksissa, sterilointi, säteilytys, solujen erottaminen, väkevöinti tai puhdistusta, suodatusta, lyofilisointia, pakastusta, kylmäsäilytystä ja lasitusta ei pidetä olennaisina käsittelyinä. Edellä luetellut menettelyt puhdistetun Treg-tuotteen valmistamiseksi EIVÄT TÄYTÄ olennaisen manipuloinnin määritelmää.

Lisäksi saman asiakirjan [rivit 286-306] mukaan T reg DLI TULISI PIDÄTTÄÄ HOMOLOGOISTA KÄYTTÖÄ varten annettuna. Itse asiassa, kuten "Kehittyneen terapian lääkehoidon luokittelua koskevassa pohdiskeluasiakirjassa" esitetään, soluja, jotka on kerätty ja erotettu yksinkertaisella valintamenetelmällä ja annettu uudelleen täyttämään sama olennainen tehtävä, pidetään yleensä homologisena käyttönä. Sama olennainen tehtävä solupopulaatiolle tarkoittaa, että soluja, jotka on poistettu alkuperäisestä ympäristöstään ihmiskehossa, käytetään säilyttämään alkuperäinen toiminta samassa anatomisessa tai histologisessa ympäristössä.

Siksi luovuttajapuhdistettujen T reg-solujen infuusiota SIIRTEETTYJÄ POTILAATILLE (T reg DLI) PITÄISI katsoa SIIRTO-OHJELMANA pikemminkin kuin ADVANCED THERAPY MEDICINAL -VALMISTEEN antamista.

Tutkimuksen tavoitteena on arvioida, ovatko luovuttajaperäisten puhdistettujen T-säätelysolujen (T reg DLI) useat infuusiot turvallisia potilailla, joilla on steroidirefraktorinen krooninen GVHD, ja voivatko ne indusoida GVHD:n kliinistä remissiota. Perustuen havaintoon T-säätelysolujen patofysiologisesta osallistumisesta krooniseen GVHD:hen, luovuttajan T-säätelysolujen adoptiivinen siirto näyttää toistettavammalta ja tehokkaammalta kuin niiden in vivo -laajeneminen lääkkeiden antamisen jälkeen.

Määritämme toteutettavuuden, myrkyllisyyden ja MTD:n; arvioida kliinistä vaikutusta ja vaikutusta Treg- ja Tcon-homeostaasiin; ja määrittää, voidaanko nämä vaikutukset ylläpitää ja missä määrin ne jatkuvat. Arvioimme myös hoitovasteen ennustajia, sekä kliinisiä (esim. potilas, sairaus, samanaikaiset aineet) että biologisia (esim. Treg:n laajenemisaste; Treg:Tcon-suhde; Treg-funktio).

1.1.2015 alkaen nykyinen KOKEILEEHDOTUS on saanut rahoitusta Euroopan unionin tutkimuksen ja innovoinnin puiteohjelmasta osana hanketta "Kudos- ja elinvaurioiden korjaaminen refraktaarisessa kroonisessa graft versus host -taudissa hematopoieettisten kantasolujen jälkeen siirto puhdistettujen allogeenisten luovuttajien säätelevien T-lymfosyyttien infuusion avulla" (lyhenne TREGeneration, koodi 643776). Hanke sisältää joukon ehdotuksia eri eurooppalaisilta instituutioilta (Lissabonan yliopisto, Liegen yliopisto, Regensburgin yliopisto ja Bolognan yliopisto), jotka kaikki tutkivat Treg DLI:n roolia kroonisen GVHD:n hoidossa. EUROOPAN KOMISSION kanssa allekirjoitettu AVUSTUSSOPIMUS on ehdotuksen liitteenä.