A zsírból származó őssejtek klinikai vizsgálata a diabéteszes láb kezelésében

kutatási terv: Véletlenszerű, kontrollált vizsgálatot terveztek. A megállapított befogadási kritériumok/kizárási kritériumok szerint az alanyokat véletlenszerűen két csoportra osztották véletlenszámtáblázat alapján. Mindegyik csoport kapott zsírforrásból származó mezenchimális őssejteket (MSC) és hagyományos diabéteszes lábkezelést a mintanagyság becsült eredményei szerint. Egy randomizált, kontrollált vizsgálatot három vakon végeztek. Az alanyok vakok, a beavatkozások vakok, az értékelők pedig vakok. Az alanyokat véletlenszerűen csoportosították, és koordinátorok segítették őket. Az utánkövetést 5 időpontban, 7 nappal, 1, 3, 6 és 12 hónappal a műtét után végeztük, hogy értékeljük az alanyok fájdalmát és funkcionális változásait, valamint értékeljük a biztonságot és a hatékonyságot.

Tantárgyfelvételi, kizárási kritériumok és kiosztási módszerek A felvételi kritériumok és a kizárási kritériumok végrehajtásra kerülnek.

Az elosztás és csoportosítás módja:

Egy randomizált, kontrollált vizsgálatot három vakon végeztek. Az alanyok vakok, a beavatkozások vakok, az értékelők pedig vakok. Az alanyokat véletlenszerűen csoportosították, és koordinátorok segítették őket. A véletlen szám beérkezése után a próbatesteket és injekciókat a kutatási számmal, nem pedig az alanyok nevével jelölik. Az őssejt- vagy sóoldat-injekciókat a számítógépes rendszer véletlenszerűen határozza meg, és az alanyok nem hozzák nyilvánosságra. Az alanycsoportok nem tájékoztatták a beavatkozókat, hogy minden injekciót egy asszisztens készített, és a fecskendőt fekete ruhával borították. A kezelő és a résztvevők nem tudták, melyik gyógyszert injekciózták be. Az értékelést harmadik fél végzi, és a csoportosítást nem hozzuk nyilvánosságra az értékelőnek. A minősített alanyok előzetes szűrése után, miután aláírta a beleegyező nyilatkozatot, és a kutatási egység ellenőrizte a felvételi/kizárási kritériumokat, és megerősítette, hogy megfelelnek a kiválasztási feltételeknek. kritériumok szerint, a véletlenszerű rendszer eredményei szerint az alanyok elosztása szigorúan a véletlenszerű eredmények szerint történik. Tantárgyfelvételi feljegyzések: A kutatóknak a résztvevők jelentkezési sorrendjének megfelelően kell kitölteniük a megfelelő adatlapokat, beleértve a szűrési űrlapot is. , az azonosító nyomtatvány és a résztvevők beiratkozásának adatlapja. Minden kutatással kapcsolatos tesztlapot csatolni kell a kutató által vezetett eredeti adatlaphoz. Az eredeti rekordtábla egyben ennek a vizsgálatnak az eredeti rekordja is, amelyet a Good Clinical Practice (GCP) elve szerint figyelnek.

Szükséges esetek száma:

Az őssejtterápia hatékonyságának tesztelésére az alsó végtagi ischaemiás nekrózis kezelésében cukorbetegeknél, az alanyokat véletlenszerűen őssejtkezelési csoportra és kontrollcsoportra osztottuk. Mindkét csoport rutinkezelésben, míg az őssejtkezelésben részesülő csoport őssejtterápiában részesült. Lu Debin és munkatársai eredményei szerint a diabéteszes betegek alsó végtagi ischaemiás nekrózisának őssejtterápiájának eredményessége elérheti a 83,3%-ot, míg a kontrollcsoportban a 45%-ot. Ebben a vizsgálatban kétoldalú tesztet használunk, alfa = 0,05, béta = 0,1, és a minta méretének kiszámítása a következő képlet szerint: .N=(Ualpha+Ubeta)22P(1-P)/(P1-P )2 N az egyes kezelési csoportokhoz szükséges mintanagyság. Ebben a vizsgálatban a mintanagyságot két csoportra osztottuk, és mindegyik csoport mintanagysága azonos volt.

Az Ualfa és az Ubeta az alfa és a béta szabványos normál eltérései. A normál eloszlás kvantilis táblázatát tekintve láthatjuk, hogy Ualpha(0.05)=1.65, Ubeta(0,1)=1,28.

P 0 és P 1 a kontrollcsoport és az őssejtkezelési csoport hatékony arányát jelenti. Ebben a vizsgálatban P 0 = 45%, P 1 = 83,3%; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, A fenti paraméterek és számértékek bekerülnek a képlet számításába.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 A két csoportban 54 beteg volt. Tekintettel arra, hogy egyes betegek kiléphetnek a vizsgálatból, az eredeti mintaméretet hozzáadtuk a mintanagyság 10%-ához, és a vizsgálat végső mintája 60 volt.

Az őssejt-készítmények felhasználása, adagolása, ideje és kezelési menete:

1. Őssejt készítmény: autológ zsírból származó őssejtek.
2. Használata: Alsó végtag izom injekciója. A zsír őssejt transzplantációs érzéstelenítést ágyéki érzéstelenítéssel végeztük; tisztított zsíros őssejteket injektáltunk intramuszkulárisan az alsó végtagokba 3 cm-es időközönként, ami kb. 50 ponton volt beadható, minden ponton 0,5 ml őssejtszuszpenzió, kb. 1 x 106 sejt, 25 pont az alsó végtagokba, 25 pont a talpba és a jólét, és az átültetett sejtek teljes száma körülbelül 1 x 108 volt; (Ugyanakkor a fertőzéssel járó fekély eltávolításra került, és kb. 1 ml sejtszuszpenzió maradt vissza.) A fekély szubkután injekciója a tövében és a fekély körül történt, azaz a sebfelszín lokális injekciója.
3. adag: A sejteket (1 x 108 sejt) 25 ml sóoldatban összekevertük.
4. kúra: egyszeri intramuszkuláris injekció.

A klinikai kutatás leállításának és befejezésének kritériumai:

1. A kutatás megszakítása 1.1 Az alanyok bármikor önként kilépnek a vizsgálatból anélkül, hogy ez befolyásolná a további kezelést.

   1.2 A következő nemkívánatos események fordultak elő (főleg a National Cancer Institute Common Terminology Criteria for Adverse Events-re (NCI-CTCAE) hivatkozva).(1) láz, ájulás, verejtékezés, hányás és egyéb ismeretlen okú szisztémás tünetek; (2) a gyomor-bél traktus működési zavara ismeretlen okból, étvágytalanság, hányinger, hasi puffadás, székrekedés vagy hasmenés; (3) fejfájás, fáradtság, megmagyarázhatatlan izomfájdalom, kellemetlen érzés és alvászavarok; Mentális tünetek, mint például szorongás, ingerlékenység, megmagyarázhatatlan látásromlás, izomremegés, dysuria stb. Helyi megnyilvánulások, mint a bőr makula, bőrpír, stb. Helyi fájdalomfokozás vagy csökkent aktivitási tartomány, _Akut mérgezési tünetek vagy halál.

   1.3 A kutatók úgy vélik, hogy a kutatási programok súlyos megsértése vagy helytelen csoportosítás történt.

   1.4 A kutatók úgy vélik, hogy biztonsági problémák vannak a kutatási programban. 1,5 alanyt nem kérdeztek meg. Ha a résztvevők előzetesen abbahagyják a kezelést, a abbahagyás okát dokumentálni kell az esetjelentés űrlapon (CRF), de a vizsgálat végéig nyomon követésre van szükség, és a vizsgálati űrlapot kitöltik.

2. A vizsgálat végpontja 2.1 Súlyos, kezeléssel összefüggő nemkívánatos események fordultak elő a kezelés vége és az utánkövetés vége között.

2.2 Az utánkövetés végén a kontroll csoporthoz képest a fekély gyógyulása, a végtag megmentési aránya, Ruthford fokozat, fájdalommentes járási idő, boka-kar index (ABI), transzkután oxigén parciális nyomás (TcPO2), laboratóriumi vizsgálat és a vaszkuláris mágneses rezonancia képalkotás (MRA) szignifikánsan javult, ami a hatékonyságot jelzi (statisztikai eltérésekkel): A hatékonyság értékelésének kritériumai

A kontrollcsoporttal összehasonlítva a fekély gyógyulási sebessége, a végtag megmentési aránya, az alsó végtagi vaszkuláris ultrahang, a boka-kar index (ABI), az oxigén perkután parciális nyomása (TcPO2), a többszeletű spirális CT angiográfia (CTA), a Rutherford-osztályozás, Az alanyok Wong-Baker Faces fájdalompontszáma szignifikánsan javult a kontrollcsoporthoz képest, ami jelzi a hatékonyságot (statisztikai különbségekkel):

Fő értékelési mutatók:

1. A fekélyek gyógyulását és amputációját számoltuk. A fekélyek gyógyulási aránya = a teljes sebgyógyulási esetek száma / a fekélyek teljes száma ebben a csoportban; amputációs ráta = amputációk száma / esetek teljes száma ebben a csoportban.

2 Másodlagos megfigyelési indikátorok Alsó végtagi vaszkuláris ultrahang, boka brachialis index (ABI), perkután parciális oxigénnyomás (TcPO2), többszeletű spirális CT angiográfia (CTA), Rutherford-osztályozás, Wong-Baker Faces fájdalompontszám.

A nemkívánatos események rögzítési követelményei és a jelentési módszerek és a súlyos nemkívánatos események kezelési intézkedései A kísérlet megkezdése előtt részletes és szabványosított „Kockázatkezelési mechanizmusok és káresemény-feldolgozási intézkedések az őssejt-klinikai kutatáshoz” című dokumentumot kell megfogalmazni. Minden olyan alany, aki alsó végtag izomzatába őssejt injekciót kapott, hatékony populációvá válik a biztonsági elemzéshez. A kutatók hűen rögzítik az alanyok mellékhatásait és nemkívánatos eseményeit, és elemzik az okokat.

1. A nemkívánatos események a kezelés és a nyomon követés során bekövetkező nemkívánatos és váratlan orvosi események, beleértve a következőket: (1) szisztémás tünetek, mint például láz, ájulás, izzadás és hányás ismeretlen okokból; (2) ismeretlen okokkal járó gyomor-bélrendszeri diszfunkció, étvágytalanság, hányinger, hasi puffadás, székrekedés vagy hasmenés; és (3) fejfájás, fáradtság, megmagyarázhatatlan izomfájdalom, nem. Alkalmasság és változások az alvásban stb. (4) Mentális tünetek, mint például megmagyarázhatatlan szorongás, nyugtalanság és nyugtalanság; (5) Látáskárosodás, izomremegés, dysuria stb. (5) Helyi megnyilvánulások, mint például a bőr makula és erythema; (5) Helyi fájdalom erősödése vagy csökkent aktivitási tartomány; és (5) akut mérgezési tünetek vagy halál.
2. Súlyos nemkívánatos események (SAE) olyan események, amelyek kórházi kezelést igényelnek, meghosszabbítják a kórházi kezelést, fogyatékosságot okoznak, befolyásolják a munkaképességet, élet- vagy halálveszélyesek, veleszületett fejlődési rendellenességek stb. A nemkívánatos események súlyosságát rögzíteni kell, és a CTCAE kritériumai szerint osztályozni kell. A SAE és a kezelés közötti kapcsolatot a következő definíciók szerint kell értékelni. (1) Irreleváns: Bizonyíték van arra, hogy a nemkívánatos események oka nem az intraartikuláris injekciós terápia (például múltbeli állapotok, lehetséges betegségek, szövődmények); 2) összefüggő: a nemkívánatos események az intraartikuláris gyógyszerinjekcióval kapcsolatos idővel kapcsolatosak, és ismert vagy feltételezhető, hogy a gyógyszerek alsó végtagokba adott intramuszkuláris injekciója okozhat nemkívánatos eseményeket; 3) nem tudja felmérni. A nemkívánatos eseményeket rögzíteni kell az Esetjelentés űrlap (CRF) kapcsolódó részeiben, amelyeket a következőképpen kell leírni: kezdő és befejező dátumok; nemkívánatos események kimenetele; a vizsgálatból való kilépéshez vezetnek-e; hogy összefüggenek-e az alsó végtag intramuszkuláris gyógyszerinjekciójával; és hogy ezek súlyos nemkívánatos események-e.

Súlyos nemkívánatos események jelentése

Bejelentési határidő:

24 órán belül azt követően, hogy a Megfigyelők tudomást szereztek a súlyos nemkívánatos események időpontjáról. Jelentési mód Telefonáljon vagy faxon, töltse ki a súlyos nemkívánatos események jegyzőkönyvét, és küldje el a fő kutatóknak, nyilatkozati egységeknek, etikai bizottságoknak és az Állami Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hatóságnak.