Corifollitropin Alfa ja alkion morfokinetiikka

Alkion kehityksen morfokineettisiä parametreja on tutkittu intensiivisesti. Kuitenkin vain vähän huomiota on kiinnitetty munasarjojen stimulaation vaikutukseen morfokineettisiin parametreihin. Gryshenko et ai. havaitsivat merkittävän eron alkioiden neljännessä solunjakautumisajassa (t5), jotka saatiin kontrolloidun munasarjojen hyperstimulaation jälkeen pitkillä GnRH-agonisteilla ja GnRH-antagonisteilla. Lisäksi suurempien gonadotropiiniannosten havaittiin hidastavan alkioiden kehitystä.

Tästä syystä tämän tutkimuksen tavoitteena on tutkia korifollitropiini alfan (Elonva) vaikutusta alkion morfokinetiikkaan ja hedelmällisyyshoidon tuloksiin verrattuna follitropiini beetalla (Puregon) stimuloituun kontrolliryhmään. Tutkijat olettavat, että alkioiden morfokineettisessä käyttäytymisessä on eroja eri stimulaatioprotokollien sisällä.

Yhteensä 742 alkiota 215 eri hedelmättömyydestä kärsivältä potilaalta, joille tehdään munasarjojen stimulaatio Elonvalla ja yhteensä 5148 alkiota 1136 potilaasta, joille tehdään munasarjojen stimulaatio Puregonilla. Ympäristötekijöiden poissulkemiseksi arvioinnissa erotetaan alkiot, jotka on viljelty 21 % hapessa, ja alkiot, joissa on alennettu happiolosuhteet (5 % happea) alkiossa. Ryhmät ovat iän ja BMI:n mukaisia.

Kaikille tutkimukseen osallistuneille naisille tehtiin GnRH:n (Gonadotropiinia vapauttavan hormonin) antagonistiprotokolla kontrolloidusti munasarjojen hyperstimulaatio. Potilaat saivat rekombinanttia ihmisen follikkelia stimuloivaa hormonia (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVAa annettiin 7 päivän ajan, minkä jälkeen annettiin Puregonia (MSD Sharp & Dohme GMBH), jos lisästimulaatiota tarvittiin. Puregonia annettiin 8-10 päivän ajan mukauttamalla annostusta iän, painon, seerumin anti-Muller-hormonin (sAMH) pitoisuuden ja hormonaalisen tilan mukaan. Trans-emättimen sonografia suoritettiin 5 päivän stimulaation jälkeen, jota seurasi joka toinen päivä munasolujen talteenottopäivään asti. Ultraäänimittaus suoritettiin käyttämällä GE Voluson E8 BT09 -ultraäänilaitteen (molemmat yhtiöltä GE Healthcare Austria GmbH) intravaginaalista RIC 5-9-D 4D -koetinta. GnRH-antagonisti (Cetrotide, Merck KGaA) injektoitiin ennenaikaisen ovulaation välttämiseksi. Laukaisu aloitettiin 35 tuntia ennen munasolun noutoa, annettiin 5 000 - 10 000 IU ihmisen koriongonadotropiinia (hCG) ihonalaisesti (Pregnyl, N.V. Organon) ja annos sovitettiin potilaan painon mukaan.

Yli 10 mm:n halkaisijaltaan suuremmat follikkelit aspiroitiin sedaatiossa (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) ja transvaginaalisessa ultraääniohjauksessa (GE Healthcare Austria GmbH). Follikulaarinen neste (FF) tutkittiin munasolujen varalta vakioolosuhteissa 37 °C IVF-työasemassa L24E, jossa oli lämmitysvaihe (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S). Intrasytoplasminen siittiöinjektio (ICSI) suoritettiin kaikille metafaasin II (MII) oosyyteille 4-5 tuntia munasolun talteenoton jälkeen normaalin toimintamenettelymme mukaisesti molemmissa potilasryhmissä.

Oosyyttien talteenoton ja hedelmöityksen jälkeen munasoluja viljeltiin universaalissa viljelyalustassa (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Saksa). 14-16 tunnin kuluttua tehtiin lannoitustarkastus. Kaikkia normaaleja hedelmöittyneitä alkioita, joissa oli kaksi esitumaa (PN), viljeltiin sitten käyttämällä Embryoslide-maljoja Embryoscope® time-lapse -inkubaattorissa (molemmat Vitrolife AB, Ruotsi). Sisäänrakennetulla kameralla ja mikroskoopilla otettiin kuvia kehittyvästä alkiosta 15 minuutin välein seitsemässä eri kerroksessa. Morfokineettisten parametrien määrittely suoritettiin Ciray et ai.:n ehdottamien kriteerien mukaisesti. ja analysoitiin ohjelmistolla, joka on kehitetty time-lapse-kuva-analyysiin (Embryoviewer®-ohjelmisto; Vitrolife AB, Ruotsi).