Rasvaperäisten kantasolujen kliininen tutkimus diabeettisen jalan hoidossa

tutkimuksen suunnittelu: Suunniteltiin satunnaistettu kontrolloitu tutkimus. Vakiintuneiden mukaanottokriteerien/poissulkemiskriteerien mukaan koehenkilöt jaettiin satunnaisesti kahteen ryhmään satunnaislukutaulukon avulla. Jokainen ryhmä sai mesenkymaalisia kantasoluja (MSC) rasvalähteistä ja tavanomaista diabeettista jalkahoitoa näytteen koon arvioitujen tulosten mukaan. Satunnaistettu kontrolloitu tutkimus tehtiin kolmella sokealla. Koehenkilöt olivat sokeita, interventiot olivat sokeita ja arvioijat olivat sokeita. Koehenkilöt ryhmiteltiin satunnaisesti ja koordinaattorit avustivat niitä. Seuranta suoritettiin 5 ajankohdassa 7 päivää, 1, 3, 6 ja 12 kuukautta leikkauksen jälkeen koehenkilöiden kivun ja toiminnallisten muutosten arvioimiseksi sekä turvallisuuden ja tehokkuuden arvioimiseksi.

Aiheen sisällyttäminen, poissulkemiskriteerit ja allokointimenetelmät Sisääntulokriteerit ja poissulkemiskriteerit suoritetaan.

Jako- ja ryhmittelymenetelmä:

Satunnaistettu kontrolloitu tutkimus tehtiin kolmella sokealla. Koehenkilöt olivat sokeita, interventiot olivat sokeita ja arvioijat olivat sokeita. Koehenkilöt ryhmiteltiin satunnaisesti ja koordinaattorit avustivat niitä. Satunnaisluvun saatuaan koenäytteet ja injektiot merkitään tutkimusnumerolla eikä koehenkilöiden nimillä. Tietokonejärjestelmä määrittää satunnaisesti kantasolujen tai suolaliuoksen injektiot, eikä niitä kerrota koehenkilöille. Koeryhmät eivät ilmoittaneet osallistujille, että jokaisen injektion oli valmistellut avustaja ja ruisku oli peitetty mustalla kankaalla. Operaattori ja osallistujat eivät tienneet, mikä lääke ruiskutettiin. Arvioinnin suorittaa kolmas osapuoli, eikä ryhmittelyä paljasteta arvioijalle. Pätevien koehenkilöiden alustavan seulonnan jälkeen, sen jälkeen, kun on allekirjoitettu tietoinen suostumus ja tarkistettu tutkimusyksikön hyväksymis-/poissulkemiskriteerit ja vahvistettu, että he täyttävät valinnan kriteerit, satunnaisjärjestelmän tulosten mukaan koehenkilöiden jakaminen tapahtuu tiukasti satunnaisten tulosten mukaan. Aiheiden ilmoittautumistiedot: Tutkijoiden tulee täyttää vastaavat tietuelomakkeet osallistujien ilmoittautumisjärjestyksen mukaisesti, mukaan lukien seulontalomake , henkilöllisyystodistus ja osallistujien ilmoittautumislomake. Kaikki tutkimukseen liittyvät testilomakkeet tulee liittää tutkijan säilyttämään alkuperäiseen muistiin. Alkuperäinen tietuetaulukko on myös tämän tutkimuksen alkuperäinen tietue, jota seurataan Good Clinical Practice (GCP) -periaatteen mukaisesti.

Tarvittavien tapausten määrä:

Kantasoluhoidon tehokkuuden testaamiseksi alaraajojen iskeemisen nekroosin hoidossa diabeetikoilla koehenkilöt jaettiin satunnaisesti kantasoluhoitoryhmään ja kontrolliryhmään. Molemmat ryhmät saivat rutiinihoitoa, kun taas kantasoluhoitoryhmä sai kantasoluhoitoa. Lu Debin et al.:n tulosten mukaan kantasoluhoidon tehollinen osuus alaraajojen iskeemisestä nekroosista diabeetikoilla voi olla 83,3 %, kun taas verrokkiryhmän tehokas osuus on 45 %. Tässä tutkimuksessa käytetään kaksipuolista testiä, jossa otetaan alfa = 0,05, beeta = 0,1 ja lasketaan otoskoko seuraavan kaavan mukaan .N=(Ualfa+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P )2 N on jokaisessa käsittelyryhmässä vaadittava näytekoko. Tässä tutkimuksessa otoskoko jaettiin kahteen ryhmään, ja kunkin ryhmän otoskoko oli sama.

Ualfa ja Ubeta ovat normaalit normaalipoikkeamat, jotka vastaavat alfaa ja betaa. Katsomalla normaalijakauman kvantiilitaulukkoa voimme nähdä, että Ualpha(0.05)=1.65, Ubeta(0,1)=1,28.

P 0 ja P 1 edustavat kontrolliryhmän ja vastaavasti kantasoluhoitoryhmän tehokkaita määriä. Tässä tutkimuksessa P 0 = 45 %, P 1 = 83,3 %; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Yllä olevat parametrit ja numeeriset arvot otetaan käyttöön kaavan laskennassa.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 Kahdessa ryhmässä oli 54 potilasta. Ottaen huomioon, että jotkut potilaat saattavat vetäytyä tutkimuksesta, alkuperäinen otoskoko lisättiin 10 prosenttiin otoskoosta ja tutkimuksen lopullinen otoskoko oli 60.

Kantasoluvalmisteiden käyttö, annostus, aika ja hoitojakso:

1. Kantasoluvalmiste: autologisesta rasvasta peräisin olevat kantasolut.
2. Käyttö: Alaraajojen lihaksen injektio. Rasvakantasolusiirtoanestesia suoritettiin lannepuudutuksessa; puhdistetut rasvakantasolut injektoitiin lihakseen alaraajoihin 3 cm:n välein, jotka voitiin injektoida noin 50 kohtaan, 0,5 ml kantasolususpensiota jokaiseen kohtaan, noin 1 x 106 solua, 25 pistettä alaraajoihin, 25 pistettä jalkapohjaan ja hyvinvointi, ja siirrettyjen solujen kokonaismäärä oli noin 1 x 108; (Samaan aikaan haava, jossa oli infektio, poistettiin ja noin 1 ml solususpensiota säilyi.) Suoritettiin ihonalainen haavainjektio haavan juurelle ja ympärille, eli paikallinen injektio haavan pintaan.
3. annos: Solut (1 x 108 solua) sekoitettiin 25 ml:aan suolaliuosta.
4. hoitojakso: kertainjektio lihakseen.

Kriteerit kliinisen tutkimuksen keskeyttämiselle ja lopettamiselle:

1. Tutkimuksen keskeyttäminen 1.1 Koehenkilöt vetäytyvät vapaaehtoisesti tutkimuksesta milloin tahansa vaikuttamatta jatkohoitoon.

   1.2 Seuraavia haittatapahtumia esiintyi (viitaten pääasiassa National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events -kriteeriin (NCI-CTCAE)).(1) kuume, pyörtyminen, hikoilu, oksentelu ja muut systeemiset oireet, joiden syitä ei tunneta; (2) maha-suolikanavan toimintahäiriö tuntemattomista syistä, ruokahaluttomuus, pahoinvointi, vatsan turvotus, ummetus tai ripuli; (3) päänsärky, väsymys, selittämätön lihaskipu, epämukavuus ja muutokset unessa; Psyykkisiä oireita, kuten ahdistuneisuus, ärtyneisyys, selittämätön näön heikkeneminen, lihasvapina, dysuria jne. Paikalliset ilmenemismuodot, kuten ihon makula, punoitus jne. Paikallinen kivun paheneminen tai toiminta-alueen heikkeneminen, _Akuutit myrkytysoireet tai kuolema.

   1.3 Tutkijat uskovat, että tutkimusohjelmia rikotaan vakavasti tai että ryhmittely on virheellinen.

   1.4 Tutkijat uskovat, että tutkimusohjelmassa on turvallisuusongelmia. 1,5 henkilöä ei haastateltu. Jos osallistujat keskeyttävät hoidon etukäteen, keskeyttämisen syy tulee dokumentoida tapausraporttilomakkeeseen (CRF), mutta seurantaa vaaditaan tutkimuksen loppuun asti ja tutkimuslomake täytetään.

2. Tutkimuksen päätepiste 2.1 Vakavia hoitoon liittyviä haittavaikutuksia esiintyi hoidon päättymisen ja seurannan lopun välillä.

2.2 Seurannan lopussa vertailuryhmään verrattuna haavan paraneminen, raajojen pelastusaste, Ruthford-aste, kivuton kävelyaika, nilkka-olkavarsiindeksi (ABI), transkutaaninen hapen osapaine (TcPO2), laboratoriotutkimus ja verisuonten magneettikuvaus (MRA) parani merkittävästi, mikä osoittaa tehokkuuden (tilastollisilla eroilla): Tehokkuuden arviointikriteerit

Verrattuna vertailuryhmään, haavan paranemisnopeus, raajojen pelastusnopeus, alaraajojen verisuonten ultraääni, nilkka-olkavarsiindeksi (ABI), perkutaaninen hapen osapaine (TcPO2), moniviipaleinen spiraali-CT-angiografia (CTA), Rutherford-luokitus, Koehenkilöiden Wong-Baker Faces -kipupisteet paranivat merkittävästi vertailuryhmään verrattuna, mikä osoittaa tehokkuuden (tilastollisilla eroilla):

Tärkeimmät arviointiindikaattorit:

1. Haavojen paraneminen ja amputaatio laskettiin. Haavojen paranemisnopeus = täydellisen haavan paranemistapausten lukumäärä / haavaumien kokonaismäärä tässä ryhmässä; amputaatioiden määrä = amputaatioiden lukumäärä / tapausten kokonaismäärä tässä ryhmässä.

2 Toissijaiset havainnointiindikaattorit Alaraajojen verisuonten ultraääni, nilkan brakiaalinen indeksi (ABI), perkutaaninen hapen osapaine (TcPO2), monileikkausspiraali-CT-angiografia (CTA), Rutherford-luokitus, Wong-Baker Faces -kipupisteet.

Haittavaikutusten kirjaamisvaatimukset ja raportointimenetelmät ja vakavien haittatapahtumien käsittelytoimenpiteet Muotoile ennen kokeen aloittamista yksityiskohtaiset ja standardoidut "Riskinhallintamekanismit ja vahinkotapahtumien käsittelytoimenpiteet kantasolututkimukselle". Kaikista koehenkilöistä, jotka saivat kantasoluja alaraajojen lihakseen, tulee tehokas populaatio turvallisuusanalyysiä varten. Tutkijat kirjaavat uskollisesti koehenkilöiden sivuvaikutukset ja haittatapahtumat ja analysoivat syitä.

1. Haittatapahtumat määritellään haitallisiksi ja odottamattomiksi lääketieteellisiksi tapahtumiksi hoidon ja seurannan aikana, mukaan lukien: (1) systeemiset oireet, kuten kuume, pyörtyminen, hikoilu ja oksentelu, joiden syyt eivät tunneta; (2) maha-suolikanavan toimintahäiriö tuntemattomista syistä, anoreksia, pahoinvointi, vatsan turvotus, ummetus tai ripuli; ja (3) päänsärky, väsymys, selittämätön lihaskipu, ei. Sopivuus ja muutokset unessa jne. (4) Psyykkisiä oireita, kuten selittämätön ahdistuneisuus, levottomuus ja levottomuus; (5) Näön heikkeneminen, lihasvapina, dysuria jne. (5) Paikalliset ilmenemismuodot, kuten ihon makula ja punoitus; (5) Paikallinen kivun paheneminen tai aktiivisuuden väheneminen; ja (5) akuutit myrkytysoireet tai kuolema.
2. Vakavilla haittatapahtumilla (SAE) tarkoitetaan tapahtumia, jotka vaativat sairaalahoitoa, pidentävät sairaalahoitoa, työkyvyttömyyttä, vaikuttavat työkykyyn, ovat hengenvaarallisia tai kuolemanvaarallisia, synnynnäisiä epämuodostumia jne. Haittavaikutusten vakavuus on kirjattava ja luokiteltava CTCAE-kriteerien mukaisesti. SAE:n ja hoidon välinen suhde tulee arvioida seuraavien määritelmien mukaisesti. (1) Epäolennainen: On näyttöä siitä, että haittatapahtumien syy ei ole nivelensisäinen injektiohoito (kuten menneet sairaudet, mahdolliset sairaudet, komplikaatiot); 2) liittyvät: haittatapahtumat ovat aikasidonnaisia ​​lääkkeiden nivelensisäiseen injektioon ja tiedetään tai epäillään, että lääkkeiden lihaksensisäinen injektio alaraajoihin voi aiheuttaa haittatapahtumia; 3) ei osaa arvioida. Haittatapahtumat on kirjattava tapausraporttilomakkeeseen (CRF) liittyviin osiin, jotka on kuvattava seuraavasti: alkamis- ja päättymispäivät; haittatapahtumien tulokset; johtavatko ne tutkimuksesta vetäytymiseen; liittyvätkö ne alaraajojen lihaksensisäisiin huumeinjektioihin; ja ovatko ne vakavia haittatapahtumia.

Vakavista haittatapahtumista ilmoittaminen

Raportoinnin aikaraja:

24 tunnin kuluessa siitä, kun tarkkailijat ovat saaneet tiedon vakavien haittatapahtumien ajankohdasta. Raportointitila Soita tai faksaa ja täytä vakavien haittatapahtumien tietuelomake ja lähetä se päätutkijoille, ilmoitusyksiköille, eettisille toimikunnille ja Valtion elintarvike- ja lääkevirastolle