Клиническое исследование стволовых клеток, полученных из жировой ткани, в лечении диабетической стопы

Дизайн исследования: было разработано рандомизированное контролируемое исследование. В соответствии с установленными критериями включения/исключения испытуемые были случайным образом разделены на две группы по таблице случайных чисел. Каждая группа получала мезенхимальные стволовые клетки (МСК) из источников жира и традиционное лечение диабетической стопы в соответствии с предполагаемыми результатами размера выборки. Было проведено рандомизированное контролируемое исследование с тремя слепыми. Субъекты были слепы, вмешательства были слепы, и оценщики были слепы. Субъекты были случайным образом сгруппированы, и им помогали координаторы. Последующее наблюдение проводилось в 5 временных точках через 7 дней, 1, 3, 6 и 12 месяцев после операции для оценки боли и функциональных изменений у субъектов, а также для оценки безопасности и эффективности.

Критерии включения субъекта, критерии исключения и критерии включения методов распределения и критерии исключения будут выполнены.

Метод выделения и группировки:

Было проведено рандомизированное контролируемое исследование с тремя слепыми. Субъекты были слепы, вмешательства были слепы, и оценщики были слепы. Субъекты были случайным образом сгруппированы, и им помогали координаторы. После получения случайного числа тестовые образцы и инъекции помечаются номером исследования, а не именами испытуемых. Инъекции стволовых клеток или физиологического раствора определяются компьютерной системой случайным образом и не сообщаются субъектам. Группы испытуемых не сообщали интервентам, что каждую инъекцию готовил ассистент, а шприц был покрыт черной тканью. Оператор и участники не знали, какое лекарство было введено. Оценка проводится третьей стороной, и группировка не будет раскрыта оценщику. После предварительного отбора подходящих субъектов, после подписания информированного согласия и проверки критериев включения / исключения исследовательским подразделением и подтверждения того, что они соответствуют выбору критерии, по результатам случайной системы, распределение испытуемых осуществляется строго по случайным результатам. Записи о включении субъектов: Исследователи должны заполнить соответствующие регистрационные формы в соответствии с порядком зачисления участников, включая форму скрининга. , идентификационная форма и форма регистрации участников. Все контрольные листы, связанные с исследованием, должны быть приложены к оригинальному листу учета, хранящемуся у исследователя. Исходная таблица записей также является исходной записью этого исследования, которое отслеживается в соответствии с принципами надлежащей клинической практики (GCP).

Необходимое количество случаев:

Чтобы проверить эффективность терапии стволовыми клетками при лечении ишемического некроза нижних конечностей у пациентов с диабетом, субъекты были случайным образом разделены на группу лечения стволовыми клетками и контрольную группу. Обе группы получали стандартное лечение, в то время как группа лечения стволовыми клетками получала терапию стволовыми клетками. По данным Lu Debin и соавт., эффективность терапии стволовыми клетками при ишемическом некрозе нижних конечностей у больных сахарным диабетом может достигать 83,3%, в то время как эффективность в контрольной группе составляет 45%. В этом исследовании будет использоваться двусторонний тест, принимающий альфа = 0,05, бета = 0,1 и вычисляющий размер выборки по следующей формуле .N=(Uальфа+Uбета)22P(1-P)/(P1-P )2 N — размер выборки, необходимый для каждой лечебной группы. В этом исследовании размер выборки был разделен на две группы, и размер выборки в каждой группе был одинаковым.

Uальфа и Uбета являются стандартными нормальными отклонениями, соответствующими альфа и бета соответственно. Глядя на таблицу квантилей нормального распределения, мы видим, что Uальфа(0,05)=1,65, Убета(0,1)=1,28.

P 0 и P 1 представляют собой эффективные показатели контрольной группы и группы лечения стволовыми клетками соответственно. В этом исследовании P 0 = 45%, P 1 = 83,3%; P = (P 0 + P 1) / 2 = (0,45 + 0,8333) / 2 = 0,6416, Вышеуказанные параметры и численные значения вводятся в формулу расчета.

N=(1,65+1,28)2*2*0,6416(1-0,6416)/(0,833-0,45)2=26,8732≈27 В обеих группах было 54 пациента. Учитывая, что некоторые пациенты могут выйти из исследования, первоначальный размер выборки был добавлен к 10% размера выборки, и окончательный размер выборки исследования составил 60.

Применение, дозировка, время и курс лечения препаратами стволовых клеток:

1. Подготовка стволовых клеток: стволовые клетки, полученные из собственного жира.
2. Применение: инъекции в мышцы нижних конечностей. Анестезию при трансплантации жировых стволовых клеток проводили люмбальной анестезией; очищенные жировые стволовые клетки вводили внутримышечно в нижние конечности с интервалом 3 см, которые можно было вводить примерно в 50 точках, по 0,5 мл суспензии стволовых клеток в каждую точку, примерно 1 х 106 клеток, 25 точек в нижние конечности, 25 точек в подошву. и самочувствие, а общее количество трансплантированных клеток составило около 1 х 108; (При этом язву с инфекцией санировали, оставив около 1 мл клеточной взвеси.) Осуществляли подкожную инъекцию язвы в основание и вокруг язвы, т.е. локальную инъекцию раневой поверхности.
3. доза: клетки (1×108 клеток) смешивали с 25 мл физиологического раствора.
4. курс лечения: однократно внутримышечно.

Критерии прекращения и прекращения клинических исследований:

1. Прекращение исследования 1.1 Субъекты добровольно отказываются от участия в исследовании в любое время, что не влияет на дальнейшее лечение.

   1.2 Произошли следующие нежелательные явления (в основном в соответствии с Общими терминологическими критериями нежелательных явлений Национального института рака (NCI-CTCAE)). (1) лихорадка, обмороки, потливость, рвота и другие системные симптомы с неизвестными причинами; (2) дисфункция желудочно-кишечного тракта по неизвестным причинам, потеря аппетита, тошнота, вздутие живота, запор или диарея; (3) головная боль, усталость, необъяснимая мышечная боль, дискомфорт и изменения сна; Психические симптомы, такие как тревога, раздражительность, необъяснимые нарушения зрения, мышечный тремор, дизурия и т. д. Местные проявления, такие как пятна на коже, эритема и т. д. Местное усиление боли или снижение активности, симптомы острого отравления или смерть.

   1.3 Исследователи считают, что имеют место серьезные нарушения программ исследований или неправильная группировка.

   1.4 Исследователи считают, что в исследовательской программе есть проблемы с безопасностью. 1,5 испытуемых не были опрошены. Если участники прекращают лечение заранее, причина прекращения должна быть задокументирована в форме истории болезни (CRF), но последующее наблюдение требуется до окончания исследования и заполнения формы исследования.

2. Конечная точка исследования 2.1 В период между окончанием лечения и окончанием периода наблюдения возникали тяжелые побочные эффекты, связанные с лечением.

2.2 В конце наблюдения, по сравнению с контрольной группой, заживление язвы, скорость спасения конечности, степень Ruthford, время безболезненной ходьбы, лодыжечно-плечевой индекс (ЛПИ), чрескожное парциальное давление кислорода (TcPO2), лабораторное исследование и магнитно-резонансная томография сосудов (МРА) значительно улучшилась, что указывает на эффективность (со статистическими различиями): Критерии оценки эффективности

По сравнению с контрольной группой, скорость заживления язв, скорость спасения конечностей, ультразвуковое исследование сосудов нижних конечностей, лодыжечно-плечевой индекс (ЛПИ), чрескожное парциальное давление кислорода (TcPO2), многосрезовая спиральная КТ-ангиография (КТА), оценка по Резерфорду, Оценка боли по шкале Wong-Baker Faces у испытуемых значительно улучшилась по сравнению с контрольной группой, что указывает на эффективность (со статистическими различиями):

Основные показатели оценки:

1. Рассчитаны заживление язвы и ампутация. Скорость заживления язв = количество случаев полного заживления ран / общее количество язв в этой группе; частота ампутаций = количество ампутаций / общее количество случаев в этой группе.

2 Вторичные показатели наблюдения Ультразвуковое исследование сосудов нижних конечностей, лодыжечно-плечевой индекс (ЛПИ), чрескожное парциальное давление кислорода (TcPO2), многосрезовая спиральная КТ-ангиография (КТА), классификация Резерфорда, оценка боли по Вонгу-Бейкеру.

Требования к регистрации нежелательных явлений, методы отчетности и меры по устранению серьезных нежелательных явлений Сформулируйте подробные и стандартизированные «Механизмы управления рисками и меры обработки событий повреждения для клинических исследований стволовых клеток» до начала эксперимента. Все субъекты, получившие инъекции стволовых клеток в мышцы нижних конечностей, станут эффективной популяцией для анализа безопасности. Исследователи будут добросовестно записывать побочные эффекты и неблагоприятные события субъектов и анализировать причины.

1. Нежелательные явления определяются как неблагоприятные и неожиданные медицинские явления во время лечения и последующего наблюдения, включая: (1) системные симптомы, такие как лихорадка, обмороки, потливость и рвота с неизвестными причинами; (2) желудочно-кишечная дисфункция с неизвестными причинами, анорексия, тошнота, вздутие живота, запор или диарея; и (3) головная боль, утомляемость, необъяснимая мышечная боль, отсутствие самочувствия и изменения сна и т. д. (4) психические симптомы, такие как необъяснимая тревога, беспокойство и беспокойство; (5) Нарушение зрения, мышечный тремор, дизурия и т. д. (5) Местные проявления в виде кожных пятен и эритемы; (5) местное усиление боли или снижение активности; и (5) Острые симптомы отравления или смерть.
2. Тяжелые нежелательные явления (СНЯ) определяются как явления, требующие госпитализации, продлевающие госпитализацию, инвалидность, влияющие на трудоспособность, опасные для жизни или смерти, врожденные пороки развития и т. д. Тяжесть нежелательных явлений должна быть зарегистрирована и классифицирована в соответствии с критериями CTCAE. Взаимосвязь между СНЯ и лечением следует оценивать в соответствии со следующими определениями. (1) Не имеет значения: Имеются данные о том, что причиной нежелательных явлений является не внутрисуставная инъекционная терапия (например, перенесенные заболевания, потенциальные заболевания, осложнения); 2) связанные: нежелательные явления связаны со временем внутрисуставного введения лекарственных средств и известно или предполагается, что внутримышечное введение лекарственных средств в нижние конечности может вызвать нежелательные явления; 3) не в состоянии оценить. Нежелательные явления должны быть зарегистрированы в соответствующих разделах формы отчета о случаях (CRF), которые должны быть описаны как: даты начала и окончания; неблагоприятные исходы событий; приводят ли они к отстранению от исследования; связаны ли они с внутримышечными инъекциями наркотиков в нижние конечности; и являются ли они серьезными неблагоприятными событиями.

Сообщение о серьезных нежелательных явлениях

Срок сдачи отчетности:

В течение 24 часов после того, как Наблюдатели узнают о времени серьезных нежелательных явлений. Режим сообщения По телефону или факсу, заполните Регистрационную форму о серьезных нежелательных явлениях и отправьте ее основным исследователям, группам деклараций, комитетам по этике и Государственному управлению по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов.