Corifollitropin Alfa og embryomorfokinetikk

Morfokinetiske parametere for embryoutvikling har blitt intensivt undersøkt. Imidlertid har liten oppmerksomhet blitt viet til påvirkningen av ovariestimulering på morfokinetiske parametere. Gryshenko et al. fant en signifikant forskjell i den fjerde celledelingstiden (t5) for embryoer oppnådd etter kontrollert ovariehyperstimulering i lange GnRH-agonister og GnRH-antagonistprotokoller. Videre ble det funnet at høyere gonadotropindoser bremser utviklingen av embryoene.

Derfor er målet med denne studien å undersøke påvirkningen av corifollitropin alfa (Elonva) på embryomorfokinetikk og fruktbarhetsbehandlingsresultat sammenlignet med en kontrollgruppe stimulert med Follitropin beta (Puregon). Etterforskerne antar at det er forskjeller i morfokinetisk oppførsel til embryoer innenfor de forskjellige stimuleringsprotokollene.

Totalt 742 embryoer fra 215 forskjellige pasienter som lider av infertilitet som gjennomgår ovariestimulering med Elonva og totalt 5148 embryoer fra 1136 pasienter som gjennomgår ovariestimulering med Puregon, vil bli retrospektivt analysert. For å utelukke miljøfaktorer vil evalueringen skille mellom embryoer dyrket under 21 % oksygen og embryoer med reduserte oksygenforhold (5 % oksygen) i embryoskopet. Gruppene vil samsvare med alder og BMI.

Alle kvinner inkludert i studien gjennomgikk GnRH (Gonadotropin-releasing hormon) antagonistprotokoll kontrollert ovariehyperstimulering. Pasientene fikk rekombinant humant follikkelstimulerende hormon (Elonva; MSD Sharp & Dohme GMBH, Puregon; MSD Sharp & Dohme GMBH). ELONVA ble administrert i 7 dager med påfølgende administrering av Puregon (MSD Sharp & Dohme GMBH) ved ytterligere behov for stimulering. Puregon ble administrert i 8-10 dager med dosetilpasning i henhold til alder, vekt, serum konsentrasjon av anti-mullerian hormon (sAMH) og hormonstatus. Transvaginal sonografi ble utført etter 5 dagers stimulering, etterfulgt av annenhver dag frem til dagen for oocytthenting. Ultrasonografisk måling ble utført ved bruk av en RIC 5-9-D 4D intravaginal sonde fra en GE Voluson E8 BT09 ultralydmaskin (begge fra GE Healthcare Austria GmbH). GnRH-antagonist (Cetrotide, Merck KGaA) ble injisert for å unngå for tidlig eggløsning. Utløsning ble initiert 35 timer før oocytthenting, administrert med 5000-10.000 IE humant koriongonadotropin (hCG) subkutant (Pregnyl, N.V. Organon), med doseringstilpasning i henhold til pasientens kroppsvekt.

Follikler større enn 10 mm i diameter ble aspirert under sedasjon (Propofol, Fresenius Kabi Austria GmbH; Rapifen, Janssen-Cilag Pharma GmbH) og transvaginal ultralydveiledning (GE Healthcare Austria GmbH). Follikulærvæske (FF) ble undersøkt for oocytter under konstante forhold på 37 °C i en IVF arbeidsstasjon L24E med varmetrinn (K-SYSTEMS Kivex Biotec A/S). Intracytoplasmatisk spermieinjeksjon (ICSI) ble utført på alle metafase II (MII) oocytter 4-5 timer etter oocyttuthenting i henhold til vår standard operasjonsprosedyre i begge pasientgruppene.

Etter oocyttuthenting og befruktning ble oocytter dyrket i universelt dyrkningsmedium (Gynemed Medizinprodukte GmbH & Co. KG, Tyskland). Etter 14-16 timer ble det utført befruktningskontroll. Alle normale befruktede embryoer med to pronuklei (PN) ble deretter dyrket ved bruk av Embryoslide-skåler i Embryoscope® time-lapse inkubator (begge Vitrolife AB, Sverige). Med det innebygde kameraet og mikroskopet ble bilder av det utviklende embryoet tatt hvert 15. minutt i syv forskjellige lag. Definisjon av morfokinetiske parametere ble utført i henhold til kriteriene foreslått av Ciray et al. og ble analysert med programvare utviklet for time-lapse bildeanalyse (Embryoviewer® programvare; Vitrolife AB, Sverige).