Корифоллитропин альфа и морфокинетика эмбриона

Интенсивно исследуются морфокинетические параметры развития эмбриона. Однако мало внимания уделялось влиянию стимуляции яичников на морфокинетические параметры. Грищенко и др. обнаружили значительную разницу во времени четвертого клеточного деления (t5) эмбрионов, полученных после контролируемой гиперстимуляции яичников в протоколах с длинными агонистами ГнРГ и антагонистами ГнРГ. Кроме того, было обнаружено, что более высокие дозы гонадотропина замедляют развитие эмбрионов.

Таким образом, целью данного исследования является изучение влияния корифоллитропина альфа (Элонва) на морфокинетику эмбрионов и результаты лечения бесплодия по сравнению с контрольной группой, стимулированной фоллитропином бета (Пурегон). Исследователи предполагают, что существуют различия в морфокинетическом поведении эмбрионов в рамках разных протоколов стимуляции.

Всего будет ретроспективно проанализировано 742 эмбриона от 215 различных пациенток, страдающих бесплодием, которым проводилась стимуляция яичников с помощью Elonva, и в общей сложности 5148 эмбрионов от 1136 пациенток, которым проводилась стимуляция яичников с помощью Puregon. Чтобы исключить факторы окружающей среды, оценка будет проводить различие между эмбрионами, культивируемыми при 21% кислорода, и эмбрионами с пониженным содержанием кислорода (5% кислорода) в эмбриоскопе. Группы будут соответствовать возрасту и ИМТ.

Всем женщинам, включенным в исследование, была проведена управляемая протоколом гиперстимуляция яичников с применением антагониста ГнРГ (гонадотропин-высвобождающего гормона). Пациенты получали рекомбинантный человеческий фолликулостимулирующий гормон (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVA вводили в течение 7 дней с последующим введением Пурегона (MSD Sharp & Dohme GMBH) в случае необходимости дальнейшей стимуляции. Пурегон вводили в течение 8-10 дней с адаптацией дозы в зависимости от возраста, массы тела, концентрации антимюллерова гормона (АМГ) в сыворотке крови и гормонального статуса. Трансвагинальное УЗИ выполняли через 5 дней стимуляции, а затем через день до дня извлечения ооцитов. Ультрасонографическое измерение выполняли с использованием интравагинального датчика RIC 5-9-D 4D ультразвукового аппарата GE Voluson E8 BT09 (оба производства GE Healthcare Austria GmbH). Антагонист ГнРГ (Цетротид, Merck KGaA) вводили, чтобы избежать преждевременной овуляции. Запуск инициировали за 35 часов до извлечения ооцитов, вводили 5000-10000 МЕ хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) подкожно (Прегнил, N.V. Organon) с адаптацией дозировки в соответствии с массой тела пациентки.

Фолликулы диаметром более 10 мм аспирировали под седацией (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) и трансвагинальным ультразвуковым контролем (GE Healthcare Austria GmbH). Фолликулярную жидкость (ФЖ) исследовали на наличие ооцитов при постоянных условиях 37 °C на рабочей станции ЭКО L24E с нагревательным столиком (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S). Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) выполнялась для всех ооцитов метафазы II (MII) через 4-5 часов после извлечения ооцитов в соответствии с нашей стандартной операционной процедурой в обеих группах пациенток.

После забора и оплодотворения ооциты культивировали в универсальной культуральной среде (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Германия). Через 14-16 часов проводили проверку оплодотворения. Затем все нормальные оплодотворенные эмбрионы с двумя пронуклеусами (PN) культивировали с использованием чашек Embryoslide в инкубаторе для покадровой съемки Embryoscope® (оба Vitrolife AB, Швеция). С помощью встроенной камеры и микроскопа каждые 15 минут делались снимки развивающегося эмбриона в семи различных слоях. Определение морфокинетических параметров проводили по критериям, предложенным Ciray et al. и анализировали с помощью программного обеспечения, разработанного для замедленного анализа изображений (программное обеспечение Embryoviewer®; Vitrolife AB, Швеция).