Naisten hedelmällisyys, ympäristötekijät ja stressin hapetin (FERTENOX)
FERTilité féminine, Agents ENvironnementaux et Stress OXydant
Ympäristöstämme löytyy synteettisiä tuotteita, joita käytetään teollisuudessa, lääketeollisuudessa, maatalouden ravinto- tai maatalousaloilla. Siten ihmiset voivat altistua samanaikaisesti useille näistä saasteista. Lisäksi nämä ympäristötekijät vaikuttavat tai voivat vaikuttaa haitallisesti hedelmällisyyteen muuttamalla sukusolujen ja alkioiden laatua hormonaalisten haittavaikutusten kautta tai lisäämällä oksidatiivista stressiä sukurauhasissa (solureitti, jonka tiedetään olevan osallisena useissa ihmisen lisääntymissairauksissa).
Tässä yhteydessä tämän projektin tavoitteena on saada kuvaavaa ja analyyttistä tietoa naisen ja munasolujen altistumisesta useille ympäristötekijöille (bisfenolit, etynyyliestradioli ja glyfosaatti). Tutkitaan näiden follikulaarisen nesteen ja virtsan saastemittausten suhdetta (koeputkihedelmöitysprotokollaa (IVF) seuranneilta naisilta Toursin yliopistollisessa sairaalassa Ranskassa) ja munasolujen laatua, IVF:ää ja raskauden onnistumista. Näiltä naisilta mitataan myös useita oksidatiivisen stressin biomarkkereita verestä ja follikulaarisesta nesteestä, jotka täyttävät elämäntapojaan koskevan kyselylomakkeen. Lopuksi, in vitro -lähestymistapojen ansiosta näiden epäpuhtauksien (yksin tai cocktaileissa) vaikutuksia ja vaikutusmekanismeja (mukaan lukien oksidatiivinen stressi) tutkitaan näiden potilaiden granulosasoluilla.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Ehdot
Interventio / Hoito
Yksityiskohtainen kuvaus
Kun Fertenox-projektista on tiedotettu Fecondation In Vitro -protokollaa käsittelevässä kokouksessa, kaikki naispotilaat, jotka eivät vastusta tutkimukseen osallistumista ja yksilöllisten tietojen käyttöä, otetaan mukaan tutkimukseen tavanomaisen bakteriologisen tutkimuksen aikana, joka suoritetaan 1-2 kuukautta ennen munasolujen kerääntyminen yliopistollisessa sairaalassa. He saavat kyselylomakkeen elämäntavoistaan tämän kokeen aikana.
Munasolujen poiminnan aattona (munasarjastimulaation lopussa) tavallisen verenkeräyksen aikana jokaista potilasta kohden kerätään kolme lisäputkea verta yliopistosairaalassa. Naiset saavat myös kierrekorkin jälkeisen virtsanäytteen ja elämäntapakyselyn täyttö tarkistetaan (joitakin neuvoja tehdään tarvittaessa potilaiden auttamiseksi kyselyn täyttämisessä). Näytteet käsitellään, jaetaan eriin ja säilytetään vaatimusten mukaisesti samana päivänä.
Munasolun poimimispäivänä potilaat keräävät ensimmäisen aamuvirtsan kotona (tai muuten sairaalassa). Täytetty kysely otetaan talteen ja jokaisesta naisesta kerätään follikulaarinen neste ja granulosasolut. Näytteet jaetaan eriin ja säilytetään vaatimusten mukaisesti samana päivänä. Granulosasoluja viljellään in vitro -menetelmiä varten tutkimuslaboratorioissa samana päivänä.
Veri-, virtsa- ja follikulaarinesteputket koodataan ja säilytetään -80°C:ssa yliopistosairaalassa toimitukseen asti laboratorioihin, joissa analysoidaan saasteita (bisfenolit, etynyyliestradioli ja glyfosaatti) ja analysoidaan oksidatiivisen stressin biomarkkereita (antioksidanttivitamiinit, FRAP). ), suoritetaan useiden entsyymien (katalaasi, superoksididismutaasi, glutationiperoksidaasi) ja hapettuneiden lipidien aktiivisuus.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Arvioitu)
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Fabrice GUERIF, MD-PhD
- Puhelinnumero: +33 02.47.47.84.76
- Sähköposti: fabrice.guerif@univ-tours.fr
Tutki yhteystietojen varmuuskopiointi
- Nimi: Virginie MAILLARD, PhD
- Puhelinnumero: +33 02.47.42.79.71
- Sähköposti: virginie.maillard@inrae.fr
Opiskelupaikat
-
-
-
Tours, Ranska, 37044
- Rekrytointi
- Department of Reproductive Medicine and Biology, Univesity Hospital, Tours
-
Ottaa yhteyttä:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Ottaa yhteyttä:
- Claire VIGNAULT, MD
-
Päätutkija:
- Fabrice GUERIF, MD-PhD
-
Alatutkija:
- Claire VIGNAULT, MD
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- 18-43-vuotias nainen
- Ensimmäinen munasolupunktio (IVF-arvo = 1)
Poissulkemiskriteerit:
- Tietojenkäsittelyn vastustus
- IVF-arvo on yhtä suuri tai suurempi kuin 2
- Munan luovutus
- Intrasytoplasminen siittiöinjektio kivesten biopsialla
- Intrasytoplasminen siittiöinjektio itsesäilyttävillä oljilla
- Sperman luovutus
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Kohortti
- Aikanäkymät: Tulevaisuuden
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
In vitro -hedelmöitysprotokolla
Naiset seurasivat osastolla koeputkihedelmöitysprotokollaa
|
Ylimääräinen verinäytteenotto munasarjojen stimulaation seurannan lopussa (oosyyttien poimimisen aattona)
Ensimmäisen virtsan kerääminen aamulla munasolun poimimispäivänä
Follikulaarisen nesteen ja granulosasolujen kerääminen munasolun poimimisen aikana.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Etinyyliestradiolin läsnäolo tai puuttuminen follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu etinyyliestradiolin mittauksella follikulaarisessa nesteessä nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
Perustaso
|
|
Etinyyliestradiolin esiintyminen tai puuttuminen virtsassa
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu etinyyliestradiolin mittauksella virtsassa nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
Perustaso
|
|
Bisfenolien esiintyminen tai puuttuminen follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu mittaamalla follikulaarisen nesteen bisfenolit nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
Perustaso
|
|
Bisfenolien esiintyminen tai puuttuminen virtsassa
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu mittaamalla bisfenolit virtsassa nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
Perustaso
|
|
Glyfosaatin esiintyminen tai puuttuminen follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu glyfosaatin mittauksella follikulaarisessa nesteessä nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Glyfosaatin esiintyminen tai puuttuminen virtsassa
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu virtsan glyfosaattimittauksella nestekromatografialla yhdistettynä tandemmassaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Etinyyliestradiolin pitoisuus follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu etinyyliestradiolin pitoisuuden perusteella follikulaarisessa nesteessä nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Etinyyliestradiolin pitoisuus virtsassa
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu etinyyliestradiolin pitoisuuden perusteella virtsassa nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Bisfenolien pitoisuus follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu bisfenolien pitoisuuden perusteella follikulaarisessa nesteessä nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Bisfenolien pitoisuus virtsassa
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu bisfenolien pitoisuuden perusteella virtsassa nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Glyfosaatin pitoisuus follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu glyfosaatin konsentraationa follikulaarisessa nesteessä nestekromatografialla yhdistettynä tandem-massaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
|
Glyfosaatin pitoisuus virtsassa
Aikaikkuna: perusviiva
|
Virtsan glyfosaattipitoisuuden perusteella arvioitu nestekromatografialla yhdistettynä tandemmassaspektrometriaan (LC-MS/MS)
|
perusviiva
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Munasolujen laatu
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu kunkin kerätyn puhkaistun munasolun tuman kypsyyden perusteella
|
perusviiva
|
|
Alkion laatu
Aikaikkuna: Päivä 2 ja päivä 5/6 munasolun keräämisen jälkeen
|
Arvioitu jokaisen puhkaisun munasolun in vitro varhaisen alkionkehityskyvyn perusteella (päivän 2 alkion morfologia, kyky saavuttaa blastokystavaihe, päivän 5/6 blastokysta morfologia, blastokystan lopputulos (siirto, jäädyttäminen, hylkääminen)
|
Päivä 2 ja päivä 5/6 munasolun keräämisen jälkeen
|
|
Alkionistutuksen onnistuminen (raskauden onnistuminen)
Aikaikkuna: Päivästä 7 alkionsiirron jälkeen beeta-hCG-määritystä varten, 8 viikon kuukautisten jälkeen sikiön sydämen toiminnan ja syntymän jälkeen
|
Arvioitu kliinisen raskauden vahvistuksella (veren beeta ihmisen koriongonadotropiinimääritys: > 1000 Unity Intenational /L), jatkuvan raskauden varmistuksella (sikiön sydämen toiminnan ultraäänimittaus) ja vahvistuksena elävänä ja terveenä syntymänä
|
Päivästä 7 alkionsiirron jälkeen beeta-hCG-määritystä varten, 8 viikon kuukautisten jälkeen sikiön sydämen toiminnan ja syntymän jälkeen
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu antioksidanttisten vitamiinien (karotenoidit, E-vitamiini, retinoli) mittauksella korkean suorituskyvyn nestekromatografialla
|
perusviiva
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu hapettuneiden lipidien (isoprostanoidien) mittauksella LC-MS/MS:llä
|
Perustaso
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu antioksidanttiteholla (FRAP: Ferric ion Reducing Antioxidant Power) spektrofotometrialla
|
Perustaso
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit follikulaarisessa nesteessä
Aikaikkuna: Perustaso
|
Arvioitu mittaamalla glutationiperoksidaasin aktiivisuus spektrofometrisesti
|
Perustaso
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit veressä
Aikaikkuna: Perustason aattona
|
Arvioitu plasman antioksidanttivitamiinien (karotenoidit, E-vitamiini, retinoli) mittauksella HPLC:llä
|
Perustason aattona
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit veressä
Aikaikkuna: Perustason aattona
|
Arvioitu plasman hapettuneiden lipidien (isoprostanoidien) mittauksella LC-MS/M:llä
|
Perustason aattona
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit veressä
Aikaikkuna: Perustason aattona
|
Arvioitu plasman antioksidanttivoiman (FRAP) mittauksella spektrofotometrialla
|
Perustason aattona
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit veressä
Aikaikkuna: Perustason aattona
|
Arvioitu mittaamalla glutationiperoksidaasin, katalaasin ja superoksididismutaasin aktiivisuuksia punasoluissa UV- ja näkyvällä spektrofotometrialla
|
Perustason aattona
|
|
Oksidatiivisen stressin biomarkkerit virtsassa
Aikaikkuna: perusviiva
|
Arvioitu hapettuneiden lipidien (isoprostanoidien) mittauksella LC-MS/MS:llä
|
perusviiva
|
|
Tietoa naisten elämäntavoista
Aikaikkuna: Kolme viimeistä kuukautta elämäntapoista ennen lähtötasoa
|
Arvioitu kyselylomakkeella sosiodemografisista ominaisuuksista, tupakoinnista, fyysisestä aktiivisuudesta, ammatillisista ja ympäristönäyttelyistä, ravintolisien (antioksidanttien) kulutuksesta, juomien kulutuksesta (hanavesi, muovipullosta, tölkit...), ruoan lämmitystottumuksista, ruuan kulutuksesta peltilaatikosta, hygienia- ja kosmetiikkatuotteiden käyttö...
|
Kolme viimeistä kuukautta elämäntapoista ennen lähtötasoa
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 24 tai 48 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu solujen elinkelpoisuuden perusteella (CCK8, elävien kuolleiden määritys)
|
24 tai 48 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 24 tai 48 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu leviämisen perusteella (BrdU)
|
24 tai 48 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 48 tai 72 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu steroidituotannon perusteella (ELISA, LC-MS)
|
48 tai 72 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 1 tai 24 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu energeettisen aineenvaihdunnan perusteella (mitokondriaaliset ja glykolyyttiset aktiivisuudet Seahorse- ja Omnilog-määrityksillä)
|
1 tai 24 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 5, 6 tai 24 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu oksidatiivisen stressin biomarkkereilla (reaktiivinen hapen tuotanto, Nrf2-ytimen translokaatio konfokaalimikroskopialla, sytometria ja fluorimetria)
|
5, 6 tai 24 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 24, 48 tai 72 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu useiden tutkittujen toimintojen (mukaan lukien oksidatiivinen stressi) markkereiden proteiiniekspressiosta (Western Blotting)
|
24, 48 tai 72 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 6 tai 24 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu useiden tutkittujen toimintojen (mukaan lukien oksidatiivinen stressi) geeniekspressio (RNAseq ja kvantitatiivinen käänteistranskriptio-PCR)
|
6 tai 24 tunnin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 1, 5, 10, 30 ja 60 minuutin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu signalointireittien proteiiniekspressiosta (Western Blotting).
|
1, 5, 10, 30 ja 60 minuutin altistuksen jälkeen
|
|
Saastuttavat vaikutukset potilaan granulosasoluihin in vitro
Aikaikkuna: 6 tunnin altistuksen jälkeen
|
Arvioitu signalointireittien geeniekspressiosta (RNAseq ja qRT-PCR).
|
6 tunnin altistuksen jälkeen
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Tutkijat
- Päätutkija: Fabrice GUERIF, MD-PhD, University Hospital, Tours
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Arvioitu)
Opintojen valmistuminen (Arvioitu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- DR200209
- 2020-A03241-38 (Muu tunniste: IdRCB)
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .