TRPV1- ja KCC2-geenin polymorfismien välinen suhde lapsilla, joilla on kuumekohtauksia
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Kuumekohtaukset (FS) ovat yleisin neurologinen häiriö lapsuudessa. Juuri sairauden korkean ilmaantuvuuden vuoksi ikä, johon sisältyy taipumus toistua, on erityinen haaste lastenlääketieteessä.
FS, kuten American Academy of Pediatrics (AAP) on määritellyt, ovat "kohtauksia, joita esiintyy kuumeisilla 6-60 kuukauden ikäisillä lapsilla, joilla ei ole kallonsisäistä infektiota, aineenvaihduntahäiriötä tai kuumekohtauksia".
Yksinkertainen kuumekohtaus määritellään lyhyeksi (< 15 min) yleistyneeksi kohtaukseksi, joka ei toistu 24 tunnin sisällä ja joka ilmenee kuumeisen sairauden aikana, joka ei johdu hermoston akuutista sairaudesta 6 kuukauden ja 5 vuoden ikäisellä lapsella. ei neurologisia puutteita eikä aikaisempia kuumeisia kohtauksia. Monimutkaiset kuumekohtaukset ovat fokusoituja tai yleistyneitä ja pitkittyneitä kohtauksia, jotka kestävät yli 15 minuuttia, toistuvat useammin kuin kerran 24 tunnissa ja/tai liittyvät postiktaalisiin neurologisiin poikkeavuksiin, useammin postiktaaliseen halvaukseen (Toddin halvaus) tai aiempien neurologisten puutteiden kanssa.
FN:n etiologia on edelleen lukuisten tutkimusten kohteena ja tiedetään, että se voi riippua geneettisestä taipumuksesta.
Eläintutkimukset ovat osoittaneet, että hiirillä, joilla ei ole KCC2-geeniä, on usein yleistyneitä kohtauksia, kun taas niillä, joilla on heterotsygoottinen KCC2-geenin deleetio, on alempi kohtausten alkamisen kynnys. Ihmispopulaatiossa tämän geenin mutaatioita on raportoitu lapsilla, joilla on FN sekä lapsilla, joilla on epilepsia. Polymorfismin rs2297201 KCC2-geenin ja FS:n välillä ei ole tutkittua yhteyttä.
Tutkimukset ovat osoittaneet yhteyden TRPV1-geenien ja FS:n esiintymisen välillä kokeellisissa malleissa, mutta vastaavia tutkimuksia ihmispopulaatiolla ei ole toistaiseksi tehty. Tutkimukset Moria et ai. 2012 osoitti, että polymorfismiin rs222797 TRPV1-geeni liittyy ihmisen aivokuoren kiihottumisen säätelyyn, glutamaatin siirtymiseen ja lisääntyneeseen hermosolujen kiihtymiseen. C-alleeli tämä polymorfismi liittyy suurempaan maksimaaliseen vasteeseen kaspaisiini- ja anadamiiniagonisteille. Kaikki tämä viittaa siihen, että muutokset TRPV1-geenissä, jotka johtavat lisääntyneeseen kanavatoimintoon, voivat viitata alttiuteen FS:lle.
Koska FS on geneettisesti kontrolloitu, haluamme määrittää TRPV1- ja KCC2-geenipolymorfismien yhteyden FN:n esiintymiseen.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Tutkimuksemme koskee potilasta, jolla on diagnosoitu kuumekohtaus ja joka oli sairaalahoidossa tai sai avohoitoa Belgradin yliopistollisessa lastensairaalassa
- Jokaiselle potilaalle tehtiin FS-diagnoosi ILAE-määritelmän (International Leage
- Pääkriteeri tutkimukseen osallistumiselle oli parantunut FS ilman aiempaa kuumekohtausta.
Poissulkemiskriteerit:
- Potilaat, joilla on merkkejä kallonsisäisistä infektioista ja aineenvaihdunnan epätasapainosta
- Potilaat, joilla on puutteelliset lääketieteelliset asiakirjat
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
CN: Kontrolliryhmä
Kontrolliryhmä koostui terveistä yli 5-vuotiaista lapsista, joilla ei ole koskaan ollut neurologisia häiriöitä anamneesissaan ja jotka olivat potilaita Belgradin kaupungin esikouluissa tai kouluissa.
|
Olemme eristetty DNA:ta verinäytteestä. Analysoitujen polymorfismien genotyyppien määrittämiseen käytetään reaaliaikaista PCR:ää käyttäen TaqMan-esseitä. KCC2-polymorfismeja analysoitaessa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine T-alleelia, kun taas TRPV1-geenipolymorfismissa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine G-alleelia. |
|
SFS: ryhmä yksilöitä, joilla on yksinkertainen FS
Simplex-kuumekohtaukset (SFS) kestävät alle 15 minuuttia ja niiden tyyppi on tonic-klooninen.
He eivät myöskään osoittaneet rikosten uusimisen merkkejä ensimmäisen 24 tunnin aikana ja ne diagnosoitiin potilailla, joiden ikä oli 6 kuukauden ja 5 vuoden välillä.
|
Olemme eristetty DNA:ta verinäytteestä. Analysoitujen polymorfismien genotyyppien määrittämiseen käytetään reaaliaikaista PCR:ää käyttäen TaqMan-esseitä. KCC2-polymorfismeja analysoitaessa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine T-alleelia, kun taas TRPV1-geenipolymorfismissa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine G-alleelia. |
|
CFS: ryhmä yksilöitä, joilla on monimutkainen FS
Kompleksiset kuumekohtaukset (CFS) diagnosoitiin niillä potilailla, joilla oli fokaalinen kohtaus tai epileptinen tila tai kohtaus, jonka ruumiinlämpö oli alle 38 astetta, jotka ilmenivät tyypillisen ikäryhmän ulkopuolella ja jotka lopulta toistuvat ensimmäisen 24 tunnin aikana.
|
Olemme eristetty DNA:ta verinäytteestä. Analysoitujen polymorfismien genotyyppien määrittämiseen käytetään reaaliaikaista PCR:ää käyttäen TaqMan-esseitä. KCC2-polymorfismeja analysoitaessa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine T-alleelia, kun taas TRPV1-geenipolymorfismissa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine G-alleelia. |
|
FS: Kuumekohtaukset
Mukana potilas, jolla on diagnosoitu kuumekohtauksia ja joka joutui sairaalahoitoon tai sai avohoitoa yliopistollisessa lastensairaalassa Belgradissa.
Ikäraja 1-14 vuotta
|
Olemme eristetty DNA:ta verinäytteestä. Analysoitujen polymorfismien genotyyppien määrittämiseen käytetään reaaliaikaista PCR:ää käyttäen TaqMan-esseitä. KCC2-polymorfismeja analysoitaessa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine T-alleelia, kun taas TRPV1-geenipolymorfismissa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine G-alleelia. |
|
WFS: ryhmä henkilöitä, joilla on FS ja joilla ei ole epilepsiaa
ryhmä lapsia, joilla on kuumekouristus ja ei kehittynyt epilepsia
|
Olemme eristetty DNA:ta verinäytteestä. Analysoitujen polymorfismien genotyyppien määrittämiseen käytetään reaaliaikaista PCR:ää käyttäen TaqMan-esseitä. KCC2-polymorfismeja analysoitaessa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine T-alleelia, kun taas TRPV1-geenipolymorfismissa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine G-alleelia. |
|
EFS: ryhmä henkilöitä, joilla on epilepsiaa ja kuumekohtauksia
Ryhmä kuumekohtauksia sairastavia lapsia, joille on kehittynyt epilepsia
|
Olemme eristetty DNA:ta verinäytteestä. Analysoitujen polymorfismien genotyyppien määrittämiseen käytetään reaaliaikaista PCR:ää käyttäen TaqMan-esseitä. KCC2-polymorfismeja analysoitaessa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine T-alleelia, kun taas TRPV1-geenipolymorfismissa VIC-väriaine vastasi C-alleelia ja FAM-väriaine G-alleelia. |
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Polymorfismin havaitseminen TRPV1-geenin polymorfismeissa
Aikaikkuna: 2 viikkoa
|
TRPV1-geenin polymorfismin havaitseminen tehdään PCR Real time -menetelmällä: PCR-monistuksen aikana alukkeiden lisäksi käytetään spesifisten oligonukleotidikoettimien alleelia, joka 5'-päässä on leimattu spesifisellä fluoresoivalla väriaineella ( Reportteriväri, esim. VIC ja FAM), kun taas 3'-asennossa on sammuttaja, jonka tehtävänä on estää fluoresenssipäästöt. Fluoresenssin intensiteetti kasvaa jokaisen jakson aikana ja mahdollistaa dynaamisten reaktioiden tarkkailun reaaliajassa. Viimeisen lopputuloksen jälkeen PCR-reaktio, joka lisää väriaineiden fluoresenssia, näkyy testialleelin heterotsygoottisuudessa.
Vain yhden värin fluoresenssikytkentä osoittaa homotsygoottista tilaa. VIC-väriaine vastaa alleelia C ja FAM-väri alleelia G.
|
2 viikkoa
|
|
Polymorfismin havaitseminen KCC2-geenin polymorfismeissa
Aikaikkuna: 2 viikkoa
|
KCC2-geenin polymorfismin havaitseminen tehdään PCR Real time -menetelmällä: PCR-monistuksen aikana alukkeiden lisäksi käytetään spesifisten oligonukleotidikoettimien alleelia, joka 5'-päässä on leimattu spesifisellä fluoresoivalla väriaineella ( Reportteriväri, esim. VIC ja FAM), kun taas 3'-asennossa on sammuttaja, jonka tehtävänä on estää fluoresenssipäästöt. Fluoresenssin intensiteetti kasvaa jokaisen jakson aikana ja mahdollistaa dynaamisten reaktioiden tarkkailun reaaliajassa. Viimeisen lopputuloksen jälkeen PCR-reaktio, joka lisää väriaineiden fluoresenssia, näkyy testialleelin heterotsygoottisuudessa.
Vain yhden värin fluoresenssikytkentä osoittaa homotsygoottista tilaa.
VIC-väriaine vastaa alleelia C ja FAM-väriaine alleelia T.
|
2 viikkoa
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Tutkijat
- Päätutkija: Sanja Dimitrijevic, PhD, Specila hospital for cerebral palsy and developmental neurology
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Yleiset julkaisut
- Dimitrijevic S, Cvjeticanin S, Pusica A, Jekic B, Filipovic T, Nikolic D. Anthropogenetic Variability in the Group of Individuals with Febrile Seizures: Population-Genetic Study. Biomed Res Int. 2018 Jul 5;2018:7845904. doi: 10.1155/2018/7845904. eCollection 2018.
- Leung AK, Hon KL, Leung TN. Febrile seizures: an overview. Drugs Context. 2018 Jul 16;7:212536. doi: 10.7573/dic.212536. eCollection 2018.
- Reid AY, Riazi K, Campbell Teskey G, Pittman QJ. Increased excitability and molecular changes in adult rats after a febrile seizure. Epilepsia. 2013 Apr;54(4):e45-8. doi: 10.1111/epi.12061. Epub 2013 Jan 7.
- Puskarjov M, Seja P, Heron SE, Williams TC, Ahmad F, Iona X, Oliver KL, Grinton BE, Vutskits L, Scheffer IE, Petrou S, Blaesse P, Dibbens LM, Berkovic SF, Kaila K. A variant of KCC2 from patients with febrile seizures impairs neuronal Cl- extrusion and dendritic spine formation. EMBO Rep. 2014 Jun;15(6):723-9. doi: 10.1002/embr.201438749. Epub 2014 Mar 24.
- Huang WX, Yu F, Sanchez RM, Liu YQ, Min JW, Hu JJ, Bsoul NB, Han S, Yin J, Liu WH, He XH, Peng BW. TRPV1 promotes repetitive febrile seizures by pro-inflammatory cytokines in immature brain. Brain Behav Immun. 2015 Aug;48:68-77. doi: 10.1016/j.bbi.2015.01.017. Epub 2015 Mar 20.
- Xu H, Tian W, Fu Y, Oyama TT, Anderson S, Cohen DM. Functional effects of nonsynonymous polymorphisms in the human TRPV1 gene. Am J Physiol Renal Physiol. 2007 Dec;293(6):F1865-76. doi: 10.1152/ajprenal.00347.2007. Epub 2007 Oct 3.
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- SBCPRN2
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
IPD-suunnitelman kuvaus
IPD-jaon aikakehys
IPD-jaon käyttöoikeuskriteerit
IPD-jakamista tukeva tietotyyppi
- STUDY_PROTOCOL
- MAHLA
- ICF
- CSR
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .