Treg DLI od více dárců pro těžkou refrakterní chronickou GVHD (TREG2015001)

Studovaným postupem je infuze pacientů s chronickou GVHD s purifikovanými Treg buňkami získanými od původního dárce HSC (T reg DLI).

Buňky T reg jsou ČIŠTĚNY pomocí systémů CliniMACS Plus Systems pro depleci CD8 a CD19 pozitivních buněk a obohacení pro expresi CD25high. Purifikace Treg bude provedena podle postupu GMP pomocí zařízení CLINI-MACS® klinické kvality. Protokol je podrobně popsán v kapitole 3.5

Celý výrobní proces včetně sklizně buněk, transportu a čištění Treg byl ověřen.

Proveditelnost selekce nTreg z lidské periferní krve pomocí systému CliniMACS® byla zdokumentována již dříve. V těchto studiích byly buňky CD8+ a CD19+ v konečných krevních produktech nedetekovatelné. Konečný obsah buněk exprimujících CD4+CD25+CD127lo byl v průměru 79 % (rozmezí 52-82 %) se zlepšeným postupem obohacení CD25. Tento protokol byl také ověřen dvěma partnerskými centry v KONSORTIU GENERACE Treg, Liège a Boston, s výsledky, které splňují kritéria pro uvolňování pro infuzi. Tyto postupy čištění poskytly mezi 0,98 a 2,93 x 10e6 Treg na kg. Je pozoruhodné, že stupeň čistoty buněk CD4+CD25+CD127- se pohyboval mezi 72,80 % a 93,90 %.

Podle "Úvahy o klasifikaci léčivé terapie pro moderní terapii", kterou zveřejnil Výbor pro pokročilé terapie (CAT) Evropské lékové agentury dne 20. června 2014 [EMA/CAT/600280/2010 Rev.1 řádky 118-131] Treg DLI BY NEMĚL BÝT POVAŽOVÁN ZA LÉČIVÉ PRODUKTY BUNĚČNÉ TERAPIE. Léčivým přípravkem pro somatobuněčnou terapii se skutečně rozumí biologický léčivý přípravek, který splňuje OBĚ následující dvě vlastnosti: a) obsahuje buňky nebo tkáně nebo se z nich skládá, které byly podrobeny podstatné manipulaci, takže biologické vlastnosti, fyziologické funkce nebo strukturální vlastnosti jsou relevantní pro zamýšlené klinické použití bylo změněno nebo buněk nebo tkání, které nejsou určeny k použití pro stejnou základní funkci (funkce) u příjemce a dárce; b) je prezentován s tím, že má vlastnosti pro člověka, je používán nebo podáván lidem za účelem léčby, prevence nebo diagnostiky onemocnění prostřednictvím farmakologického, imunologického nebo metabolického působení jeho buněk nebo tkání. Pro účely písmene a) se manipulace uvedené v příloze I nařízení (ES) č. 1394/2007, včetně řezání, mletí, tvarování, odstřeďování, máčení v antibiotických nebo antimikrobiálních roztocích, sterilizace, ozařování, separace buněk, zahušťování popř. čištění, filtrace, lyofilizace, zmrazení, kryokonzervace a vitrifikace se nepovažují za podstatné manipulace. Výše uvedené postupy pro přípravu purifikovaného produktu T reg NENAPLŇUJÍ definici podstatné manipulace.

Navíc podle stejného dokumentu [řádky 286-306] by T reg DLI MĚL BÝT POVAŽOVÁN za podávaný pro HOMOLOGONÍ POUŽITÍ. Ve skutečnosti, jak je uvedeno v "Úvahovém dokumentu o klasifikaci léčivé terapie pro moderní terapii", buňky sklizené a separované jednoduchou selekční metodou a znovu podávané, aby plnily svou stejnou základní funkci, budou obecně považovány za homologní použití. Stejná základní funkce pro buněčnou populaci znamená, že buňky, když jsou odstraněny ze svého původního prostředí v lidském těle, jsou použity k udržení původní funkce ve stejném anatomickém nebo histologickém prostředí.

Proto BY INFUZE dárcovských purifikovaných T reg buněk u TRANSPLANTOVANÝCH PACIENTŮ (T reg DLI) MĚLA být považována spíše za TRANSPLANTACI než za podávání LÉČIVÉHO PRODUKTU POKROČILÉ TERAPIE.

Cílem studie je posoudit, zda vícenásobné infuze purifikovaných T regulačních buněk pocházejících od dárce (T reg DLI) u pacientů s chronickou GVHD refrakterní na steroidy jsou bezpečné a zda mohou vyvolat klinickou remisi GVHD. Na základě pozorování patofyziologického zapojení T regulačních buněk do chronické GVHD se adoptivní přenos dárcovských T regulačních buněk jeví jako reprodukovatelnější a efektivnější než jejich expanze in vivo po podání léků.

Stanovíme proveditelnost, toxicitu a MTD; posoudit klinický dopad a účinek na homeostázu Treg a Tcon; a určit, zda lze tyto účinky udržet a do jaké míry přetrvávají. Budeme také hodnotit prediktory odpovědi na terapii, a to jak klinické (např. pacient, onemocnění, souběžná činidla), tak biologické (např. stupeň expanze Treg; poměr Treg:Tcon; funkce Treg).

Aktuální ZKUŠEBNÍ NÁVRH byl od 1.1.2015 financován z Rámcového programu Evropské unie pro výzkum a inovace v rámci projektu s názvem „Oprava poškození tkání a orgánů u refrakterních chronických reakcí štěpu proti hostiteli po hematopoetických kmenových buňkách transplantace infuzí purifikovaných alogenních dárcovských regulačních T lymfocytů“ (akronym TREGeneration, kód 643776). Projekt zahrnuje soubor návrhů různých evropských institucí (University of Lisbon, University of Liege, University of Regensburg a University of Bologna), které všechny zkoumají roli Treg DLI v léčbě chronické GVHD. K návrhu je připojena GRANTOVÁ DOHODA podepsaná EVROPSKOU KOMISÍ.