DLI Treg de múltiplos doadores para GVHD crônica refratária grave (TREG2015001)

O procedimento em estudo é a infusão de pacientes com DECH crônica com células Treg purificadas obtidas do doador original de HSC (T reg DLI).

Células T reg são PURIFICADAS utilizando os Sistemas CliniMACS Plus para depleção de células CD8 e CD19 positivas e enriquecimento para alta expressão de CD25. A purificação de Treg será realizada de acordo com o procedimento GMP usando o dispositivo CLINI-MACS® de grau clínico. O protocolo é detalhado no capítulo 3.5

Todo o processo de fabricação, incluindo colheita de células, transporte e purificação de Treg, foi validado.

A viabilidade da seleção de nTreg de sangue periférico humano usando o sistema CliniMACS® foi previamente documentada. Nesses estudos, as células CD8+ e CD19+ eram indetectáveis ​​nos produtos sanguíneos finais. O conteúdo final de células que expressam CD4+CD25+CD127lo foi em média 79% (intervalo de 52-82%) com o procedimento de enriquecimento de CD25 aprimorado. Este protocolo também foi validado por dois Centros parceiros do Treg GENERATION CONSORTIUM, Liège e Boston, com resultados que atendem aos critérios de liberação para infusão. Esses procedimentos de purificação forneceram entre 0,98 e 2,93x10e6 Treg por kg. Vale ressaltar que o grau de pureza em termos de células CD4+CD25+CD127- variou entre 72,80% e 93,90%.

De acordo com o "Artigo de reflexão sobre a classificação da terapia medicinal de terapia avançada", publicado pelo Committee for Advanced Therapies (CAT) da European Medicine Agency em 20 de junho de 2014 [EMA/CAT/600280/2010 Rev.1 linhas 118-131] o Treg DLI NÃO DEVE SER CONSIDERADO MEDICAMENTO DE TERAPIA CELULAR. Com efeito, medicamento de terapia com células somáticas significa um medicamento biológico que cumpre AMBAS as duas características seguintes: a) Contém ou consiste em células ou tecidos que foram sujeitos a manipulação substancial de modo a que as características biológicas, funções fisiológicas ou propriedades estruturais relevantes para o tratamento clínico pretendido uso foi alterado, ou de células ou tecidos que não se destinam a ser usados ​​para a(s) mesma(s) função(ões) essencial(is) no receptor e no doador; (b) se apresente como possuindo propriedades, ou seja utilizado ou administrado em seres humanos com o objetivo de tratar, prevenir ou diagnosticar uma doença por meio da ação farmacológica, imunológica ou metabólica de suas células ou tecidos. Para efeitos da alínea a), as manipulações enumeradas no Anexo I do Regulamento (CE) n.º 1394/2007, incluindo corte, trituração, modelagem, centrifugação, imersão em soluções antibióticas ou antimicrobianas, esterilização, irradiação, separação celular, concentração ou purificação, filtragem, liofilização, congelamento, criopreservação e vitrificação não devem ser consideradas manipulações substanciais. Os procedimentos listados acima para a preparação do produto T reg purificado NÃO ATENDEM a definição de manipulação substancial.

Além disso, de acordo com o mesmo documento [linhas 286-306] T reg DLI DEVE SER CONSIDERADO como administrado para USO HOMÓLOGO. De fato, conforme descrito no "Documento de reflexão sobre a classificação da terapia medicinal de terapia avançada", as células colhidas e separadas por um método de seleção simples e readministradas para cumprir sua mesma função essencial serão geralmente consideradas como uso homólogo. A mesma função essencial para uma população celular significa que as células, quando removidas de seu ambiente original no corpo humano, são usadas para manter a função original no mesmo ambiente anatômico ou histológico.

Portanto, a INFUSÃO de células T reg purificadas do doador em PACIENTES TRANSPLANTADOS (T reg DLI) DEVE ser considerada como TRANSPLANTE ao invés da administração de MEDICAMENTO DE TERAPIA AVANÇADA.

O objetivo do estudo é avaliar se infusões múltiplas de células reguladoras T purificadas derivadas de doadores (T reg DLI) em pacientes com DECH crônica refratária a esteróides são seguras e se podem induzir a remissão clínica da DECH. Com base na observação do envolvimento fisiopatológico das células T reguladoras na DECH crônica, a transferência adotiva de células T reguladoras doadoras parece mais reprodutível e eficaz do que sua expansão in vivo após a administração de drogas.

Determinaremos a viabilidade, toxicidade e MTD; avaliar o impacto clínico e o efeito na homeostase de Treg e Tcon; e determinar se esses efeitos podem ser mantidos e até que ponto eles persistem. Também avaliaremos preditores de resposta à terapia, tanto clínicos (por exemplo, paciente, doença, agentes concomitantes) quanto biológicos (por exemplo, grau de expansão de Treg; relação Treg:Tcon; função Treg).

A partir de 01/01/2015, a atual PROPOSTA DE TRIAL recebeu financiamento do Programa-Quadro de Pesquisa e Inovação da União Europeia como parte de um projeto intitulado "Reparação de tecidos e órgãos danificados na doença crônica refratária do enxerto versus hospedeiro após células-tronco hematopoiéticas transplante pela infusão de linfócitos T reguladores de doadores alogênicos purificados" (acrônimo TREGeneration, código 643776). O projeto inclui um conjunto de propostas de diferentes instituições europeias (Universidade de Lisboa, Universidade de Liège, Universidade de Regensburg e Universidade de Bolonha), todas investigando o papel das Treg DLI no tratamento da GVHD crônica. O ACORDO DE SUBVENÇÃO assinado com a COMISSÃO EUROPEIA encontra-se em anexo à proposta.