Corifollitropin Alfa och Embryo Morphokinetics

Morfokinetiska parametrar för embryoutveckling har undersökts intensivt. Men lite uppmärksamhet har ägnats åt påverkan av äggstocksstimulering på morfokinetiska parametrar. Gryshenko et al. fann en signifikant skillnad i den fjärde celldelningstiden (t5) för embryon erhållna efter kontrollerad ovariell hyperstimulering i långa GnRH-agonister och GnRH-antagonistprotokoll. Vidare visade sig högre gonadotropindoser bromsa utvecklingen av embryona.

Därför är syftet med denna studie att undersöka inverkan av corifollitropin alfa (Elonva) på embryomorfokinetiken och resultatet av fertilitetsbehandlingen i jämförelse med en kontrollgrupp stimulerad med Follitropin beta (Puregon). Utredarna antar att det finns skillnader i morfokinetiskt beteende hos embryon inom de olika stimuleringsprotokollen.

Totalt 742 embryon från 215 olika patienter som lider av infertilitet som genomgår ovariestimulering med Elonva och totalt 5148 embryon från 1136 patienter som genomgår ovariestimulering med Puregon kommer att analyseras retrospektivt. För att utesluta miljöfaktorer kommer utvärderingen att skilja mellan embryon som odlats under 21 % syre och embryon med reducerade syreförhållanden (5 % syre) i embryoskopet. Grupperna kommer att matchas ålder och BMI.

Alla kvinnor som ingick i studien genomgick GnRH (Gonadotropin-frisättande hormon) antagonistprotokoll kontrollerad ovariell hyperstimulering. Patienterna fick rekombinant humant follikelstimulerande hormon (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVA administrerades i 7 dagar med efterföljande administrering av Puregon (MSD Sharp & Dohme GMBH) vid ytterligare behov av stimulering. Puregon administrerades i 8-10 dagar med dosanpassning efter ålder, vikt, koncentration av anti-mullerianhormon (sAMH) i serum och hormonstatus. Transvaginal sonografi utfördes efter 5 dagars stimulering, följt av varannan dag fram till dagen för oocythämtning. Ultraljudsmätning utfördes med en RIC 5-9-D 4D intravaginal sond från en GE Voluson E8 BT09 ultraljudsmaskin (båda från GE Healthcare Austria GmbH). GnRH-antagonist (Cetrotide, Merck KGaA) injicerades för att undvika för tidig ägglossning. Triggning initierades 35 timmar före oocythämtning, administrerad med 5 000-10 000 IE humant koriongonadotropin (hCG) subkutant (Pregnyl, N.V. Organon), med dosanpassning efter patientens kroppsvikt.

Folliklar större än 10 mm i diameter aspirerades under sedering (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) och transvaginal ultraljudsvägledning (GE Healthcare Austria GmbH). Follikulär vätska (FF) undersöktes för oocyter under konstanta förhållanden på 37 °C i en IVF-arbetsstation L24E med uppvärmningssteg (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S). Intracytoplasmatisk spermieinjektion (ICSI) utfördes på alla metafas II (MII) oocyter 4-5 timmar efter oocythämtning enligt vår standardoperationsprocedur i båda grupperna av patienter.

Efter oocythämtning och befruktning odlades oocyter i universellt odlingsmedium (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Tyskland). Efter 14-16 timmar utfördes befruktningskontroll. Alla normala befruktade embryon med två pronuclei (PN) odlades sedan med användning av Embryoslide-skålar i Embryoscope® time-lapse inkubator (båda Vitrolife AB, Sverige). Med den inbyggda kameran och mikroskopet togs bilder av det utvecklande embryot var 15:e minut i sju olika lager. Definitionen av morfokinetiska parametrar utfördes enligt de kriterier som föreslagits av Ciray et al. och analyserades med mjukvara utvecklad för time-lapse bildanalys (Embryoviewer® programvara; Vitrolife AB, Sverige).