Klinisk studie av fetthärledda stamceller vid behandling av diabetisk fot

forskningsdesign: En randomiserad kontrollerad studie utformades. Enligt de fastställda inklusionskriterierna/exklusionskriterierna delades försökspersonerna slumpmässigt in i två grupper efter slumptalstabell. Varje grupp fick mesenkymala stamceller (MSC) från fettkällor och konventionell diabetisk fotbehandling enligt de uppskattade resultaten av provstorleken. En randomiserad kontrollerad studie genomfördes med tre persienner. Försökspersonerna var blinda, interventionerna var blinda och utvärderarna var blinda. Försökspersonerna grupperades slumpmässigt och fick hjälp av koordinatorer. Uppföljning utfördes vid 5 tidpunkter 7 dagar, 1, 3, 6 och 12 månader efter operationen för att utvärdera smärta och funktionsförändringar hos försökspersonerna och för att utvärdera säkerheten och effektiviteten.

Inklusionskriterier för ämne, uteslutningskriterier och tilldelningsmetoder Inträdeskriterier och uteslutningskriterier kommer att verkställas.

Metod för tilldelning och gruppering:

En randomiserad kontrollerad studie genomfördes med tre persienner. Försökspersonerna var blinda, interventionerna var blinda och utvärderarna var blinda. Försökspersonerna grupperades slumpmässigt och fick hjälp av koordinatorer. Efter att ha mottagit det slumpmässiga numret markeras testproverna och injektionerna med forskningsnumret snarare än namnen på försökspersonerna. Injektioner av stamceller eller koksaltlösning bestäms slumpmässigt av datorsystemet och kommer inte att avslöjas för försökspersonerna. Försöksgrupperna skulle inte informera intervenienterna om att varje injektion förbereddes av en assistent och att sprutan var täckt med svart tyg. Operatören och deltagarna skulle inte veta vilket läkemedel som injicerades. Utvärderingen görs av en tredje part och grupperingen kommer inte att avslöjas för utvärderaren. Efter preliminär screening av kvalificerade ämnen, efter att ha undertecknat det informerade samtycket och verifierat inträdes-/uteslutningskriterierna av forskningsenheten, och bekräftat att de uppfyller urvalet kriterier, enligt resultaten av det slumpmässiga systemet, är fördelningen av ämnen strikt utförd enligt de slumpmässiga resultaten. Ämnesregistrering: Forskare ska fylla i motsvarande registerformulär enligt ordningen för deltagarnas registrering, inklusive screeningformuläret , legitimationsformuläret och registreringsformuläret för deltagares inskrivning. Alla forskningsrelaterade testblad måste bifogas det originaldokument som forskaren förvarar. Den ursprungliga registreringstabellen är också den ursprungliga posten för denna studie som övervakas enligt Good Clinical Practice(GCP)-principen.

Antal ärenden som krävs:

För att testa effektiviteten av stamcellsterapi vid behandling av ischemisk nekros i nedre extremiteterna hos diabetespatienter delades försökspersonerna slumpmässigt in i stamcellsbehandlingsgrupp och kontrollgrupp. Båda grupperna fick rutinbehandling, medan stamcellsbehandlingsgruppen skulle få stamcellsterapi. Enligt resultaten av Lu Debin et al. kan den effektiva frekvensen av stamcellsterapi för ischemisk nekros av nedre extremiteter hos diabetespatienter nå 83,3 %, medan den effektiva frekvensen i kontrollgruppen är 45 %. I denna studie kommer ett dubbelsidigt test att användas som tar alfa = 0,05, beta = 0,1 och beräknar provstorleken enligt följande formel .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P )2N är den provstorlek som krävs för varje behandlingsgrupp. I denna studie delades urvalsstorleken upp i två grupper, och urvalsstorleken för varje grupp var densamma.

Ualfa och Ubeta är de normala standardavvikelserna som motsvarar alfa respektive beta. Om vi ​​tittar på kvantiltabellen för normalfördelning kan vi se att Ualpha(0,05)=1,65, Ubeta(0.1)=1.28.

P 0 och P 1 representerar de effektiva frekvenserna för kontrollgruppen respektive stamcellsbehandlingsgruppen. I denna studie, Po = 45%, Pi = 83,3%; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Ovanstående parametrar och numeriska värden introduceras i formelberäkningen.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 Det fanns 54 patienter i de två grupperna. Med tanke på att vissa patienter kan dra sig ur studien lades den ursprungliga provstorleken till 10 % av provstorleken och den slutliga urvalsstorleken för studien var 60.

Användning, dosering, tid och behandlingsförlopp av stamcellspreparat:

1. Stamcellsberedning: stamceller härrörande från autologt fett.
2. Användning: muskelinjektion i nedre extremiteter. Anestesi för transplantation av fettstamceller utfördes genom lumbalbedövning; renade fettstamceller injicerades intramuskulärt i nedre extremiteter med intervaller på 3 cm, som kunde injiceras vid cirka 50 punkter, 0,5 ml stamcellsuspension vid varje punkt, cirka 1 x 106 celler, 25 punkter i nedre extremiteter, 25 punkter i sulan och välbefinnande, och det totala antalet transplanterade celler var cirka 1 x 108; (Samtidigt debriderades såret med infektion och cirka 1 ml cellsuspension behölls.) Subkutan injektion av sår vid basen och runt såret utfördes, dvs lokal injektion av sårytan.
3. dos: Cellerna (1 x 108 celler) blandades i 25 ml saltlösning.
4. Behandlingsförlopp: intramuskulär engångsinjektion.

Kriterier för att avbryta och avsluta klinisk forskning:

1. Avbrytande av forskning 1.1 Försökspersoner drar sig frivilligt ur studien när som helst utan att påverka vidare behandling.

   1.2 Följande biverkningar inträffade (främst med hänvisning till National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events (NCI-CTCAE) ).(1) feber, synkope, svettning, kräkningar och andra systemiska symtom med okända orsaker; (2) dysfunktion av mag-tarmkanalen med okända orsaker, aptitlöshet, illamående, utspänd buk, förstoppning eller diarré; (3) huvudvärk, trötthet, oförklarlig muskelsmärta, obehag och förändringar i sömnen; Psykiska symtom som ångest, irritabilitet, oförklarlig synnedsättning, muskeltremor, dysuri etc. Lokala yttringar som makula, erytem etc. Lokal smärtförvärring eller minskat aktivitetsområde, _Akuta förgiftningssymtom eller dödsfall.

   1.3 Forskare anser att det förekommer allvarliga brott mot forskningsprogram eller felaktig gruppering.

   1.4 Forskare menar att det finns säkerhetsproblem i forskningsprogrammet. 1,5 försökspersoner intervjuades inte. Om deltagarna avbryter behandlingen i förväg ska orsaken till utsättningen dokumenteras i Fallrapportformuläret (CRF), men uppföljning krävs fram till studiens slut och studieformuläret är ifyllt.

2. Studiens slutpunkt 2.1 Allvarliga behandlingsrelaterade biverkningar inträffade mellan slutet av behandlingen och slutet av uppföljningen.

2.2 I slutet av uppföljningen, jämfört med kontrollgruppen, sårläkning, extremitetsräddningshastighet, Ruthford-grad, smärtfri gångtid, ankel-brachial index (ABI), transkutant partialtryck av syre (TcPO2), laboratorieundersökning och vaskulär magnetisk resonanstomografi (MRA) förbättrades signifikant, vilket indikerar effektiviteten (med statistiska skillnader): Kriterier för utvärdering av effektivitet

Jämfört med kontrollgruppen, sårläkningshastighet, räddningshastighet för extremiteter, vaskulärt ultraljud i nedre extremiteter, ankel-brachial index (ABI), perkutant partialtryck av syre (TcPO2), multi-slice spiral CT angiografi (CTA), Rutherford-gradering, Wong-Baker Faces smärtpoäng för försökspersonerna förbättrades signifikant jämfört med kontrollgruppen, vilket indikerar effektiviteten (med statistiska skillnader):

Huvudsakliga utvärderingsindikatorer:

1. Sårläkning och amputation beräknades. Sårläkningshastighet = antal fullständiga sårläkningsfall / totalt antal sår i denna grupp; amputationsfrekvens = antal amputationer / totalt antal fall i denna grupp.

2 Sekundära observationsindikatorer Vaskulärt ultraljud i nedre extremiteter, ankel brachial index (ABI), perkutant partialtryck av syre (TcPO2), multi-slice spiral CT angiografi (CTA), Rutherford-klassificering, Wong-Baker Faces smärtpoäng.

Registrering av krav på biverkningar och rapporteringsmetoder och hantering av åtgärder för allvarliga biverkningar Formulera detaljerade och standardiserade "Riskhanteringsmekanismer och åtgärder för behandling av skadehändelser för klinisk stamcellsforskning" innan experimentet påbörjas. Alla försökspersoner som fått en injektion av stamceller i nedre extremiteter kommer att bli effektiv population för säkerhetsanalys. Forskare kommer troget att registrera biverkningar och biverkningar hos försökspersonerna och analysera orsakerna.

1. Biverkningar definieras som ogynnsamma och oväntade medicinska händelser under behandling och uppföljning, inklusive: (1) systemiska symtom såsom feber, synkope, svettning och kräkningar med okända orsaker; (2) gastrointestinal dysfunktion med okända orsaker, anorexi, illamående, buken utspänd, förstoppning eller diarré; och (3) huvudvärk, trötthet, oförklarlig muskelsmärta, Nej. Lämplighet och förändringar i sömn, etc. (4) Psykiska symtom såsom oförklarlig ångest, rastlöshet och rastlöshet; (5) Synnedsättning, muskelskakningar, dysuri, etc. (5) Lokala manifestationer såsom makula och erytem; (5) Lokal smärtförvärring eller minskat aktivitetsområde; och (5) Akuta förgiftningssymtom eller dödsfall.
2. Allvarliga biverkningar (SAE) definieras som händelser som kräver sjukhusvistelse, förlängd sjukhusvistelse, funktionshinder, påverkan på arbetsförmågan, livshotande eller dödshotande, medfödda missbildningar, etc. Allvaret av biverkningar måste registreras och graderas enligt CTCAE-kriterier. Förhållandet mellan SAE och behandling bör utvärderas enligt följande definitioner. (1) Irrelevant: Det finns bevis för att orsaken till biverkningar inte är intraartikulär injektionsterapi (såsom tidigare tillstånd, potentiella sjukdomar, komplikationer); 2) relaterade: biverkningar är tidsrelaterade med intraartikulär injektion av läkemedel och kända eller misstänkta att intramuskulär injektion av läkemedel i nedre extremiteter kan orsaka biverkningarna; 3) oförmögen att bedöma. Biverkningar måste registreras i fallrapportformuläret (CRF) relaterade avsnitt, som måste beskrivas som: start- och slutdatum; negativa händelseutfall; om de leder till att de drar sig ur studien; om de är relaterade till intramuskulära läkemedelsinjektioner i nedre extremiteterna; och om de är allvarliga biverkningar.

Rapportering av allvarliga biverkningar

Tidsgräns för rapportering:

Inom 24 timmar efter observatörernas kännedom om tidpunkten för allvarliga biverkningar. Rapporteringsläge Telefon eller fax, och fyll i registreringsformuläret för allvarliga biverkningar och skicka det till huvudforskarna, deklarationsenheterna, etiska kommittéerna och den statliga livsmedels- och läkemedelsmyndigheten