Estudio clínico de células madre derivadas de tejido adiposo en el tratamiento del pie diabético

diseño de la investigación: Se diseñó un ensayo controlado aleatorizado. De acuerdo con los criterios de inclusión/exclusión establecidos, los sujetos se dividieron aleatoriamente en dos grupos mediante una tabla de números aleatorios. Cada grupo recibió Células Madre Mesenquimales (MSCs) de fuentes grasas y tratamiento convencional del pie diabético de acuerdo con los resultados estimados del tamaño de la muestra. Se realizó un estudio controlado aleatorio con tres ciegos. Los sujetos estaban ciegos, las intervenciones estaban ciegas y los evaluadores estaban ciegos. Los sujetos fueron agrupados al azar y asistidos por coordinadores. El seguimiento se llevó a cabo en 5 puntos temporales 7 días, 1, 3, 6 y 12 meses después de la operación para evaluar el dolor y los cambios funcionales de los sujetos, y para evaluar la seguridad y eficacia.

Se ejecutarán los criterios de inclusión, criterios de exclusión y métodos de asignación de materias, criterios de entrada y criterios de exclusión.

Método de asignación y agrupación:

Se realizó un estudio controlado aleatorio con tres ciegos. Los sujetos estaban ciegos, las intervenciones estaban ciegas y los evaluadores estaban ciegos. Los sujetos fueron agrupados al azar y asistidos por coordinadores. Después de recibir el número aleatorio, las muestras de prueba y las inyecciones se marcan con el número de investigación en lugar de los nombres de los sujetos. El sistema informático determina aleatoriamente las inyecciones de células madre o solución salina y no se divulgarán a los sujetos. Los grupos de sujetos no informaron a los intervinientes que cada inyección fue preparada por un asistente y que la jeringa estaba cubierta con un paño negro. El operador y los participantes no sabrían qué droga se inyectó. La evaluación es realizada por un tercero y la agrupación no será revelada al evaluador. Después de la selección preliminar de sujetos calificados, después de firmar el consentimiento informado y verificar los criterios de entrada/exclusión por parte de la unidad de investigación, y confirmar que cumplen con la selección. criterios, de acuerdo con los resultados del sistema aleatorio, la distribución de sujetos se realiza estrictamente de acuerdo con los resultados aleatorios. Registros de ingreso de sujetos: los investigadores deben completar los formularios de registro correspondientes de acuerdo con el orden de inscripción de los participantes, incluido el formulario de selección. , el formulario de identificación y el formulario de registro de inscripción de los participantes. Todas las hojas de prueba relacionadas con la investigación deben adjuntarse a la hoja de registro original que conserva el investigador. La tabla de registro original es también el registro original de este estudio que se monitorea de acuerdo con el principio de Buenas Prácticas Clínicas (BPC).

Número de casos requeridos:

Para probar la eficacia de la terapia con células madre en el tratamiento de la necrosis isquémica de miembros inferiores en pacientes diabéticos, los sujetos se dividieron aleatoriamente en un grupo de tratamiento con células madre y un grupo de control. Ambos grupos recibieron tratamiento de rutina, mientras que el grupo de tratamiento con células madre recibiría terapia con células madre. Según los resultados de Lu Debin et al., la tasa efectiva de la terapia con células madre para la necrosis isquémica de los miembros inferiores en pacientes diabéticos puede alcanzar el 83,3 %, mientras que la tasa efectiva en el grupo control es del 45 %. En este estudio se utilizará una prueba bilateral, tomando alfa = 0,05, beta = 0,1, y calculando el tamaño de la muestra de acuerdo con la siguiente fórmula .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P) )2 N es el tamaño de muestra requerido para cada grupo de tratamiento. En este estudio, el tamaño de la muestra se dividió en dos grupos, y el tamaño de la muestra de cada grupo fue el mismo.

Ualpha y Ubeta son las desviaciones normales estándar correspondientes a alfa y beta respectivamente. Mirando la tabla de cuantiles de distribución normal, podemos ver que Ualpha(0.05)=1.65, Ubeta(0,1)=1,28.

P 0 y P 1 representan las tasas efectivas del grupo de control y el grupo de tratamiento con células madre, respectivamente. En este estudio, P 0 = 45%, P 1 = 83,3%; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Los parámetros y valores numéricos anteriores se introducen en el cálculo de la fórmula.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 Había 54 pacientes en los dos grupos. Teniendo en cuenta que algunos pacientes podrían retirarse del estudio, el tamaño de la muestra original se agregó al 10 % del tamaño de la muestra y el tamaño de la muestra final del estudio fue de 60.

Uso, dosis, tiempo y curso de tratamiento de las preparaciones de células madre:

1. Preparación de células madre: células madre derivadas de grasa autóloga.
2. Uso: Inyección muscular de las extremidades inferiores. La anestesia del trasplante de células madre adiposas se realizó mediante anestesia lumbar; Se inyectaron células madre adiposas purificadas por vía intramuscular en las extremidades inferiores a intervalos de 3 cm, que podían inyectarse en unos 50 puntos, 0,5 ml de suspensión de células madre en cada punto, aproximadamente 1 x 106 células, 25 puntos en las extremidades inferiores, 25 puntos en la planta del pie y bienestar, y el número total de células trasplantadas fue de aproximadamente 1 x 108; (Al mismo tiempo, se desbridó la úlcera con infección y se retuvo aproximadamente 1 ml de suspensión celular). Se realizó una inyección subcutánea de la úlcera en la base y alrededor de la úlcera, es decir, una inyección local en la superficie de la herida.
3. dosis: Las células (1 x 108 células) se mezclaron en 25 ml de solución salina.
4. curso de tratamiento: inyección intramuscular de una sola vez.

Criterios para la interrupción y terminación de la investigación clínica:

1. Interrupción de la investigación 1.1 Los sujetos se retiran voluntariamente del estudio en cualquier momento sin afectar el tratamiento posterior.

   1.2 Ocurrieron los siguientes eventos adversos (principalmente referidos a los Criterios de Terminología Común para Eventos Adversos del Instituto Nacional del Cáncer (NCI-CTCAE)).(1) fiebre, síncope, sudoración, vómitos y otros síntomas sistémicos con causas desconocidas; (2) disfunción del tracto gastrointestinal de causas desconocidas, pérdida de apetito, náuseas, distensión abdominal, estreñimiento o diarrea; (3) dolor de cabeza, fatiga, dolor muscular inexplicable, malestar y cambios en el sueño; Síntomas mentales como ansiedad, irritabilidad, discapacidad visual inexplicable, temblor muscular, disuria, etc. Manifestaciones locales como mácula cutánea, eritema, etc. Agravación del dolor local o reducción del rango de actividad, _Síntomas de intoxicación aguda o muerte.

   1.3 Los investigadores creen que existen violaciones graves de los programas de investigación o agrupación incorrecta.

   1.4 Los investigadores creen que existen problemas de seguridad en el programa de investigación. 1,5 sujetos no fueron entrevistados. Si los participantes interrumpen el tratamiento por adelantado, la causa de la interrupción debe documentarse en el Formulario de informe de caso (CRF), pero se requiere un seguimiento hasta el final del estudio y se completa el formulario del estudio.

2. Criterio de valoración del estudio 2.1 Ocurrieron eventos adversos graves relacionados con el tratamiento entre el final del tratamiento y el final del seguimiento.

2.2 Al final del seguimiento, en comparación con el grupo de control, la cicatrización de la úlcera, la tasa de supervivencia de la extremidad, el grado de Ruthford, el tiempo de marcha sin dolor, el índice tobillo-brazo (ITB), la presión parcial transcutánea de oxígeno (TcPO2), el examen de laboratorio y la resonancia magnética vascular (ARM) mejoró significativamente, indicando la efectividad (con diferencias estadísticas): Criterios para evaluar la eficacia

En comparación con el grupo de control, la tasa de curación de la úlcera, la tasa de recuperación de la extremidad, la ecografía vascular de la extremidad inferior, el índice tobillo-brazo (ABI), la presión parcial percutánea de oxígeno (TcPO2), la angiografía por tomografía computarizada en espiral (CTA) de múltiples cortes, la clasificación de Rutherford, La puntuación de dolor de Wong-Baker Faces de los sujetos mejoró significativamente en comparación con el grupo de control, lo que indica la eficacia (con diferencias estadísticas):

Principales Indicadores de Evaluación:

1. Se calcularon la cicatrización de úlceras y la amputación. Tasa de cicatrización de úlceras = número de casos de cicatrización completa de heridas/número total de úlceras en este grupo; tasa de amputaciones = número de amputaciones / número total de casos en este grupo.

2 Indicadores de observación secundarios Ultrasonido vascular de las extremidades inferiores, índice tobillo-brazo (ABI), presión parcial percutánea de oxígeno (TcPO2), angiografía por TC espiral de múltiples cortes (CTA), clasificación de Rutherford, puntuación de dolor de Wong-Baker Faces.

Requisitos de registro de eventos adversos y métodos de notificación y medidas de manejo de eventos adversos graves Formular "Mecanismos de gestión de riesgos y medidas de procesamiento de eventos de daño para la investigación clínica de células madre" detallados y estandarizados antes del inicio del experimento. Todos los sujetos que recibieron inyección de células madre en los músculos de las extremidades inferiores se convertirán en población efectiva para el análisis de seguridad. Los investigadores registrarán fielmente los efectos secundarios y los eventos adversos de los sujetos y analizarán las causas.

1. Los eventos adversos se definen como eventos médicos adversos e inesperados durante el tratamiento y el seguimiento, que incluyen: (1) síntomas sistémicos como fiebre, síncope, sudoración y vómitos con causas desconocidas; (2) disfunción gastrointestinal de causa desconocida, anorexia, náuseas, distensión abdominal, estreñimiento o diarrea; y (3) dolor de cabeza, fatiga, dolor muscular inexplicable, No. Idoneidad y cambios en el sueño, etc. (4) Síntomas mentales tales como ansiedad, inquietud e inquietud inexplicables; (5) Discapacidad visual, temblor muscular, disuria, etc. (5) Manifestaciones locales como mácula cutánea y eritema; (5) Empeoramiento del dolor local o reducción del rango de actividad; y (5) Síntomas de envenenamiento agudo o muerte.
2. Los eventos adversos graves (SAEs, por sus siglas en inglés) se definen como eventos que requieren hospitalización, hospitalización prolongada, discapacidad, que afectan la capacidad laboral, que amenazan la vida o la muerte, malformaciones congénitas, etc. La severidad de los eventos adversos debe ser registrada y calificada de acuerdo a los criterios CTCAE. La relación entre los SAE y el tratamiento debe evaluarse de acuerdo con las siguientes definiciones. (1) Irrelevante: Hay evidencia de que la causa de los eventos adversos no es la terapia de inyección intraarticular (como condiciones pasadas, enfermedades potenciales, complicaciones); 2) relacionados: los eventos adversos están relacionados con el tiempo con la inyección intraarticular de fármacos y se sabe o se sospecha que la inyección intramuscular de fármacos en las extremidades inferiores puede causar los eventos adversos; 3) incapaz de evaluar. Los eventos adversos deben registrarse en las secciones relacionadas con el Formulario de informe de casos (CRF), que deben describirse como: fechas de inicio y finalización; resultados de eventos adversos; si conducen al retiro del estudio; si están relacionados con las inyecciones intramusculares de fármacos en las extremidades inferiores; y si son eventos adversos graves.

Notificación de eventos adversos graves

Límite de tiempo de informe:

Dentro de las 24 horas posteriores al conocimiento por parte de los observadores del momento de los eventos adversos graves. Modo de reporte Teléfono o fax, y llenar el Formulario de Registro de Eventos Adversos Graves y enviarlo a los principales investigadores, unidades de declaración, comités de ética y la Administración Estatal de Alimentos y Medicamentos