Étude clinique des cellules souches dérivées du tissu adipeux dans le traitement du pied diabétique

conception de la recherche : Un essai contrôlé randomisé a été conçu. Selon les critères d'inclusion/exclusion établis, les sujets ont été divisés au hasard en deux groupes par table de nombres aléatoires. Chaque groupe a reçu des cellules souches mésenchymateuses (MSC) provenant de sources de graisse et un traitement conventionnel du pied diabétique en fonction des résultats estimés de la taille de l'échantillon. Une étude contrôlée randomisée a été menée en trois aveugles. Les sujets étaient aveugles, les interventions étaient aveugles et les évaluateurs étaient aveugles. Les sujets ont été regroupés au hasard et assistés par des coordinateurs. Un suivi a été effectué à 5 moments 7 jours, 1, 3, 6 et 12 mois après l'opération pour évaluer la douleur et les changements fonctionnels des sujets, et pour évaluer la sécurité et l'efficacité.

L'inclusion des sujets, les critères d'exclusion et les méthodes d'attribution des critères d'entrée et des critères d'exclusion seront exécutés.

Mode d'attribution et de regroupement :

Une étude contrôlée randomisée a été menée en trois aveugles. Les sujets étaient aveugles, les interventions étaient aveugles et les évaluateurs étaient aveugles. Les sujets ont été regroupés au hasard et assistés par des coordinateurs. Après avoir reçu le numéro aléatoire, les échantillons de test et les injections sont marqués par le numéro de recherche plutôt que par les noms des sujets. Les injections de cellules souches ou de solution saline sont déterminées au hasard par le système informatique et ne seront pas divulguées aux sujets. Les groupes de sujets n'informaient pas les intervenants que chaque injection était préparée par un assistant et que la seringue était recouverte d'un tissu noir. L'opérateur et les participants ne sauraient pas quelle drogue a été injectée. L'évaluation est effectuée par un tiers et le regroupement ne sera pas divulgué à l'évaluateur. critères, selon les résultats du système aléatoire, la répartition des sujets est strictement effectuée en fonction des résultats aléatoires.Dossiers d'entrée des sujets : les chercheurs doivent remplir les formulaires d'enregistrement correspondants en fonction de l'ordre d'inscription des participants, y compris le formulaire de sélection , la fiche d'identification et la fiche d'inscription des participants. Toutes les feuilles de test liées à la recherche doivent être jointes à la feuille d'enregistrement originale conservée par le chercheur. Le tableau d'enregistrement original est également l'enregistrement original de cette étude qui est surveillée selon le principe des bonnes pratiques cliniques (GCP).

Nombre de cas requis :

Pour tester l'efficacité de la thérapie par cellules souches dans le traitement de la nécrose ischémique des membres inférieurs chez les patients diabétiques, les sujets ont été divisés au hasard en groupe de traitement par cellules souches et groupe témoin. Les deux groupes ont reçu un traitement de routine, tandis que le groupe de traitement par cellules souches recevrait une thérapie par cellules souches. Selon les résultats de Lu Debin et al., le taux effectif de thérapie par cellules souches pour la nécrose ischémique des membres inférieurs chez les patients diabétiques peut atteindre 83,3 %, alors que le taux effectif dans le groupe témoin est de 45 %. Dans cette étude, un test bilatéral sera utilisé, en prenant alpha = 0,05, bêta = 0,1, et en calculant la taille de l'échantillon selon la formule suivante .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P )2 N est la taille d'échantillon requise pour chaque groupe de traitement. Dans cette étude, la taille de l'échantillon a été divisée en deux groupes et la taille de l'échantillon de chaque groupe était la même.

Ualpha et Ubeta sont les écarts-types normaux correspondant respectivement à alpha et bêta. En regardant le tableau des quantiles de distribution normale, nous pouvons voir que Ualpha(0.05)=1.65, Ubeta(0.1)=1.28.

P 0 et P 1 représentent respectivement les taux effectifs du groupe témoin et du groupe de traitement par cellules souches. Dans cette étude, P 0 = 45 %, P 1 = 83,3 % ; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Les paramètres et valeurs numériques ci-dessus sont introduits dans le calcul de la formule.

N=(1.65+1.28)2*2*0.6416(1-0.6416)/(0.833-0.45)2=26.8732≈27 Il y avait 54 patients dans les deux groupes. Étant donné que certains patients pourraient se retirer de l'étude, la taille de l'échantillon initial a été ajoutée à 10 % de la taille de l'échantillon, et la taille de l'échantillon final de l'étude était de 60.

Utilisation, posologie, durée et durée du traitement des préparations de cellules souches :

1. Préparation de cellules souches : cellules souches dérivées de graisse autologue.
2. Utilisation : injection dans les muscles des membres inférieurs. L'anesthésie par greffe de cellules souches adipeuses a été réalisée par anesthésie lombaire ; des cellules souches adipeuses purifiées ont été injectées par voie intramusculaire dans les membres inférieurs à des intervalles de 3 cm, qui pouvaient être injectées à environ 50 points, 0,5 ml de suspension de cellules souches à chaque point, environ 1 x 106 cellules, 25 points dans les membres inférieurs, 25 points dans la semelle et bien-être, et le nombre total de cellules transplantées était d'environ 1 x 108 ; (Dans le même temps, l'ulcère infecté a été débridé et environ 1 ml de suspension cellulaire a été conservé.) Une injection sous-cutanée de l'ulcère à la base et autour de l'ulcère a été réalisée, c'est-à-dire une injection locale de la surface de la plaie.
3. dose : Les cellules (1 x 108 cellules) ont été mélangées dans 25 ml de solution saline.
4. cours de traitement: injection intramusculaire unique.

Critères d'arrêt et d'arrêt de la recherche clinique :

1. Arrêt de la recherche 1.1 Les sujets se retirent volontairement de l'étude à tout moment sans affecter la suite du traitement.

   1.2 Les événements indésirables suivants sont survenus (se référant principalement aux Critères de terminologie communs du National Cancer Institute pour les événements indésirables (NCI-CTCAE)).(1) fièvre, syncope, transpiration, vomissements et autres symptômes systémiques avec des causes inconnues ; (2) dysfonctionnement du tractus gastro-intestinal avec des causes inconnues, perte d'appétit, nausées, distension abdominale, constipation ou diarrhée ; (3) maux de tête, fatigue, douleurs musculaires inexpliquées, inconfort et troubles du sommeil ; Symptômes mentaux tels qu'anxiété, irritabilité, déficience visuelle inexpliquée, tremblements musculaires, dysurie, etc. Manifestations locales telles que macula cutanée, érythème, etc.

   1.3 Les chercheurs pensent qu'il y a de graves violations des programmes de recherche ou des regroupements incorrects.

   1.4 Les chercheurs croient qu'il y a des problèmes de sécurité dans le programme de recherche. 1,5 sujets n'ont pas été interrogés. Si les participants interrompent le traitement à l'avance, la cause de l'arrêt doit être documentée dans le formulaire de rapport de cas (CRF), mais un suivi est requis jusqu'à la fin de l'étude et le formulaire d'étude est rempli.

2. Critère d'évaluation de l'étude 2.1 Des événements indésirables sévères liés au traitement sont survenus entre la fin du traitement et la fin du suivi.

2.2 A la fin du suivi, par rapport au groupe témoin, la cicatrisation des ulcères, le taux de sauvetage de membre, le grade de Ruthford, le temps de marche indolore, l'index cheville-bras (IPS), la pression partielle transcutanée d'oxygène (TcPO2), l'examen de laboratoire et l'imagerie par résonance magnétique vasculaire (ARM) s'est améliorée de manière significative, indiquant l'efficacité (avec des différences statistiques) : Critères d'évaluation de l'efficacité

Par rapport au groupe témoin, le taux de cicatrisation de l'ulcère, le taux de sauvetage de membre, l'échographie vasculaire du membre inférieur, l'index cheville-bras (IPS), la pression partielle percutanée d'oxygène (TcPO2), l'angioscanner spiralé multicoupe (CTA), le classement de Rutherford, Le score de douleur Wong-Baker Faces des sujets s'est amélioré de manière significative par rapport au groupe témoin, indiquant l'efficacité (avec des différences statistiques) :

Principaux indicateurs d'évaluation :

1. La cicatrisation et l'amputation de l'ulcère ont été calculées. Taux de cicatrisation des ulcères = nombre de cas de cicatrisation complète / nombre total d'ulcères dans ce groupe ; taux d'amputation = nombre d'amputations / nombre total de cas dans ce groupe.

2 Indicateurs d'observation secondaires Échographie vasculaire des membres inférieurs, index cheville-bras (IPS), pression partielle d'oxygène percutanée (TcPO2), angioscanner spiralé multicoupe (CTA), classification de Rutherford, score de douleur de Wong-Baker Faces.

Exigences d'enregistrement des événements indésirables et méthodes de notification et mesures de gestion des événements indésirables graves Formuler des « mécanismes de gestion des risques et mesures de traitement des événements dommageables pour la recherche clinique sur les cellules souches » détaillés et normalisés avant le début de l'expérience. Tous les sujets qui ont reçu une injection de cellules souches dans les muscles des membres inférieurs deviendront une population efficace pour l'analyse de sécurité. Les chercheurs enregistreront fidèlement les effets secondaires et les événements indésirables des sujets et en analyseront les causes.

1. Les événements indésirables sont définis comme des événements médicaux indésirables et inattendus au cours du traitement et du suivi, notamment : (1) des symptômes systémiques tels que fièvre, syncope, transpiration et vomissements d'origine inconnue ; (2) dysfonctionnement gastro-intestinal de causes inconnues, anorexie, nausées, distension abdominale, constipation ou diarrhée ; et (3) maux de tête, fatigue, douleurs musculaires inexpliquées, non. Pertinence et changements dans le sommeil, etc. (4) Symptômes mentaux tels qu'anxiété, agitation et agitation inexpliquées; (5) Déficience visuelle, tremblements musculaires, dysurie, etc. (5) Manifestations locales telles que macula cutanée et érythème ; (5) Aggravation de la douleur locale ou plage d'activité réduite; et (5) Symptômes d'empoisonnement aigu ou décès.
2. Les événements indésirables graves (EIG) sont définis comme des événements nécessitant une hospitalisation, prolongeant l'hospitalisation, une invalidité, impactant la capacité de travail, engageant la vie ou la mort, malformations congénitales, etc. La gravité des événements indésirables doit être enregistrée et graduée selon les critères du CTCAE. La relation entre les EIG et le traitement doit être évaluée selon les définitions suivantes. (1) Non pertinent : il existe des preuves que la cause des événements indésirables n'est pas la thérapie par injection intra-articulaire (telle que des conditions passées, des maladies potentielles, des complications) ; 2) liés : les événements indésirables sont liés au temps avec l'injection intra-articulaire de médicaments et connus ou soupçonnés que l'injection intramusculaire de médicaments dans les membres inférieurs peut causer les événements indésirables ; 3) incapable d'évaluer. Les événements indésirables doivent être enregistrés dans les sections liées au formulaire de déclaration de cas (CRF), qui doivent être décrites comme suit : dates de début et de fin ; les résultats des événements indésirables ; si elles conduisent au retrait de l'étude ; s'ils sont liés à des injections intramusculaires de drogues dans les membres inférieurs ; et s'il s'agit d'événements indésirables graves.

Déclaration des événements indésirables graves

Délai de déclaration :

Dans les 24 heures suivant la connaissance par les observateurs de l'heure des événements indésirables graves. Mode de notification Téléphone ou fax, et remplissez le formulaire d'enregistrement des événements indésirables graves et envoyez-le aux principaux chercheurs, unités de déclaration, comités d'éthique et à la State Food and Drug Administration