Studio clinico delle cellule staminali di derivazione adiposa nel trattamento del piede diabetico

disegno della ricerca: è stato progettato uno studio controllato randomizzato. Secondo i criteri di inclusione/esclusione stabiliti, i soggetti sono stati divisi casualmente in due gruppi in base a una tabella di numeri casuali. Ogni gruppo ha ricevuto cellule staminali mesenchimali (MSC) da fonti di grasso e trattamento convenzionale del piede diabetico in base ai risultati stimati della dimensione del campione. È stato condotto uno studio controllato randomizzato con tre ciechi. I soggetti erano ciechi, gli interventi erano ciechi ei valutatori erano ciechi. I soggetti sono stati raggruppati in modo casuale e assistiti dai coordinatori. Il follow-up è stato effettuato in 5 punti temporali 7 giorni, 1, 3, 6 e 12 mesi dopo l'operazione per valutare il dolore e i cambiamenti funzionali dei soggetti e per valutare la sicurezza e l'efficacia.

Inclusione dei soggetti, criteri di esclusione e metodi di assegnazione Verranno eseguiti criteri di inclusione e criteri di esclusione.

Metodo di assegnazione e raggruppamento:

È stato condotto uno studio controllato randomizzato con tre ciechi. I soggetti erano ciechi, gli interventi erano ciechi ei valutatori erano ciechi. I soggetti sono stati raggruppati in modo casuale e assistiti dai coordinatori. Dopo aver ricevuto il numero casuale, i campioni di prova e le iniezioni sono contrassegnati dal numero di ricerca piuttosto che dai nomi dei soggetti. Le iniezioni di cellule staminali o soluzione salina sono determinate casualmente dal sistema informatico e non saranno divulgate ai soggetti. I gruppi di soggetti non informano gli intervenienti che ogni iniezione è stata preparata da un assistente e la siringa è stata coperta con un panno nero. L'operatore ei partecipanti non saprebbero quale farmaco è stato iniettato. La valutazione è effettuata da un soggetto terzo e il raggruppamento non sarà divulgato al valutatore. Dopo lo screening preliminare dei soggetti qualificati, dopo aver firmato il consenso informato e verificato i criteri di ingresso/esclusione da parte dell'unità di ricerca, e aver confermato che soddisfano la selezione criteri, in base ai risultati del sistema casuale, la distribuzione dei soggetti è rigorosamente effettuata in base ai risultati casuali. Record di ingresso del soggetto: i ricercatori devono compilare i moduli di registrazione corrispondenti secondo l'ordine di iscrizione dei partecipanti, incluso il modulo di screening , il modulo di identificazione e il modulo di registrazione dell'iscrizione dei partecipanti. Tutti i fogli di prova relativi alla ricerca devono essere allegati al foglio di registrazione originale conservato dal ricercatore. La tabella dei record originali è anche il record originale di questo studio che viene monitorato secondo il principio della buona pratica clinica (GCP).

Numero di casi richiesti:

Per testare l'efficacia della terapia con cellule staminali nel trattamento della necrosi ischemica degli arti inferiori nei pazienti diabetici, i soggetti sono stati divisi casualmente in gruppo di trattamento con cellule staminali e gruppo di controllo. Entrambi i gruppi hanno ricevuto un trattamento di routine, mentre il gruppo di trattamento con cellule staminali avrebbe ricevuto la terapia con cellule staminali. Secondo i risultati di Lu Debin et al., il tasso effettivo di terapia con cellule staminali per la necrosi ischemica degli arti inferiori nei pazienti diabetici può raggiungere l'83,3%, mentre il tasso effettivo nel gruppo di controllo è del 45%. In questo studio verrà utilizzato il test a due code, prendendo alfa = 0,05, beta = 0,1 e calcolando la dimensione del campione secondo la seguente formula .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P )2 N è la dimensione del campione richiesta per ciascun gruppo di trattamento. In questo studio, la dimensione del campione è stata divisa in due gruppi e la dimensione del campione di ciascun gruppo era la stessa.

Ualfa e Ubeta sono le deviazioni normali standard corrispondenti rispettivamente ad alfa e beta. Osservando la tabella dei quantili della distribuzione normale, possiamo vedere che Ualpha(0.05)=1.65, Ubeta(0.1)=1.28.

P 0 e P 1 rappresentano rispettivamente i tassi effettivi del gruppo di controllo e del gruppo di trattamento con cellule staminali. In questo studio, P0 = 45%, P1 = 83,3%; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, I parametri e i valori numerici di cui sopra vengono introdotti nel calcolo della formula.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 C'erano 54 pazienti nei due gruppi. Considerando che alcuni pazienti potrebbero ritirarsi dallo studio, la dimensione del campione originale è stata aggiunta al 10% della dimensione del campione e la dimensione del campione finale dello studio era 60.

Uso, dosaggio, tempo e corso del trattamento dei preparati di cellule staminali:

1. Preparazione delle cellule staminali: cellule staminali derivate da grasso autologo.
2. Utilizzo: iniezione muscolare degli arti inferiori. L'anestesia del trapianto di cellule staminali adipose è stata eseguita mediante anestesia lombare; cellule staminali adipose purificate sono state iniettate per via intramuscolare negli arti inferiori a intervalli di 3 cm, che potevano essere iniettate in circa 50 punti, 0,5 ml di sospensione di cellule staminali in ciascun punto, circa 1 x 106 cellule, 25 punti negli arti inferiori, 25 punti nella suola e benessere, e il numero totale di cellule trapiantate era di circa 1 x 108; (Allo stesso tempo, l'ulcera con infezione è stata sbrigliata ed è stato trattenuto circa 1 ml di sospensione cellulare.) È stata eseguita l'iniezione sottocutanea dell'ulcera alla base e intorno all'ulcera, cioè l'iniezione locale della superficie della ferita.
3. dose: le cellule (1 x 108 cellule) sono state mescolate in 25 mL di soluzione fisiologica.
4. corso del trattamento: iniezione intramuscolare una tantum.

Criteri per l'interruzione e la cessazione della ricerca clinica:

1. Interruzione della ricerca 1.1 I soggetti si ritirano volontariamente dallo studio in qualsiasi momento senza influenzare l'ulteriore trattamento.

   1.2 Si sono verificati i seguenti eventi avversi (riferiti principalmente ai Common Terminology Criteria for Adverse Events (NCI-CTCAE) del National Cancer Institute). (1) febbre, sincope, sudorazione, vomito e altri sintomi sistemici con cause sconosciute; (2) disfunzione del tratto gastrointestinale con cause sconosciute, perdita di appetito, nausea, distensione addominale, costipazione o diarrea; (3) mal di testa, affaticamento, dolore muscolare inspiegabile, disagio e alterazioni del sonno; Sintomi mentali come ansia, irritabilità, compromissione della vista inspiegabile, tremore muscolare, disuria, ecc. Manifestazioni locali come macula cutanea, eritema, ecc.

   1.3 I ricercatori ritengono che vi siano gravi violazioni dei programmi di ricerca o raggruppamenti errati.

   1.4 I ricercatori ritengono che vi siano problemi di sicurezza nel programma di ricerca. 1,5 soggetti non sono stati intervistati. Se i partecipanti interrompono il trattamento in anticipo, la causa dell'interruzione deve essere documentata nel Case report form (CRF), ma è richiesto il follow-up fino alla fine dello studio e il modulo dello studio è compilato.

2. Endpoint dello studio 2.1 Eventi avversi gravi correlati al trattamento si sono verificati tra la fine del trattamento e la fine del follow-up.

2.2 Alla fine del follow-up, rispetto al gruppo di controllo, guarigione dell'ulcera, tasso di salvataggio dell'arto, grado di Ruthford, tempo di cammino indolore, indice caviglia-braccio (ABI), pressione parziale transcutanea di ossigeno (TcPO2), esame di laboratorio e la risonanza magnetica vascolare (MRA) è migliorata in modo significativo, indicando l'efficacia (con differenze statistiche): criteri per la valutazione dell'efficacia

Rispetto al gruppo di controllo, il tasso di guarigione dell'ulcera, il tasso di salvataggio dell'arto, l'ecografia vascolare dell'arto inferiore, l'indice caviglia-braccio (ABI), la pressione parziale percutanea dell'ossigeno (TcPO2), l'angiografia TC spirale multistrato (CTA), la classificazione di Rutherford, Il punteggio del dolore di Wong-Baker Faces dei soggetti è migliorato significativamente rispetto al gruppo di controllo, indicando l'efficacia (con differenze statistiche):

Principali indicatori di valutazione:

1. Sono state calcolate la guarigione e l'amputazione dell'ulcera. Tasso di guarigione dell'ulcera = numero di casi di guarigione completa della ferita/numero totale di ulcere in questo gruppo; tasso di amputazione = numero di amputazioni / numero totale di casi in questo gruppo.

2 Indicatori di osservazione secondari Ecografia vascolare degli arti inferiori, indice caviglia-braccio (ABI), pressione parziale percutanea dell'ossigeno (TcPO2), angiografia TC spirale multistrato (CTA), classificazione di Rutherford, punteggio del dolore di Wong-Baker Faces.

Requisiti di registrazione degli eventi avversi e metodi di segnalazione e misure di gestione degli eventi avversi gravi Formulare "Meccanismi di gestione del rischio e misure di elaborazione degli eventi di danno per la ricerca clinica sulle cellule staminali" dettagliati e standardizzati prima dell'inizio dell'esperimento. Tutti i soggetti che hanno ricevuto l'iniezione di cellule staminali nei muscoli degli arti inferiori diventeranno una popolazione effettiva per l'analisi di sicurezza. I ricercatori registreranno fedelmente gli effetti collaterali e gli eventi avversi dei soggetti e ne analizzeranno le cause.

1. Gli eventi avversi sono definiti come eventi medici avversi e imprevisti durante il trattamento e il follow-up, inclusi: (1) sintomi sistemici come febbre, sincope, sudorazione e vomito con cause sconosciute; (2) disfunzione gastrointestinale con cause sconosciute, anoressia, nausea, distensione addominale, costipazione o diarrea; e (3) mal di testa, affaticamento, dolore muscolare inspiegabile, mancanza di idoneità e cambiamenti nel sonno, ecc. (4) sintomi mentali come ansia inspiegabile, irrequietezza e irrequietezza; (5) Compromissione della vista, tremore muscolare, disuria, ecc. (5) Manifestazioni locali come macula cutanea ed eritema; (5) aggravamento del dolore locale o ridotta gamma di attività; e (5) Sintomi di avvelenamento acuto o morte.
2. Gli eventi avversi gravi (SAE) sono definiti come eventi che richiedono l'ospedalizzazione, il prolungamento dell'ospedalizzazione, la disabilità, l'impatto sulla capacità lavorativa, la minaccia per la vita o la morte, le malformazioni congenite, ecc. La gravità degli eventi avversi deve essere registrata e classificata secondo i criteri CTCAE. La relazione tra SAE e trattamento deve essere valutata secondo le seguenti definizioni. (1) Irrilevante: vi sono prove che la causa degli eventi avversi non è la terapia iniettiva intra-articolare (come condizioni pregresse, potenziali malattie, complicanze); 2) correlati: gli eventi avversi sono correlati nel tempo all'iniezione intra-articolare di farmaci e si sa o si sospetta che l'iniezione intramuscolare di farmaci negli arti inferiori possa causare gli eventi avversi; 3) incapace di valutare. Gli eventi avversi devono essere registrati nelle sezioni relative al Case report form (CRF), che devono essere descritte come: date di inizio e fine; esiti di eventi avversi; se portano al ritiro dallo studio; se sono correlati a iniezioni intramuscolari di farmaci agli arti inferiori; e se si tratta di eventi avversi gravi.

Segnalazione di eventi avversi gravi

Termine di segnalazione:

Entro 24 ore dalla conoscenza da parte degli Osservatori del momento degli eventi avversi gravi. Modalità di segnalazione Telefono o fax, compilare il Modulo di registrazione degli eventi avversi gravi e inviarlo ai principali ricercatori, alle unità di dichiarazione, ai comitati etici e alla State Food and Drug Administration