Corifollitropin Alfa en Embryo Morphokinetics

Morfokinetische parameters van embryo-ontwikkeling zijn intensief onderzocht. Er is echter weinig aandacht besteed aan de invloed van ovariële stimulatie op morfokinetische parameters. Gryshenko et al. vond een significant verschil in de vierde celdelingstijd (t5) van embryo's verkregen na gecontroleerde ovariële hyperstimulatie in lange GnRH-agonisten en GnRH-antagonistprotocollen. Bovendien bleken hogere doses gonadotropine de ontwikkeling van de embryo's te vertragen.

Daarom is het doel van deze studie om de invloed van corifollitropine alfa (Elonva) op de embryomorfokinetiek en het resultaat van de vruchtbaarheidsbehandeling te onderzoeken in vergelijking met een controlegroep die werd gestimuleerd met Follitropine bèta (Puregon). De onderzoekers veronderstellen dat er verschillen zijn in het morfokinetisch gedrag van embryo's binnen de verschillende stimulatieprotocollen.

In totaal zullen 742 embryo's van 215 verschillende patiënten met onvruchtbaarheid die ovariële stimulatie met Elonva ondergaan en in totaal 5148 embryo's van 1136 patiënten die ovariële stimulatie met Puregon ondergaan, retrospectief worden geanalyseerd. Om omgevingsfactoren uit te sluiten zal bij de evaluatie onderscheid worden gemaakt tussen embryo's gekweekt onder 21% zuurstof en embryo's met verminderde zuurstofcondities (5% zuurstof) in de embryoscoop. Groepen worden qua leeftijd en BMI gematcht.

Alle vrouwen die deelnamen aan het onderzoek ondergingen GnRH (Gonadotropin-releasing hormone)-antagonist protocolgecontroleerde ovariële hyperstimulatie. Patiënten kregen recombinant humaan follikelstimulerend hormoon (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVA werd gedurende 7 dagen toegediend met daaropvolgende toediening van Puregon (MSD Sharp & Dohme GMBH) in geval van verdere stimulatie. Puregon werd gedurende 8-10 dagen toegediend met aanpassing van de dosering op basis van leeftijd, gewicht, serumconcentratie van anti-mulleriaans hormoon (sAMH) en hormonale status. Transvaginale echografie werd uitgevoerd na 5 dagen stimulatie, gevolgd door elke tweede dag tot de dag van het ophalen van de eicel. Echografische meting werd uitgevoerd met behulp van een RIC 5-9-D 4D intravaginale sonde van een GE Voluson E8 BT09 ultrasone machine (beide van GE Healthcare Austria GmbH). GnRH-antagonist (Cetrotide, Merck KGaA) werd geïnjecteerd om voortijdige ovulatie te voorkomen. De activering werd gestart 35 uur voor het ophalen van de eicel, subcutaan toegediend met 5000-10.000 IE humaan choriongonadotrofine (hCG) (Pregnyl, N.V. Organon), met aanpassing van de dosering op basis van het lichaamsgewicht van de patiënt.

Follikels groter dan 10 mm in diameter werden afgezogen onder sedatie (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) en transvaginale echografie (GE Healthcare Austria GmbH). Folliculaire vloeistof (FF) werd onderzocht op eicellen onder constante omstandigheden van 37 °C in een IVF-werkstation L24E met verwarmingstrap (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S). Intracytoplasmatische sperma-injectie (ICSI) werd uitgevoerd op alle metafase II (MII) eicellen 4-5 uur na het ophalen van de eicel volgens onze standaardwerkwijze in beide groepen patiënten.

Na het ophalen en bevruchten van de eicel werden de eicellen gekweekt in universeel kweekmedium (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Duitsland). Na 14-16 uur werd de bemesting gecontroleerd. Alle normaal bevruchte embryo's met twee pronuclei (PN) werden vervolgens gekweekt met behulp van Embryoslide-schalen in Embryoscope® time-lapse incubator (beide Vitrolife AB, Zweden). Met de ingebouwde camera en microscoop werden elke 15 minuten beelden van het zich ontwikkelende embryo gemaakt in zeven verschillende lagen. Definitie van morfokinetische parameters werd uitgevoerd volgens de criteria voorgesteld door Ciray et al. en werd geanalyseerd met software die is ontwikkeld voor time-lapse-beeldanalyse (Embryoviewer®-software; Vitrolife AB, Zweden).