Множественный донорский Treg DLI при тяжелой рефрактерной хронической РТПХ (TREG2015001)

Исследуемая процедура представляет собой инфузию пациентам с хронической РТПХ очищенных Treg-клеток, полученных от исходного донора ГСК (T reg DLI).

Клетки T reg ОЧИЩАЮТСЯ с использованием систем CliniMACS Plus для истощения CD8 и CD19 положительных клеток и обогащения клеток, экспрессирующих CD25high. Очистка Treg будет проводиться в соответствии с процедурой GMP с использованием устройства CLINI-MACS® клинического класса. Протокол подробно описан в главе 3.5.

Весь производственный процесс, включая сбор клеток, транспортировку и очистку Treg, прошел валидацию.

Возможность выделения nTreg из периферической крови человека с использованием системы CliniMACS® была ранее задокументирована. В этих исследованиях клетки CD8+ и CD19+ не обнаруживались в конечных продуктах крови. Конечное содержание клеток, экспрессирующих CD4+CD25+CD127lo, составляло в среднем 79% (диапазон 52-82%) при улучшенной процедуре обогащения CD25. Этот протокол также был утвержден двумя центрами-партнерами Treg GENERATION CONSORTIUM, Льеж и Бостон, с результатами, которые соответствуют критериям выпуска для инфузий. Эти процедуры очистки давали от 0,98 до 2,93×106 Treg на кг. Примечательно, что степень чистоты в пересчете на клетки CD4+CD25+CD127- колебалась от 72,80% до 93,90%.

Согласно «Размышлению о классификации лекарственной терапии передовой терапии», опубликованному Комитетом передовой терапии (CAT) Европейского медицинского агентства 20 июня 2014 г. [EMA/CAT/600280/2010 Rev.1, строки 118-131] Treg DLI НЕ ДОЛЖЕН СЧИТАТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ ДЛЯ КЛЕТОЧНОЙ ТЕРАПИИ. Действительно, лекарственный препарат для соматической клеточной терапии означает биологический лекарственный препарат, который соответствует ОБЕИМ следующим двум характеристикам: (а) содержит или состоит из клеток или тканей, которые были подвергнуты существенным манипуляциям, так что биологические характеристики, физиологические функции или структурные свойства, соответствующие предполагаемому клиническому использование было изменено, или клетки или ткани, которые не предназначены для использования для одной и той же основной функции (функций) у реципиента и донора; (b) представлен как обладающий свойствами для людей, или используется или вводится людям с целью лечения, профилактики или диагностики заболевания посредством фармакологического, иммунологического или метаболического действия его клеток или тканей. Для целей пункта (а) манипуляции, перечисленные в Приложении I к Регламенту (ЕС) № 1394/2007, включая разрезание, измельчение, придание формы, центрифугирование, замачивание в растворах антибиотиков или противомикробных препаратов, стерилизацию, облучение, отделение клеток, концентрацию или очистка, фильтрация, лиофилизация, замораживание, криоконсервация и витрификация не считаются существенными манипуляциями. Перечисленные выше процедуры приготовления очищенного продукта T reg НЕ СООТВЕТСТВУЮТ определению существенной манипуляции.

Более того, согласно тому же документу [строки 286-306] T reg DLI ДОЛЖЕН СЧИТАТЬСЯ администрируемым для ГОМОЛОГИЧЕСКОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ. Действительно, как указано в «Размышлении о классификации усовершенствованной лекарственной терапии», клетки, собранные и выделенные с помощью простого метода отбора и повторно введенные для выполнения той же основной функции, обычно будут рассматриваться как гомологичное использование. Та же важная функция для клеточной популяции означает, что клетки, удаленные из их исходной среды в организме человека, используются для поддержания исходной функции в той же анатомической или гистологической среде.

Поэтому ИНФУЗИЮ донорских очищенных T reg-клеток БОЛЬНЫМ С ТРАНСПЛАНТИРОВАННЫМИ ПАЦИЕНТАМИ (T reg DLI) СЛЕДУЕТ рассматривать как ТРАНСПЛАНТАЦИЯ, а не введение ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРОДУКТА ДЛЯ ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ТЕРАПИИ.

Цель исследования — оценить, безопасны ли многократные инфузии донорских очищенных Т-регуляторных клеток (T reg DLI) у пациентов с хронической стероидорефрактерной РТПХ и могут ли они индуцировать клиническую ремиссию РТПХ. Основываясь на наблюдении за патофизиологическим участием Т-регуляторных клеток при хронической РТПХ, адоптивный перенос донорских Т-регуляторных клеток представляется более воспроизводимым и эффективным, чем их размножение in vivo после введения лекарств.

Мы определим осуществимость, токсичность и МПД; оценить клиническое воздействие и влияние на гомеостаз Treg и Tcon; и определить, могут ли эти эффекты сохраняться и в какой степени они сохраняются. Мы также оценим предикторы ответа на терапию, как клинические (например, пациент, заболевание, сопутствующие агенты), так и биологические (например, степень экспансии Treg; соотношение Treg:Tcon; функция Treg).

По состоянию на 01.01.2015 текущее ИСПЫТАТЕЛЬНОЕ ПРЕДЛОЖЕНИЕ получило финансирование Рамочной программы Европейского Союза по исследованиям и инновациям в рамках проекта под названием «Восстановление повреждений тканей и органов при рефрактерной хронической реакции «трансплантат против хозяина» после введения гемопоэтических стволовых клеток. трансплантация путем инфузии очищенных аллогенных донорских регуляторных Т-лимфоцитов» (аббревиатура TREGeneration, код 643776). Проект включает ряд предложений от различных европейских институтов (Университет Лиссабона, Университет Льежа, Университет Регенсбурга и Университет Болоньи), все из которых исследуют роль Treg DLI в лечении хронической РТПХ. К заявке прилагается ДОГОВОР О ГРАНТЕ, подписанный с ЕВРОПЕЙСКОЙ КОМИССИЕЙ.