Klinisk undersøgelse af fedtafledte stamceller i behandlingen af ​​diabetisk fod

forskningsdesign: Et randomiseret kontrolleret forsøg blev designet. I henhold til de fastlagte inklusionskriterier/eksklusionskriterier blev forsøgspersonerne tilfældigt opdelt i to grupper efter tilfældigt taltabel. Hver gruppe modtog mesenkymale stamceller (MSC'er) fra fedtkilder og konventionel diabetisk fodbehandling i henhold til de estimerede resultater af prøvestørrelsen. En randomiseret kontrolleret undersøgelse blev udført med tre blinds. Forsøgspersonerne var blinde, interventionerne var blinde, og evaluatorerne var blinde. Forsøgspersonerne blev tilfældigt grupperet og assisteret af koordinatorer. Opfølgning blev udført på 5 tidspunkter 7 dage, 1, 3, 6 og 12 måneder efter operationen for at evaluere forsøgspersonernes smerte og funktionelle ændringer og for at evaluere sikkerheden og effektiviteten.

Emnets inklusion, eksklusionskriterier og tildelingsmetoder vil blive udført.

Metode til tildeling og gruppering:

En randomiseret kontrolleret undersøgelse blev udført med tre blinds. Forsøgspersonerne var blinde, interventionerne var blinde, og evaluatorerne var blinde. Forsøgspersonerne blev tilfældigt grupperet og assisteret af koordinatorer. Efter at have modtaget det tilfældige nummer, er testprøverne og injektionerne markeret med forskningsnummeret i stedet for navnene på forsøgspersonerne. Injektioner af stamceller eller saltvand bestemmes tilfældigt af computersystemet og vil ikke blive oplyst til forsøgspersonerne. Forsøgsgrupper ville ikke informere intervenienterne om, at hver injektion var forberedt af en assistent, og at sprøjten var dækket med sort klud. Operatøren og deltagerne ville ikke vide, hvilket stof der blev injiceret. Evalueringen udføres af en tredjepart, og grupperingen vil ikke blive videregivet til evaluatoren. Efter foreløbig screening af kvalificerede forsøgspersoner, efter at have underskrevet det informerede samtykke og verificeret adgangs-/udelukkelseskriterierne af forskningsenheden og bekræftet, at de opfylder udvalget kriterier, i henhold til resultaterne af det tilfældige system, er fordelingen af ​​emner strengt udført i henhold til de tilfældige resultater. Emneregistreringer: Forskere skal udfylde de tilsvarende registreringsformularer i henhold til rækkefølgen af ​​deltagernes tilmelding, inklusive screeningsformularen , identifikationsskemaet og registreringsskemaet for deltagernes tilmelding. Alle forskningsrelaterede testark skal vedhæftes det originale registreringsark, der opbevares af forskeren. Den originale registreringstabel er også den originale registrering af denne undersøgelse, som overvåges i henhold til Good Clinical Practice(GCP)-princippet.

Antal påkrævede sager:

For at teste effektiviteten af ​​stamcelleterapi i behandlingen af ​​iskæmisk nekrose i underekstremiteterne hos diabetespatienter blev forsøgspersonerne tilfældigt opdelt i stamcellebehandlingsgruppe og kontrolgruppe. Begge grupper modtog rutinebehandling, mens stamcellebehandlingsgruppen ville modtage stamcelleterapi. Ifølge resultaterne af Lu Debin et al. kan den effektive frekvens af stamcelleterapi for iskæmisk nekrose af underekstremiteterne hos diabetespatienter nå 83,3 %, mens den effektive frekvens i kontrolgruppen er 45 %. I denne undersøgelse vil der blive brugt tosidet test, idet der tages alfa = 0,05, beta = 0,1, og prøvestørrelsen beregnes i henhold til følgende formel .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P) )2 N er den nødvendige prøvestørrelse for hver behandlingsgruppe. I denne undersøgelse blev stikprøvestørrelsen opdelt i to grupper, og prøvestørrelsen for hver gruppe var den samme.

Ualpha og Ubeta er standard normalafvigelser svarende til henholdsvis alfa og beta. Ser vi på kvantiltabellen for normalfordelingen, kan vi se, at Ualpha(0,05)=1,65, Ubeta(0,1)=1,28.

P 0 og P 1 repræsenterer de effektive rater for henholdsvis kontrolgruppen og stamcellebehandlingsgruppen. I denne undersøgelse er P0 = 45%, P1 = 83,3%; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Ovenstående parametre og numeriske værdier er indført i formelberegningen.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 Der var 54 patienter i de to grupper. I betragtning af, at nogle patienter måske trækker sig fra undersøgelsen, blev den oprindelige stikprøvestørrelse tilføjet til 10 % af prøvestørrelsen, og den endelige prøvestørrelse på undersøgelsen var 60.

Anvendelse, dosering, tid og behandlingsforløb af stamcellepræparater:

1. Stamcellepræparation: stamceller afledt af autologt fedt.
2. Anvendelse: Underekstremitets muskelinjektion. Fedtstamcelletransplantationsanæstesi blev udført ved lændenæstesi; oprensede fedtstamceller blev injiceret intramuskulært i underekstremiteterne med intervaller på 3 cm, som kunne injiceres på ca. 50 punkter, 0,5 ml stamcellesuspension på hvert punkt, ca. 1 x 106 celler, 25 punkter i underekstremiteter, 25 punkter i sål og velvære, og det samlede antal af transplanterede celler var ca. 1 x 108; (På samme tid blev såret med infektion debrideret, og ca. 1 ml cellesuspension blev tilbageholdt.) Der blev udført subkutan injektion af ulcus i bunden og omkring såret, dvs. lokal injektion af såroverfladen.
3. dosis: Cellerne (1 x 108 celler) blev blandet i 25 ml saltvand.
4. Behandlingsforløb: intramuskulær engangsinjektion.

Kriterier for afbrydelse og afslutning af klinisk forskning:

1. Forskningsafbrydelse 1.1 Forsøgspersoner trækker sig frivilligt fra undersøgelsen til enhver tid uden at påvirke den videre behandling.

   1.2 Følgende bivirkninger forekom (hovedsageligt med henvisning til National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events (NCI-CTCAE) ).(1) feber, synkope, svedtendens, opkastning og andre systemiske symptomer med ukendte årsager; (2) dysfunktion af mave-tarmkanalen med ukendte årsager, tab af appetit, kvalme, abdominal udspilning, forstoppelse eller diarré; (3) hovedpine, træthed, uforklarlige muskelsmerter, ubehag og ændringer i søvn; Psykiske symptomer som angst, irritabilitet, uforklarlig synsnedsættelse, muskelskælven, dysuri osv. Lokale manifestationer som f.eks. macula, erytem osv. Lokal smerteforværring eller nedsat aktivitetsområde, _Akutte forgiftningssymptomer eller død.

   1.3 Forskere mener, at der er tale om alvorlige overtrædelser af forskningsprogrammer eller forkert gruppering.

   1.4 Forskere mener, at der er sikkerhedsproblemer i forskningsprogrammet. 1,5 forsøgspersoner blev ikke interviewet. Hvis deltagerne afbryder behandlingen i forvejen, skal årsagen til seponeringen dokumenteres i Caserapportskemaet (CRF), men der kræves opfølgning indtil undersøgelsens afslutning og undersøgelsesskemaet udfyldes.

2. Undersøgelsens endepunkt 2.1 Alvorlige behandlingsrelaterede bivirkninger forekom mellem behandlingens afslutning og opfølgningens afslutning.

2.2 Ved afslutningen af ​​opfølgningen, sammenlignet med kontrolgruppen, heling af sår, bjærgningshastighed, Ruthford-grad, smertefri gangtid, ankel-brachial indeks (ABI), transkutant partialtryk af ilt (TcPO2), laboratorieundersøgelse og vascular magnetic resonance imaging (MRA) forbedret signifikant, hvilket indikerer effektiviteten (med statistiske forskelle): Kriterier for evaluering af effektivitet

Sammenlignet med kontrolgruppen, sårhelingshastigheden, redningshastigheden for lemmerne, vaskulær ultralyd i underekstremiteterne, ankel-brachial indeks (ABI), perkutan partialtryk af oxygen (TcPO2), multi-slice spiral CT angiografi (CTA), Rutherford gradering, Wong-Baker Faces smertescore for forsøgspersonerne forbedredes signifikant sammenlignet med kontrolgruppen, hvilket indikerer effektiviteten (med statistiske forskelle):

Vigtigste evalueringsindikatorer:

1. Sårheling og amputation blev beregnet. Helingshastighed for sår = antal fuldstændige sårhelingstilfælde / samlet antal sår i denne gruppe; amputationsrate = antal amputationer / samlet antal tilfælde i denne gruppe.

2 Sekundære observationsindikatorer Vaskulær ultralyd i nedre ekstremiteter, ankel brachial indeks (ABI), perkutan partialtryk af oxygen (TcPO2), multi-slice spiral CT angiografi (CTA), Rutherford klassifikation, Wong-Baker Faces smertescore.

Registrering af krav til uønskede hændelser og rapporteringsmetoder og håndtering af foranstaltninger af alvorlige uønskede hændelser Formuler detaljerede og standardiserede "Risk Management Mechanisms and Damage Event Processing Measures for Stem Cell Clinical Research" før starten af ​​eksperimentet. Alle forsøgspersoner, der modtog underekstremitetsmuskelinjektion af stamceller, vil blive en effektiv population til sikkerhedsanalyse. Forskere vil trofast registrere forsøgspersonernes bivirkninger og uønskede hændelser og analysere årsagerne.

1. Bivirkninger er defineret som uønskede og uventede medicinske hændelser under behandling og opfølgning, herunder: (1) systemiske symptomer såsom feber, synkope, svedtendens og opkastninger med ukendte årsager; (2) gastrointestinal dysfunktion med ukendte årsager, anoreksi, kvalme, abdominal udspilning, forstoppelse eller diarré; og (3) hovedpine, træthed, uforklarlige muskelsmerter, Nej. Egnethed og ændringer i søvn osv. (4) Psykiske symptomer såsom uforklarlig angst, rastløshed og rastløshed; (5) Synsforstyrrelser, muskelskælven, dysuri, etc. (5) Lokale manifestationer som f.eks. makula og erytem i huden; (5) Lokal smerteforværring eller reduceret aktivitetsområde; og (5) Akutte forgiftningssymptomer eller død.
2. Alvorlige bivirkninger (SAE'er) defineres som hændelser, der kræver hospitalsindlæggelse, forlænget hospitalsindlæggelse, handicap, indvirkning på arbejdsevnen, livstruende eller dødstruende, medfødte misdannelser osv. Alvoren af ​​uønskede hændelser skal registreres og klassificeres i henhold til CTCAE-kriterier. Forholdet mellem SAE og behandling bør evalueres i henhold til følgende definitioner. (1) Irrelevant: Der er bevis for, at årsagen til uønskede hændelser ikke er intraartikulær injektionsterapi (såsom tidligere tilstande, potentielle sygdomme, komplikationer); 2) relaterede: uønskede hændelser er tidsrelaterede med intraartikulær injektion af lægemidler og kendt eller formodet, at intramuskulær injektion af lægemidler i nedre ekstremiteter kan forårsage uønskede hændelser; 3) ude af stand til at vurdere. Uønskede hændelser skal registreres i sektionerne i sagsrapportformularen (CRF), som skal beskrives som: start- og slutdatoer; uønskede hændelser; om de fører til tilbagetrækning fra undersøgelsen; om de er relateret til intramuskulære lægemiddelinjektioner i nedre ekstremiteter; og om der er tale om alvorlige bivirkninger.

Indberetning af alvorlige uønskede hændelser

Tidsgrænse for rapportering:

Inden for 24 timer efter observatørers viden om tidspunktet for alvorlige uønskede hændelser. Rapporteringstilstand Telefon eller fax, og udfyld registreringsformularen over alvorlige bivirkninger og send den til hovedforskerne, erklæringsenheder, etiske udvalg og Statens Fødevare- og Lægemiddeladministration