Klinische Studie zu aus Fett gewonnenen Stammzellen bei der Behandlung von diabetischem Fuß

Forschungsdesign: Es wurde eine randomisierte kontrollierte Studie konzipiert. Gemäß den festgelegten Einschlusskriterien/Ausschlusskriterien wurden die Probanden per Zufallszahlentabelle zufällig in zwei Gruppen eingeteilt. Jede Gruppe erhielt mesenchymale Stammzellen (MSCs) aus Fettquellen und eine herkömmliche diabetische Fußbehandlung gemäß den geschätzten Ergebnissen der Probengröße. Es wurde eine randomisierte kontrollierte Studie mit drei Blinds durchgeführt. Die Probanden waren blind, die Interventionen waren blind und die Auswerter waren blind. Die Probanden wurden nach dem Zufallsprinzip gruppiert und von Koordinatoren unterstützt. Nachuntersuchungen wurden zu 5 Zeitpunkten 7 Tage, 1, 3, 6 und 12 Monate nach der Operation durchgeführt, um die Schmerzen und funktionellen Veränderungen der Probanden sowie die Sicherheit und Wirksamkeit zu bewerten.

Themeneinschluss, Ausschlusskriterien und Zuordnungsmethoden Einschlusskriterien und Ausschlusskriterien werden ausgeführt.

Methode der Zuordnung und Gruppierung:

Es wurde eine randomisierte kontrollierte Studie mit drei Blinds durchgeführt. Die Probanden waren blind, die Interventionen waren blind und die Auswerter waren blind. Die Probanden wurden nach dem Zufallsprinzip gruppiert und von Koordinatoren unterstützt. Nach Erhalt der Zufallszahl werden die Prüflinge und Injektionen nicht mit den Namen der Probanden, sondern mit der Forschungsnummer gekennzeichnet. Injektionen von Stammzellen oder Kochsalzlösung werden vom Computersystem nach dem Zufallsprinzip bestimmt und den Probanden nicht mitgeteilt. Die Probandengruppen informierten die Intervenierenden nicht darüber, dass jede Injektion von einem Assistenten vorbereitet wurde und die Spritze mit einem schwarzen Tuch bedeckt war. Der Bediener und die Teilnehmer würden nicht wissen, welches Medikament injiziert wurde. Die Bewertung wird von einem Dritten durchgeführt und die Gruppierung wird dem Bewerter nicht mitgeteilt. Nach vorläufigem Screening qualifizierter Probanden, nach Unterzeichnung der Einverständniserklärung und Überprüfung der Einreise- / Ausschlusskriterien durch die Forschungseinheit und Bestätigung, dass sie die Auswahl erfüllen Kriterien, entsprechend den Ergebnissen des Zufallssystems, die Verteilung der Probanden erfolgt strikt nach den Zufallsergebnissen. Probandeneintragungsaufzeichnungen: Die Forscher sollten die entsprechenden Aufzeichnungsformulare in der Reihenfolge der Anmeldung der Teilnehmer ausfüllen, einschließlich des Screening-Formulars , das Identifikationsformular und das Anmeldeformular der Teilnehmer. Alle forschungsbezogenen Testbögen müssen dem vom Forscher aufbewahrten Original-Erfassungsbogen beigefügt werden. Die Originalaufzeichnungstabelle ist auch die Originalaufzeichnung dieser Studie, die nach dem Prinzip der Guten Klinischen Praxis (GCP) überwacht wird.

Anzahl der benötigten Fälle:

Um die Wirksamkeit der Stammzelltherapie bei der Behandlung der ischämischen Nekrose der unteren Extremitäten bei Diabetikern zu testen, wurden die Probanden nach dem Zufallsprinzip in eine Stammzellbehandlungsgruppe und eine Kontrollgruppe eingeteilt. Beide Gruppen erhielten eine Routinebehandlung, während die Stammzellbehandlungsgruppe eine Stammzelltherapie erhalten würde. Nach den Ergebnissen von Lu Debin et al. kann die effektive Rate der Stammzelltherapie bei ischämischer Nekrose der unteren Gliedmaßen bei Diabetikern 83,3 % erreichen, während die effektive Rate in der Kontrollgruppe 45 % beträgt. In dieser Studie wird ein zweiseitiger Test verwendet, wobei Alpha = 0,05, Beta = 0,1 angenommen und die Stichprobengröße gemäß der folgenden Formel berechnet wird: .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P )2 N ist die für jede Behandlungsgruppe erforderliche Stichprobengröße. In dieser Studie wurde die Stichprobengröße in zwei Gruppen aufgeteilt, und die Stichprobengröße jeder Gruppe war gleich.

Ualpha und Ubeta sind die Standardnormalabweichungen, die Alpha bzw. Beta entsprechen. Wenn wir uns die Quantiltabelle der Normalverteilung ansehen, können wir sehen, dass Ualpha(0,05)=1,65, Ubeta(0,1)=1,28.

P 0 und P 1 repräsentieren die effektiven Raten der Kontrollgruppe bzw. der Stammzellbehandlungsgruppe. In dieser Studie ist P 0 = 45 %, P 1 = 83,3 %; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Die obigen Parameter und Zahlenwerte werden in die Formelrechnung eingeführt.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 Es gab 54 Patienten in den beiden Gruppen. In Anbetracht dessen, dass einige Patienten aus der Studie ausscheiden könnten, wurde die ursprüngliche Stichprobengröße auf 10 % der Stichprobengröße erhöht, und die endgültige Stichprobengröße der Studie betrug 60.

Anwendung, Dosierung, Zeitpunkt und Verlauf der Behandlung von Stammzellpräparaten:

1. Stammzellpräparat: Aus Eigenfett gewonnene Stammzellen.
2. Anwendung: Muskelinjektion der unteren Extremität. Die Anästhesie der Fettstammzelltransplantation wurde durch Lumbalanästhesie durchgeführt; Gereinigte Fettstammzellen wurden in Intervallen von 3 cm intramuskulär in die unteren Extremitäten injiziert, die an etwa 50 Punkten injiziert werden konnten, 0,5 ml Stammzellsuspension an jedem Punkt, etwa 1 x 106 Zellen, 25 Punkte in den unteren Extremitäten, 25 Punkte in der Fußsohle und Wohlbefinden, und die Gesamtzahl der transplantierten Zellen betrug etwa 1 x 108; (Gleichzeitig wurde das Geschwür mit Infektion debridiert und etwa 1 ml Zellsuspension zurückbehalten.) Es wurde eine subkutane Injektion des Geschwürs an der Basis und um das Geschwür herum durchgeführt, d. h. eine lokale Injektion der Wundoberfläche.
3. Dosis: Die Zellen (1 x 108 Zellen) wurden in 25 ml Kochsalzlösung gemischt.
4. Behandlungsverlauf: einmalige intramuskuläre Injektion.

Kriterien für Abbruch und Beendigung der klinischen Forschung:

1. Studienabbruch 1.1 Die Probanden brechen die Studie jederzeit freiwillig ab, ohne die weitere Behandlung zu beeinträchtigen.

   1.2 Die folgenden unerwünschten Ereignisse traten auf (hauptsächlich in Bezug auf die Common Terminology Criteria for Adverse Events (NCI-CTCAE) des National Cancer Institute): (1) Fieber, Synkope, Schwitzen, Erbrechen und andere systemische Symptome mit unbekannter Ursache; (2) Dysfunktion des Gastrointestinaltrakts mit unbekannten Ursachen, Appetitlosigkeit, Übelkeit, Blähungen, Verstopfung oder Durchfall; (3) Kopfschmerzen, Müdigkeit, unerklärliche Muskelschmerzen, Unbehagen und Schlafstörungen; Psychische Symptome wie Angst, Reizbarkeit, unerklärliche Sehbehinderung, Muskelzittern, Dysurie etc. Lokale Manifestationen wie Hautmakula, Erythem etc. Lokale Schmerzverstärkung oder eingeschränktes Aktivitätsspektrum, _Akute Vergiftungssymptome oder Tod.

   1.3 Forscher glauben, dass es schwerwiegende Verstöße gegen Forschungsprogramme oder eine falsche Gruppierung gibt.

   1.4 Forscher glauben, dass es Sicherheitsprobleme im Forschungsprogramm gibt. 1,5 Probanden wurden nicht befragt. Wenn die Teilnehmer die Behandlung vorzeitig abbrechen, muss der Grund des Abbruchs im Fallberichtsformular (CRF) dokumentiert werden, aber eine Nachverfolgung ist erforderlich, bis das Ende der Studie und das Studienformular ausgefüllt sind.

2. Endpunkt der Studie 2.1 Schwere behandlungsbedingte unerwünschte Ereignisse traten zwischen dem Ende der Behandlung und dem Ende der Nachbeobachtung auf.

2.2 Am Ende der Nachbeobachtung, verglichen mit der Kontrollgruppe, Ulkusheilung, Gliedererhaltungsrate, Ruthford-Grad, schmerzfreie Gehzeit, Knöchel-Arm-Index (ABI), transkutaner Sauerstoffpartialdruck (TcPO2), Laboruntersuchung und vaskuläre Magnetresonanztomographie (MRA) signifikant verbessert, was auf die Wirksamkeit hinweist (mit statistischen Unterschieden): Kriterien zur Bewertung der Wirksamkeit

Verglichen mit der Kontrollgruppe, Heilungsrate von Geschwüren, Überlebensrate von Gliedmaßen, vaskulärer Ultraschall der unteren Extremitäten, Knöchel-Arm-Index (ABI), perkutaner Sauerstoffpartialdruck (TcPO2), Multi-Slice-Spiral-CT-Angiographie (CTA), Rutherford-Einstufung, Der Wong-Baker Faces-Schmerzwert der Probanden verbesserte sich im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant, was auf die Wirksamkeit hinweist (mit statistischen Unterschieden):

Hauptbewertungsindikatoren:

1. Ulkusheilung und Amputation wurden berechnet. Ulkusheilungsrate = Anzahl der Fälle vollständiger Wundheilung / Gesamtzahl der Ulzera in dieser Gruppe; Amputationsrate = Anzahl der Amputationen / Gesamtzahl der Fälle in dieser Gruppe.

2 Sekundäre Beobachtungsindikatoren Gefäßultraschall der unteren Extremitäten, Knöchel-Arm-Index (ABI), perkutaner Sauerstoffpartialdruck (TcPO2), Multi-Slice-Spiral-CT-Angiographie (CTA), Rutherford-Klassifikation, Wong-Baker Faces-Schmerzwert.

Erfassungsanforderungen von unerwünschten Ereignissen und Meldemethoden sowie Maßnahmen zum Umgang mit schwerwiegenden unerwünschten Ereignissen Formulieren Sie vor Beginn des Experiments detaillierte und standardisierte "Risikomanagementmechanismen und Maßnahmen zur Schadensbearbeitung für klinische Stammzellenforschung". Alle Probanden, die eine Injektion von Stammzellen in den Muskel der unteren Extremitäten erhalten haben, werden zu einer effektiven Population für die Sicherheitsanalyse. Die Forscher werden die Nebenwirkungen und unerwünschten Ereignisse der Probanden gewissenhaft aufzeichnen und die Ursachen analysieren.

1. Unerwünschte Ereignisse sind definiert als unerwünschte und unerwartete medizinische Ereignisse während der Behandlung und Nachsorge, einschließlich: (1) systemische Symptome wie Fieber, Synkope, Schwitzen und Erbrechen mit unbekannter Ursache; (2) gastrointestinale Dysfunktion mit unbekannten Ursachen, Anorexie, Übelkeit, Blähungen, Verstopfung oder Durchfall; und (3) Kopfschmerzen, Müdigkeit, unerklärliche Muskelschmerzen, Nr. Eignung und Veränderungen im Schlaf usw. (4) psychische Symptome wie unerklärliche Angst, Unruhe und Unruhe; (5) Sehbehinderung, Muskelzittern, Dysurie usw. (5) Lokale Manifestationen wie Hautmakula und Erythem; (5) Lokale Schmerzverschlimmerung oder reduzierter Aktivitätsbereich; und (5) akute Vergiftungssymptome oder Tod.
2. Schwere unerwünschte Ereignisse (SUE) sind definiert als Ereignisse, die einen Krankenhausaufenthalt erfordern, einen Krankenhausaufenthalt verlängern, Invalidität, Beeinträchtigung der Arbeitsfähigkeit, Lebens- oder Todesgefahr, angeborene Fehlbildungen usw. Der Schweregrad unerwünschter Ereignisse muss erfasst und gemäß den CTCAE-Kriterien eingestuft werden. Die Beziehung zwischen SUE und Behandlung sollte gemäß den folgenden Definitionen bewertet werden. (1) Irrelevant: Es gibt Hinweise darauf, dass die Ursache für unerwünschte Ereignisse nicht die intraartikuläre Injektionstherapie ist (z. B. frühere Zustände, potenzielle Krankheiten, Komplikationen); 2) verwandt: Nebenwirkungen sind zeitlich mit der intraartikulären Injektion von Arzneimitteln verbunden, und es ist bekannt oder vermutet, dass die intramuskuläre Injektion von Arzneimitteln in die unteren Extremitäten die unerwünschten Ereignisse verursachen kann; 3) nicht beurteilen können. Unerwünschte Ereignisse müssen in den entsprechenden Abschnitten des Fallberichtsformulars (CRF) aufgezeichnet werden, die wie folgt beschrieben werden müssen: Start- und Enddatum; Folgen von unerwünschten Ereignissen; ob sie zum Studienabbruch führen; ob sie mit intramuskulären Arzneimittelinjektionen in die unteren Extremitäten zusammenhängen; und ob es sich um schwerwiegende unerwünschte Ereignisse handelt.

Meldung schwerwiegender unerwünschter Ereignisse

Meldefrist:

Innerhalb von 24 Stunden nach Kenntnis des Beobachters vom Zeitpunkt schwerwiegender unerwünschter Ereignisse. Meldemodus Telefon oder Fax, und füllen Sie das Record Form of Serious Adverse Events aus und senden Sie es an die Hauptforscher, Deklarationseinheiten, Ethikkommissionen und die State Food and Drug Administration