Corifollitropin Alfa und Embryo-Morphokinetik

Morphokinetische Parameter der Embryonalentwicklung wurden intensiv untersucht. Dem Einfluss der ovariellen Stimulation auf morphokinetische Parameter wurde jedoch wenig Aufmerksamkeit geschenkt. Gryschenko et al. fanden einen signifikanten Unterschied in der vierten Zellteilungszeit (t5) von Embryonen, die nach kontrollierter ovarieller Hyperstimulation in Protokollen mit langen GnRH-Agonisten und GnRH-Antagonisten erhalten wurden. Darüber hinaus wurde festgestellt, dass höhere Gonadotropin-Dosen die Entwicklung der Embryonen verlangsamen.

Daher ist das Ziel dieser Studie, den Einfluss von Corifollitropin alfa (Elonva) auf die Morphokinetik des Embryos und das Ergebnis der Fertilitätsbehandlung im Vergleich zu einer mit Follitropin beta (Puregon) stimulierten Kontrollgruppe zu untersuchen. Die Forscher vermuten, dass es Unterschiede im morphokinetischen Verhalten von Embryonen innerhalb der verschiedenen Stimulationsprotokolle gibt.

Insgesamt 742 Embryonen von 215 verschiedenen Patientinnen mit Unfruchtbarkeit, die sich einer ovariellen Stimulation mit Elonva unterziehen, und insgesamt 5.148 Embryonen von 1.136 Patientinnen, die sich einer ovariellen Stimulation mit Puregon unterziehen, werden retrospektiv analysiert. Um Umweltfaktoren auszuschließen, wird bei der Auswertung im Embryoskop zwischen Embryonen, die unter 21 % Sauerstoff kultiviert werden, und Embryonen mit reduzierten Sauerstoffbedingungen (5 % Sauerstoff) unterschieden. Die Gruppen werden nach Alter und BMI angepasst.

Alle in die Studie eingeschlossenen Frauen unterzogen sich einer GnRH (Gonadotropin-Releasing-Hormon)-Antagonist-Protokoll-kontrollierten ovariellen Hyperstimulation. Die Patienten erhielten rekombinantes menschliches follikelstimulierendes Hormon (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVA wurde für 7 Tage mit anschließender Verabreichung von Puregon (MSD Sharp & Dohme GMBH) verabreicht, falls eine weitere Stimulation erforderlich war. Puregon wurde 8-10 Tage lang verabreicht, wobei die Dosierung an Alter, Gewicht, Serum-Anti-Müller-Hormon (sAMH)-Konzentration und Hormonstatus angepasst wurde. Die transvaginale Sonographie wurde nach 5 Tagen Stimulation durchgeführt, gefolgt von jedem zweiten Tag bis zum Tag der Oozytenentnahme. Die Ultraschallmessung erfolgte mit einer Intravaginalsonde RIC 5-9-D 4D eines Ultraschallgerätes GE Voluson E8 BT09 (beide von GE Healthcare Austria GmbH). GnRH-Antagonist (Cetrotide, Merck KGaA) wurde injiziert, um einen vorzeitigen Eisprung zu vermeiden. Die Triggerung wurde 35 h vor der Oozytenentnahme initiiert, verabreicht mit 5000–10.000 IE humanem Choriongonadotropin (hCG) subkutan (Pregnyl, N.V. Organon), mit Dosisanpassung entsprechend dem Körpergewicht der Patientin.

Follikel größer als 10 mm Durchmesser wurden unter Sedierung (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) und transvaginaler Ultraschallführung (GE Healthcare Austria GmbH) abgesaugt. Follikelflüssigkeit (FF) wurde unter konstanten Bedingungen von 37 °C in einer IVF-Workstation L24E mit Heiztisch (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S) auf Eizellen untersucht. Eine intrazytoplasmatische Spermieninjektion (ICSI) wurde bei allen Metaphase II (MII)-Oozyten 4–5 Stunden nach der Oozytenentnahme gemäß unserem Standardarbeitsverfahren in beiden Patientengruppen durchgeführt.

Nach Oozytengewinnung und Befruchtung wurden Oozyten in Universalkulturmedium (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Deutschland) kultiviert. Nach 14-16 h wurde die Befruchtungskontrolle durchgeführt. Alle normal befruchteten Embryonen mit zwei Vorkernen (PN) wurden dann unter Verwendung von Embryoslide-Schalen in einem Embryoscope®-Zeitraffer-Inkubator (beide Vitrolife AB, Schweden) kultiviert. Mit der eingebauten Kamera und dem Mikroskop wurden alle 15 Minuten Bilder des sich entwickelnden Embryos in sieben verschiedenen Schichten aufgenommen. Die Definition der morphokinetischen Parameter erfolgte nach den von Ciray et al. vorgeschlagenen Kriterien. und wurde mit Software analysiert, die für die Zeitrafferbildanalyse entwickelt wurde (Embryoviewer®-Software; Vitrolife AB, Schweden).