Corifolitropina Alfa e Morfocinética do Embrião

Parâmetros morfocinéticos do desenvolvimento embrionário têm sido intensamente investigados. No entanto, pouca atenção tem sido dada à influência da estimulação ovariana nos parâmetros morfocinéticos. Gryshenko et ai. encontraram uma diferença significativa no tempo de quarta divisão celular (t5) de embriões obtidos após hiperestimulação ovariana controlada em protocolos longos de agonistas de GnRH e antagonistas de GnRH. Além disso, verificou-se que doses mais altas de gonadotrofina retardam o desenvolvimento dos embriões.

Portanto, o objetivo deste estudo é investigar a influência da corifolitropina alfa (Elonva) na morfocinética do embrião e no resultado do tratamento de fertilidade em comparação com um grupo controle estimulado com Follitropin beta (Puregon). Os investigadores levantam a hipótese de que existem diferenças no comportamento morfocinético dos embriões dentro dos diferentes protocolos de estimulação.

Um total de 742 embriões de 215 pacientes diferentes sofrendo de infertilidade submetidas à estimulação ovariana com Elonva e um total de 5148 embriões de 1136 pacientes submetidas à estimulação ovariana com Puregon serão analisados ​​retrospectivamente. Para excluir fatores ambientais, a avaliação distinguirá entre embriões cultivados sob 21% de oxigênio e embriões com condições de oxigênio reduzidas (5% de oxigênio) no embrioscópio. Os grupos terão a mesma idade e IMC.

Todas as mulheres incluídas no estudo foram submetidas a protocolo de hiperestimulação ovariana controlada por protocolo de antagonista de GnRH (hormônio liberador de gonadotropina). Os pacientes receberam hormônio folículo-estimulante humano recombinante (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVA foi administrado por 7 dias com administração subsequente de Puregon (MSD Sharp & Dohme GMBH) em caso de necessidade adicional de estimulação. Puregon foi administrado por 8 a 10 dias com adaptação da dosagem de acordo com a idade, peso, concentração sérica de hormônio antimulleriano (sAMH) e estado hormonal. A ultrassonografia transvaginal foi realizada após 5 dias de estimulação, seguida a cada dois dias até o dia da recuperação do oócito. A medição ultrassonográfica foi realizada usando uma sonda intravaginal RIC 5-9-D 4D de uma máquina de ultrassom GE Voluson E8 BT09 (ambas da GE Healthcare Austria GmbH). Antagonista de GnRH (Cetrotide, Merck KGaA) foi injetado para evitar a ovulação prematura. O desencadeamento foi iniciado 35 h antes da captação do oócito, administrado com 5.000-10.000 UI de gonadotrofina coriônica humana (hCG) por via subcutânea (Pregnyl, N.V. Organon), com adaptação da dosagem de acordo com o peso corporal da paciente.

Folículos maiores que 10 mm de diâmetro foram aspirados sob sedação (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) e orientação por ultrassom transvaginal (GE Healthcare Austria GmbH). O fluido folicular (FF) foi examinado para oócitos sob condições constantes de 37 °C em uma estação de trabalho de fertilização in vitro L24E com estágio de aquecimento (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S). A injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) foi realizada em todos os oócitos em metáfase II (MII) 4-5h após a recuperação do oócito de acordo com nosso procedimento operacional padrão em ambos os grupos de pacientes.

Após a coleta e fertilização dos oócitos, os oócitos foram cultivados em meio de cultura universal (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Alemanha). Após 14-16 h, foi realizada a verificação da fertilização. Todos os embriões fertilizados normais com dois pronúcleos (PN) foram então cultivados usando placas Embryoslide na incubadora de lapso de tempo Embryoscope® (ambos Vitrolife AB, Suécia). Com a câmera e o microscópio embutidos, as imagens do embrião em desenvolvimento foram tiradas a cada 15 minutos em sete camadas diferentes. A definição dos parâmetros morfocinéticos foi realizada de acordo com os critérios propostos por Ciray et al. e foi analisado com software desenvolvido para análise de imagem time-lapse (software Embryoviewer®; Vitrolife AB, Suécia).